HdeA在细菌外膜囊泡环境下的原位NMR研究

HdeA是一种定位于细菌周质的分子伴侣,在维持蛋白质稳态中起着重要的作用．以往对HdeA的研究主要是在体外条件下进行,限制了人们对HdeA在天然环境下发挥作用机制的理解．细菌外膜囊泡是细菌自发分泌到胞外环境的外膜囊泡,其内容物与周质环境相似．本研究将HdeA富集到细菌外膜囊泡（OMVs）中,通过核磁共振波谱研究HdeA在OMVs中的构象变化．结果表明,HdeA在其原位环境中表现出酸依赖性的构象变化．在低pH条件下HdeA主要通过S15、W16、T17、S27、T32、E36、G54、T57、C66、Q71、F74及D83等残基启动其分子伴侣功能．此外本研究也为原位研究其它周质分子伴侣的功能提供了新方法．     

基于WATERGATE的双溶剂峰抑制方法

WATERGATE（W3/W5）是NMR实验中使用较为广泛的溶剂峰抑制方法,但该方法通常仅能对一个溶剂信号进行有效抑制. 本文对WATERGATE的脉冲序列进行修饰、优化,发展了两种新的双溶剂峰抑制方法. 实验结果表明,经过修饰、优化后的WATERGATE,实验的设立非常简单,不需要复杂的优化过程就能够对双（多）溶剂峰进行有效抑制, 可用于常规1D & 2D NMR 实验、HPLC NMR实验,以及天然产物粗提取物的分析中.     

pH对血清影响的1H NMR研究

维持血液的pH在7.35～7.45范围内,是生命的基本需要. 人体生理状态的改变往往会伴随或者引发血液pH的变化. 本文通过扩散加权、横向弛豫加权以及饱和转移差谱等¹H NMR方法,对pH 7.0～7.8的血清体系进行研究,观察其中大分子和小分子代谢物的变化. 实验结果表明 pH的改变不仅能够引起血清中一些小分子代谢物化学位移的改变,还会影响小分子代谢物与蛋白的相互作用,引起这些小分子结合态和游离态含量的变化. 此外,没有观察到血清蛋白信号的明显变化,仅血清白蛋白赖氨酰信号随pH增高有高场位移.     

磁共振技术在食品质量与安全研究中的应用

食品质量与安全的检测分析关乎人们生命健康,高效可靠的检测手段是该领域研究的必需条件.磁共振技术,包括核磁共振（NMR）和磁共振成像（MRI）,是20世纪的新兴的食品检测技术．由于该技术对样品几乎无破坏性,且具有可实时快速测量、可同时检测多成分、可获得样品内部图像等优点,因此在食品检测领域的应用越来越多．为了促进该技术在食品科学领域更为深入的应用,该文对磁共振技术在国内外食品质量和安全研究领域的应用现状进行了总结．     

牛磺熊去氧酮胆酸分子结构的1H、13C NMR研究

应用多种二维核磁共振波谱方法研究并证实了熊胆汁中由牛磺熊去氧胆酸氧化生成的衍生物是牛磺熊去氧酮胆酸,同时详细介绍了根据２ＤＭＡＸＹ和ＭＡＸＹＴＯＣＳＹ谱进行谱峰归属和结构分析的过程     

液体NMR实验中溶剂峰的抑制方法

溶剂共振峰 (水峰 )的抑制是核磁共振 (NMR)波谱学 ,特别是生物NMR研究中的关键技术之一。根据其原理 ,可以大致把抑制方法分为六类 :预饱和法、选择性不激发法、弛豫加权法、脉冲梯度场法、相干选择法和数据后处理法。理想的溶剂峰抑制方法应该同时具有选择性好、效率高和容易使用三个特点。现有的方法或多或少都存在一定缺陷 ,因此 ,需要根据具体实验选择比较合适的溶剂峰抑制方法。本文对这些方法的特点和适用范围作了介绍 ,期望能够对于溶剂峰抑制方法的选择有所帮助。     

乌头碱对大鼠尿样代谢产物影响的

将NMR谱和主成分分析(principal component analysis, PCA)相结合用于研究不同剂量下乌头碱（aconitine, AC）急性毒性作用后大鼠尿样的代谢特征. 结果表明灌胃给药后代表能量代谢的柠檬酸（citrate）,2-酮戊二酸（2-oxoglutarate）和顺乌火酸（cis-aconitate）,反应肠道菌群代谢状况的马尿酸盐（hippurate）和苯乙尿酸（phenylacetylglycine）出现异常,并且这些变化在给药后0~8 h达到最大,16 h后基本恢复正常. 且给药剂量越大代谢物异常越明显,需要的恢复时间也越长. 实验中发现2-oxoglutarate的异常增加可能与AC的神经毒性有关,或与2-oxoglutarate的代谢异常有关. 这些信息为进一步阐明AC的毒理学机制和临床毒性监测都会有一定的帮助.     

利用迭代软阈值方法抑制恒时演化类核磁共振实验中的采样截断伪峰

采样截断,即信号衰减殆尽之前结束采样,会在核磁共振(NMR)谱图中引入振荡状伪峰,进而影响谱图质量.在多维核磁共振实验中,为减少实验时间并为后续脉冲序列保留自旋相干,采样必然在信号衰减完毕之前结束,因此采样截断在所难免.变迹法(窗函数法)可以抑制采样截断造成的伪峰,但会导致谱峰增宽.线性预测也有助于减小截断伪峰.采样截断最严重的场合,是在恒时演化类实验中.这类实验的间接维演化时间固定,因此间接维采样信号强度没有表观衰减.本研究提出的迭代软阈值方法(Iterative Soft Thresholding,IST)虽然因为调节参数困难而在一般场合中应用受限,但恒时演化类(Constant time,CT)NMR实验的间接维信号缺没有表观衰减,这为IST处理参数设置提供了简化条件.本研究通过数据模拟和实验数据,证明了IST是抑制CT-NMR实验中采样截断伪峰的有效方法,并与其它相关方法进行了对比.     

无谱峰畸变的定量13C DEPT++谱研究

具有定量特征的极化转移¹³C NMR 因检测灵敏度和分辨率高而常用于有机物的NMR 定量分析,比如Q-DEPT、Q-DEPT⁺等．但是,DEPT 检测本身存在相位和多重峰畸变问题,可能造成复杂样品的定量测定困难．由于DEPT++技术能够有效地消除上述畸变,该文尝试将Q-DEPT⁺方法的定量技术扩展到DEPT⁺⁺中,以消除谱峰畸变对于定量的影响．首先,利用积算符对DEPT⁺⁺的极化转移机制进行了系统理论分析,结果发现目前标准仪器和文献中关于DEPT⁺⁺可观测算符的表达式中存在符号错误,实验结果进一步证实了我们的猜测;进而采用Q-DEPT⁺技术中所采用的多极化转移时间和读出脉冲技术,将DEPT⁺⁺用于定量测定．结果表明所建立的Q-DEPT⁺⁺方法能够有效地消除谱畸变问题．     

天然孕甾烷-17(20)-烯中C-17位双键构型的快速测定

天然孕甾烷-17(20)-烯中C-17位双键的构型对分子的药理性质有重要的影响,但是采用化学位移比较等方法判断其构型存在费时以及区分模糊等缺点. 该文以E-和Z-guggulsterone为模型化合物,利用一维选择性NOE实验来进行天然孕甾烷-17(20)-烯中C-17位双键的构型测定. 由于空间相对位置受到构型影响,选择反转20位的质子时,如果选择性NOE谱中仅能检测到21位甲基氢,表明该化合物为E-构型;如果除了21位甲基氢外,18位甲基氢和12位氢也存在于选择性NOE谱中,则表明该化合物为Z-构型. 实验结果表明该方法具有区分度大,简单快速等优点,可以普遍适用于这些孕甾烷类化合物17位双键构型的确定.