树突细胞免疫对HPV感染阳性角朊细胞生物学特性影响

为观察树突细胞免疫对HPV感染阳性角朊细胞(HIPK)增殖特性的影响及诱发杀伤性T淋巴细胞(CTL)细胞毒活性的变化。我们测定细胞生长曲线、DNA含量及细胞周期的变化，以观察HIPK增殖特性变化。同时测定树突细胞免疫前后CTL对HIPK的细胞毒作用。结果表明树突细胞免疫后，HIPK增殖受到一定影响，生长延缓，增殖幅度降低，倍增时间延长。CTL对树突细胞免疫后的HIPK杀伤明显增强。提示树突细胞免疫后HIPK出现了一定的增殖抑制现象，同时诱导了CTL的杀伤作用。     

HSP70高表达的T24细胞克隆筛选及其生物学特性

目的 筛选耐热T24细胞亚克隆,研究其生物学特性变化。方法 用热暴露筛选,联合应用免疫荧光化学方法及流式细胞仪筛选高表达HSP70的T24细胞亚克隆,计数法测定其细胞生长曲线及细胞倍增时间,流式细胞仪分析其细胞周期的变化。分子生物学方法及细胞化学方法观察有无凋亡出现。结果 有限稀释法筛选获取耐热T24单克隆细胞株（HrT24)共26株,应用免疫荧光法筛选出HSP70阳性克隆12株,取荧光较强的两株命名为HrT24e,HrT24j,FCM（平均荧光强度为0．29）检测HSPs分子的阳性表达率T24,HrT24e,HrT24j分别为2．4％,37．6％,65．8％。细胞周期分析显示T24,HrT24e,HrT24j增殖指数（proliferation index,PI分别为44．3％,39．0％,38．5％,HrT24e与T24相比差异有显意义（Yates corrected,χ^2=5.56,P=0.0183),HrT24e与T24j相比差异无显意义（Yates corrected,χ^2=0.03,P=0.543)。HrT24e与HrT24j凋亡率分别为4．7％,5．9％。分子生物学方法观察到DNA凋亡梯带出现,细胞化学方法观察到凋亡小体。结论 HrT24细胞HSP70表达增加,出现了一定的增殖抑制现象,同时观察到细胞凋亡,推测它们有较好的免疫原性。     

泌尿生殖系统肿瘤无限细胞系的建立

目的 建立人泌尿系肿瘤无限细胞系,为泌尿系肿的基础研究提供实验模型。方法 无菌取下肿瘤手术标本,分别采用组织块直接培养法,细胞悬液法,裸鼠肿瘤移植模型法进行细胞原代培养。裸鼠皮下肿瘤块发生明显增殖并长到一定程度后,再行裸鼠体内传代两次,最后取下Ｆ３代组织块进行原代培养。培养细胞传代超过２０代后按建系标准进行检测。结果 共取４３例标本,其中３８例行组织块直接培养,１８例Ｆ１代培养成功,５例Ｆ３代培养     

心肌缺血再灌注损伤中银杏提取物和双嘧达莫协同对丙二醛抑制作用定量分析

氧自由基及其脂质过氧化反应是导致心肌缺血再灌注损伤的重要因素之一。银杏提取物（Egb）可以预防心肌缺血再灌注损伤，缩小急性心肌梗死范围及减轻梗死程度。目前常用的Egb761是将银杏的有效成分加以分离、富集后制成的一种标准制剂。双嘧达莫是目前临床较多用作抗血小板聚集药。本实验在兔心肌缺血再灌注模型上研究二单用及联用抑制心肌缺血再灌注后丙二醛（MDA）含量增加的效果。     

小鼠抗人Nanog多克隆抗体的制备及其鉴定

目的用基因免疫方法制备小鼠抗人Nanog多克隆抗体并进行鉴定。方法应用Accelrys软件分析Nanog抗原表位,选择其中免疫原性较强的抗原表位（A16-V101）,从Nanog cDNA全长质粒中扩增其cDNA（258bp）序列,克隆到pBQAP-TT构建基因免疫载体,鉴定正确后与辅助载体pCMVi-GMCSF和pCMVi-Fh31。同时免疫小鼠,12周后用ELISA方法检测血清抗体滴度,Western blot方法鉴定抗体对人肾组织的特异性。同时将Nanog-AAV2病毒转染到HKC细胞,免疫荧光定位Nanog在细胞的表达。结果成功构建了Nanog基因免疫载体,经酶切及序列分析鉴定完全正确。ELISA结果显示抗体滴度为1：32000。Western blot结果显示小鼠抗Nanog多克隆抗体识别人肾组织34kD的Nanog蛋白。免疫荧光结果表明转染的Nanog基因主要表达在HKC细胞细胞核。结论用基因免疫的方法可以成功制备高效价和高特异性抗Nanog多克隆抗体。     

良性输尿管狭窄和梗阻的介入球囊扩张成形治疗

目的 :评价输尿管良性狭窄和梗阻的介入治疗效果。方法 :对 2 5例良性输尿管狭窄和梗阻患者 ,分别采用经皮肾盂穿刺顺行扩张法和经尿道逆行扩张法 ,并置入双“J”支架管进行内引流治疗。结果 :2 5例共对 2 7侧输尿管进行扩张治疗 ,成功 2 3例(2 5侧 ) ,失败 2例。随访 6～ 5 8个月 ,患者临床症状减轻或消失 ,感染得到控制 ,肾功能好转、尿流动力学、IVP、B超和放射性肾图检查不再出现梗阻现象。结论 :良性输尿管狭窄和梗阻的介入球囊扩张治疗 ,具有创伤小 ,操作简单 ,治疗效果显著     

MEBO治疗重度冻伤疗效的实验研究

目的 :研究湿润烧伤膏 (MEBO)对重度冻伤的治疗效果 ,为临床应用提供参考。方法 :将兔足制成重度冻伤模型 ,然后将动物随机分为三组进行治疗 :对照组、妥布霉素组和MEBO组 ,并对其疗效进行对比观察。结果 :MEBO对兔足重度冻伤的治疗效果即优于妥布霉素组 (P <0 0 5) ,更优于对照组 (P <0 0 1 )。结论 :MEBO对严重冻伤具有明显的治疗作用 ,可在临床放心使用     

生物人工肾小管上皮种子细胞的建立

目的 利用人Nanog基因转染生物人工肾的种子细胞（肾近曲小管上皮细胞HKC），提高其增殖能力，在较短时间内获得大量种子细胞，为克服肾脏组织工程种子细胞来源的匮乏及生物人工肾的快速构建提供新途径。 方法 制备含有人Nanog基因的复制缺陷型重组腺相关病毒血清2型病毒颗粒rAAV2-hNanog，用rAAV2-hNanog转染肾小管上皮细胞,然后采用RT-PCR检测hNanog基因在转染的肾小管上皮细胞中的表达，再用MTT、免疫荧光及激光共聚焦技术检测hNanog基因对肾小管细胞HKC生长的影响。 结果 rAAV2-hNanog转染肾小管上皮细胞后，RT-PCR检测表明hNanog基因能在肾小管上皮细胞中稳定表达；同时，小管上皮细胞在转染后的增殖能力也显著增强（P < 0.05）。光镜下观察发现，转染的小管上皮细胞的形态无明显改变。 结论 利用hNanog基因提高生物人工肾小管种子细胞的增殖能力，可为生物人工肾的快速构建及应用提供一种新的方法。     

双J管在上尿路手术中的应用分析(附163例报告)

我院自1993-07～1998-10在上尿路手术中采用国产高分子医用双Ｊ管内引流163例。现总结分析如下1　病例资料共163例置双Ｊ管内引流165次。男96例,女67例。年龄16～74岁,平均40.3岁。鹿角状及复杂性多发性肾结石取石术51例,输尿管、膀胱移植术13例,肾盂输尿管连接部狭窄15例...