环状RNA hsa_circ_0050900在乳腺癌中的表达及其对细胞生物学行为影响的机制研究

背景与目的：环状RNA（circular RNA,circRNA）作为特殊的非编码RNA,一般在体内低表达,且不易被RNA酶降解,结构与表达稳定。随着测序技术的进步,目前发现多种肿瘤的发生、发展与circRNA有关。但未见乳腺癌的发生、发展与hsa_circ_0050900的异常表达相关的报道。探究乳腺癌组织中hsa_circ_0050900的表达以及其影响乳腺癌细胞生物学行为的机制。方法：选取在重庆医科大学附属第一医院经手术切除的4例女性乳腺癌组织及对应的癌旁组织,采用RNA测序（RNA sequencing,RNA-seq）进行测序分析,并运用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）验证乳腺癌中hsa_circ_0050900的表达,其中包括30例乳腺癌组织及其癌旁组织（在重庆医科大学附属第一医院经手术切除）,正常人乳腺上皮细胞系即对照组细胞MCF-10A以及两种乳腺癌细胞系MCF-7、SK-BR-3。通过RTFQ-PCR验证乳腺癌细胞中hsa_circ_0050900被敲低后的表达水平;分别运用细胞计数试剂盒（cell counting kit-8,CCK-8）实验和EdU实验、细胞划痕实验、transwell实验验证细胞的增殖、迁移功能;细胞凋亡的检测采用TUNEL一步法;Hoechst 33342实验通过对细胞核染色确定细胞的状态以检测细胞凋亡;细胞周期蛋白D2（cyclin D2,CCND2）和周期蛋白依赖性激酶4（cyclin-dependent kinase 4,CDK4）的表达采用蛋白质印迹法（Western blot）检测。结果：根据测序结果,挑选出在乳腺癌和细胞中明显高表达的circRNA hsa_circ_0050900;构建的si-circ质粒可显著降低hsa_circ_0050900在乳腺癌细胞中的表达,转染si-circ的细胞增殖能力降低,并促进细胞凋亡,且降低细胞周期相关蛋白CCND2、CDK4的表达。结论：circRNA hsa_circ_0050900在乳腺癌组织中的表达显著高于癌旁组织,敲低hsa_circ_0050900对细胞增殖、迁移能力、细胞凋亡及细胞周期有调控作用。     

规范化管理联合全程健康教育对糖尿病肾病血液透析患者的影响

我院对DN血液透析患者采用规范化管理联合全程健康教育,旨在改善患者生活质量. 1资料与方法1)2018年2月～2019年2月87例糖尿病肾病(DN)血液透析患者,分为对照组43例患者,男女比例22∶21;年龄46～70(57. 94 ±4.68)岁;病程5～ 15(10.55 ±2.41)年.观察组44例,男女比例25...     

肺癌手术后化疗护理

化疗是目前治疗恶性肿瘤的一种重要手段。通过化疗,肿瘤会有效的缩小,从而延长肿瘤患者的生存时间,提高生活质量,但是化学药物对人体有一定的毒副作用,使手术后原本体质虚弱的机体康复受到影响。加之化疗周期长、药费昂贵,使化疗本身又成为一种影响病人生理、心理、社会平衡的应激因素。所以医护人员不仅要做好手术前后,术后化疗各个阶段的护理,重要的是从心理上减轻病人的焦虑、恐惧情绪,增加病人对化疗的依从性。通过2004年1月～2008年8月32例肺癌手术后化疗病人的护理进行总结分析,护理体会报告如下。     

核糖核酸酶抑制因子与整合素连接激酶的相互作用以及对体外血管生成的影响

目的研究核糖核酸酶抑制因子(RI)与整合素连接激酶(ILK)的相互作用以及对体外血管生成的影响。方法用LV5-RNH1 homo、LV5NC、pCMV-3×flag-ILK和pCMV-3×flag分别转染EJ细胞后,筛选稳定转染细胞系,分为EJ-RI、EJ-LV5、EJ-ILK、EJ-FLAG和EJ组;构建ILK与红色荧光蛋白融合表达载体YFP-ILK,与CFP-RI质粒共转染293细胞和EJ细胞,用荧光显微镜观察RI和ILK蛋白在细胞内的共定位;构建真核表达质粒pCMV-3×flagILK,用GST蛋白沉降技术检测RI和ILK蛋白在体外的结合作用;用免疫共沉淀(Co-IP)实验检测蛋白RI和ILK在真核细胞内的结合作用;用小管形成实验探索RI和ILK的相互作用对体外血管形成的影响。结果真核表达载体YFP-ILK和pCMV-3×flag-ILK构建成功;细胞内绿色荧光蛋白融合表达的RI和红色荧光蛋白融合表达的ILK在荧光显微镜下存在共定位现象;RI和ILK蛋白在原核细胞反应体系中存在相互作用;RI和ILK蛋白在真核细胞反应体系内也存在相互作用;RI和ILK的相互作用能抑制血管生成(P0.05)。结论 RI和ILK蛋白在原核细胞防御体系和真核细胞反应体系中均存在相互结合作用,并对体外血管生成有抑制作用。     

环状RNA hsa_circ_0058514在三阴性乳腺癌中的表达及作用研究

背景与目的：环状RNA（circular RNA，circRNA）是一类具有重要调节潜能的非编码RNA，参与多种肿瘤的发生、发展，但对于三阴性乳腺癌（triple-negative breast cancer，TNBC）尚未见报道。该研究旨在探讨环状RNA hsa_circ_0058514在TNBC发生、发展中的作用。方法：采用RNA测序（RNA sequencing，RNA-seq）对4对TNBC组织和癌旁组织进行分析，采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR） 对20对TNBC组织和癌旁组织以及正常人乳腺上皮细胞MCF-10A和TNBC细胞MDA-MB-231和BT-549中hsa_circ_0058514的表达进行验证。将干扰质粒pLL3.7-sh-circ转染TNBC细胞MDA-MB-231和BT-549后，采用RTFQ-PCR检测细胞中hsa_circ_0058514的表达；采用细胞计数试剂盒（cell counting kit-8，CCK-8）和EdU实验检测细胞增殖；采用划痕和Transwell小室实验分别检测细胞迁移和侵袭；采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期；采用蛋白质印迹法（Western blot）检测细胞周期蛋白E1（cyclin E1，CCNE1）和细胞周期蛋白依赖性激酶2（cyclin-dependent kinase 2，CDK2）蛋白的表达。结果：环状RNA hsa_circ_0058514在TNBC组织和细胞中显著高表达（P<0.001，P<0.01）；转染pLL3.7-sh-circ后，TNBC细胞中hsa_circ_0058514的表达量显著低于对照组（P<0.001）。下调hsa_circ_0058514后，TNBC细胞增殖、迁移及侵袭能力下降，并促进细胞凋亡，导致细胞周期阻滞。Western blot结果显示，转染pLL3.7-sh-circ后，CCNE1和CDK2蛋白的表达下调（P<0.05）。结论：环状RNA hsa_circ_0058514在TNBC组织和细胞中均高表达，其在TNBC发生、发展中可能起到癌基因的作用，并有望成为TNBC治疗的新靶点。     

直肠癌术后尿潴留的原因及护理

尿潴留是直肠癌根治术后常见的并发症之一。据报道50%患者在术后第4天有排尿困难,25%患者在术后第7天仍有排尿困难[1]。随着直肠癌手术的增多,术后并发尿潴留也受到进一步的重视,处理不当不但给患者造成很大的痛苦,     

急性心肌梗死患者白细胞升高对预后的影响

近年来有研究发现,白细胞计数可能与急性心机梗死患者病情严重程度有关。笔者通过观察急性心肌梗死180例患者外周血白细胞计数的变化,探讨其在急性心肌梗死时的临床意义。1资料与方法1.1病例选择2006年1月至2007年12月,在我院住院治疗的急性心肌梗死180例,均经临床症状、全导联     

改良式经脐单孔腹腔镜下疝囊高位结扎术治疗小儿腹股沟斜疝的效果效果

目的 探讨改良式经脐单孔腹腔镜下疝囊高位结扎术治疗小儿腹股沟斜疝的效果.方法 选取2018年1月至2020年1月在郑州大学第一附属医院治疗的76例腹股沟斜疝患儿为研究对象,将其分为两组,每组38例.对照组患儿采取传统式经脐单孔腹腔镜手术治疗,观察组患儿采取改良式经脐单孔腹腔镜手术治疗.对比两组患儿的手术指标、并发症率及...     

甲状腺功能亢进症4例漏误诊原因分析

甲状腺功能亢进症简称甲亢，是指甲状腺呈高功能状态的一种自身免疫性疾病，其典型表现为甲状腺肿大，眼症，基础代谢增加和自主神经系统失常。但其表现往往并不局限于甲状腺，而是一种多系统的综合征。如病情较轻或临床表现少而不典型时易被误诊、漏诊，应引起临床医生的高度重视。     

急性心肌梗死患者静脉溶栓前后QT离散度变化分析

大量临床研究证实,急性心肌梗死(AMI)后QT离散度(QTd)增大可诱发严重室性心律失常,后者是造成心脏性猝死的危险因素。本研究对AMI患者静脉溶栓治疗前后QTd变化进行分析,探讨成功的早期溶栓治疗对其影响。1资料与方法1.1病例选择AMI患者152例,均符合WHO诊断标准,并符合以下条件: