Comparative proteomic analysis of renal tubular epithelial cell injury caused by oxalic acid and calcium oxalate monohydrate

<正>Objective To analyze and identify the differentially expressed proteins in human renal tubular epithelial ceils ( HK-2) after injury caused by oxalic acid and calcium oxalate monohydrate ( COM ) crystal,and to explore the potential role of renal tubular cell injury in kidney stone formation. Methods Normal HK-2 cells were     

ImmuKnow法检测骨髓间充质干细胞诱导肾移植受者CD4＋T细胞的三磷酸腺苷水平

背景：骨髓间充质干细胞在体内外均具有免疫调节能力,但其对肾移植受者体内CD4＋T细胞免疫状态的影响目前仍不清楚。目的：探讨ImmuKnow检测技术对肾移植受者CD4＋T细胞免疫状态的监测作用及骨髓间充质干细胞诱导治疗对受者细胞免疫功能的影响。方法：选择2011年1月至2013年6月于解放军南京军区福州总医院行同种异体肾移植并接受自体骨髓间充质干细胞诱导治疗的受者24例,以各项移植前指标匹配、接受巴利昔单抗诱导治疗的肾移植受者48例作为对照。两组受者分别于移植前、移植后第14,30,60,90,180天,以及在发生急性排斥或感染时抽取静脉血,以ImmuKnow法检测CD4＋T细胞三磷酸腺苷水平。结果与结论：移植后6个月内,骨髓间充质干细胞组急性排斥和移植后总感染发生率均低于巴利昔单抗组,但差异无显著性意义。两组受者移植后外周血CD4＋T细胞三磷酸腺苷水平均明显低于移植前（P〈0.05）,但两组之间比较差异无显著性意义。骨髓间充质干细胞组12例、巴利昔单抗组26例发生了移植后感染,这些受者发生感染时CD4＋T细胞三磷酸腺苷水平均明显低于病情稳定时（P〈0.01）。结果表明骨髓间充质干细胞诱导治疗可有效降低肾移植受者的细胞免疫功能,而ImmuKnow法检测外周血CD4＋T细胞三磷酸腺苷含量可有效反映受者的细胞免疫状态。     

静脉移植骨髓间充质干细胞改善心肌病心力衰竭大鼠的心功能

目的：经静脉移植骨髓间充质干细胞至阿霉素诱导的心力衰竭大鼠体内，观察骨髓间充质干细胞对心功能的影响及其在体内的存活情况。 方法：实验于2004—03／2005—11在福建省高血压研究所完成。①分离纯化近交系F344大鼠骨髓间充质干细胞进行体外培养，采用流式细胞仪检测其表面标记CD34，CD44和CD90。②10只正常大鼠作为正常对照组。32只大鼠腹腔注射阿霉素（15mg／kg）建立心肌病心力衰竭模型，然后随机分为细胞移植组16只，以5-溴-2’脱氧尿苷标记第2代骨髓间充质干细胞，经股静脉移植；移植对照组16只，移植等量DMEM培养基。③细胞移植后4周，多导生理记录仪测量3组大鼠的心功能，心脏组织切片行免疫组织化学染色，观察移植细胞在受体大鼠体内的存活情况。 结果：实验中细胞移植组有4只大鼠，移植对照组有7只死亡，进入结果分析31只。①体外培养的第2代骨髓间充质干细胞均一表达CD44和CD90，不表达CD34。②心功能测定显示：细胞移植组大鼠的左室收缩压、左室内压最大上升速率和下降速率均比移植对照组明显升高[（101&;#177;7）比（76&;#177;6）mmHg，（4875&;#177;309）比（3644&;#177;380）mmHg／s，（5075&;#177;336），（3544&;#177;354）mmHg／s，P〈0．05]，而左室舒张末压明显降低[（15&;#177;1），（20&;#177;2）mmHg／s，P〈0．05]；移植对照组左室收缩压、左室内压最大上升速率和下降速率均比正常对照组明显下降（P〈0．05），而左室舒张末压明显升高（P〈0．05）。③免疫组织化学显示：细胞移植组大鼠的心脏组织切片上有5-溴-2’脱氧尿苷标记的移植细胞存活，并且表达心肌特异性抗原β-肌球蛋白重链；细胞移植组室间隔和左心室处血管数量均明显多于移植对照组[（9．0&;#177;1．3）比（6．5&;#177;1．9）血管数／高倍镜，（9．9&;#177;1．5）比（7．8&;#177;1．4）血管数／高倍镜，P〈0．05]。 结论①经静脉移植骨髓间充质干细胞可有效改善阿霉素诱导的心力衰竭大鼠心功能。②骨髓间充质干细胞可归巢至心脏，分化为心肌样细胞。     

自制单孔后腹腔镜肾切除术

目的初步探讨自制套管行单孔后腹腔镜无功能肾切除术的临床可行性和安全性。方法 2010年5～10月,对12例无功能肾患者行腹膜后入路单孔腹腔镜单纯肾切除术。患者取健侧卧位,腋中线髂脊上斜行切口,长约4cm,钝性分开肌层进入腹膜后间隙,气囊法扩张建立手术空间,自制单孔套管。从单孔通道分别置人常规腹腔镜及手术器械,按照标准的腹腔镜肾切除术的手术操作步骤完成手术,切除标本均从切口取出。结果 12例手术均顺利完成,手术时间90～120min,平均105min,术中出血量20～100mL,平均60mL,术后住院3～5d。无中转开放及标准多通道腹腔镜手术,术中、术后无并发症发生。结论单孔后腹腔镜无功能肾切除术有良好的安全性和可行性,自制套管及普通腹腔镜器械可降低治疗成本、减轻患者负担。     

草酸和一水草酸钙结晶对人肾小管上皮细胞的影响

目的 观察草酸和一水草酸钙结晶对体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2)的毒性作用和蛋白表达的影响,探讨上皮细胞受损在肾结石形成过程中的可能作用.方法 体外培养正常人HK-2细胞至长满后,换成无血清培养基,加入草酸至不同终浓度,显微镜下观察结晶的形成及其对细胞的粘附.收集结晶以傅立叶红外光谱仪(FT-IR)分析其成分.CCK-8试剂盒检测1、2、5和10mmol/L草酸分别作用4、12和24 h后对HK-2细胞的毒性反应,Bradford法检测HK-2细胞表达总蛋白量的变化.结果草酸加入含Ca2+的DMEM培养基后,数分钟内显微镜F即可见结晶形成并粘附于细胞表面.FT-IR分析表明结晶成分为一水草酸钙.草酸和一水草酸钙对HK-2的毒性作用呈明显浓度依赖性,但在1～10 mmol/L草酸浓度下毒性作用不随时间延长而增加.1、2、5mmol/L草酸作用12 h和对照组HK-2表达蛋白量分别为(358±51)、(365±43)、(328±52)和(329±60)mg/L,P值均＞0.05,而10 mmol/L草酸作用12 h后,HK-2表达蛋白量为(264±76)mg/L,显著低于对照组(P＜0.05).结论 草酸和一水草酸钙可对正常人HK-2细胞产生毒性损伤,造成细胞表达蛋白的改变,可能在肾结石的形成中起重要作用.     

男性肾移植患者术后性功能恢复情况的临床研究

目的评价肾移植术后男性患者的性功能。方法测定150例男性成功肾移植术后患者术前、术后1、3、6个月血清睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成激素(LH)、和催乳素(PRL)水平及术后6个月内性功能恢复情况。结果 150例患者术后89例2～4个月内恢复性生活,术后6个月血清T值恢复正常,患病前均有性生活能力,患病后有性生活能力者82例,占54.7%,术后为114例,占76.0%。结论成功的肾移植能通过改善垂体-性腺激素紊乱提高患者性功能,受者术后的心理干预、药物干预等均有助于提高肾移植患者性功能,提高性生活满意度。     

经皮肾镜取石术后不留置肾盂造瘘管的疗效评价

目的 评价经皮肾镜取石术(PCNL)后不放置肾盂造瘘管的疗效.方法 输尿管上段或肾结石行PCNL患者240例.男147例,女93例.年龄19～64岁,平均(48.5～9.4)岁.结石直径1.2～5.6 cm,平均(2.8±1.2)cm.患者入选标准:术前无尿路感染病史、单通道、碎石术中无明显出血、无需行二次经皮肾操作者.随机分2组:A组(n=120)术后不放置肾盂造瘘管,B组(n=120)术后放置14 F肾盂造瘘管.比较2组患者术后疼痛程度、需应用镇痛药例数、术后住院时间及漏尿发生率.结果240例患者均一期手术成功.A组术后6 h、第1天、第2天的疼痛评分分别为4.2±1.5、2.1±1.6和1.2±1.0,均显著低于B组的5.5±2.4、3.9士1.5和2.5±1.5,P值均<0.01;A组需使用镇痛药者18例,B组为32例(15.0%与26.7%,P<0.05),A组术后发生尿漏3例,B组28例(2.5%与23.3%,P<0.01),术后住院时间A组(1.7±0.6)d,B组(3.1±1.1)d,P<0.01.结论对于无尿路感染、一期手术、单通道、术中无明显出血的患者,PCNL术后不放置肾盂造瘘管可减轻患者痛苦和经济负担、缩短患者恢复时间,是安全可行的治疗方法.     

心理治疗对骨盆骨折合并后尿道损伤术后性功能和生活质量的影响

目的:探讨心理治疗对骨盆骨折合并后尿道损伤术后性功能和生活质量的影响。方法:选择2010年1月至2014年6月我院收治的骨盆骨折合并尿道损伤患者共44例,随机分为对照组及观察组(各22例)。对照组手术前后接受常规治疗;观察组在常规治疗基础上,于术前及术后对患者及其家属进行综合心理行为干预治疗。记录并比较两组患者伤前、术后第3个月和第12个月性生活情况、IIEF-5评分和SF-36生活质量调查表评分。结果:两组患者伤前每个月性生活频率、勃起功能障碍发生率和IIEF-5评分比较均无明显差异(P0.05)。与伤前相比,两组患者伤后的勃起功能障碍发生率均明显升高(P0.05),性生活频率和IIEF-5评分均明显减少(P0.05)。术后12个月,与对照组相比,观察组的性生活频率和IIEF-5评分明显升高,SF-36生活质量调查表各维度评分中,生理职能、总体健康、情感职能和精神健康评分均显著高于对照组。结论:针对性的综合心理行为干预治疗有助于骨盆骨折合并尿道损伤患者恢复勃起功能,有效解除心理障碍,改善生活质量。     

输尿管软镜碎石与微创经皮肾取石术治疗肾盏结石的对比研究

目的 探讨输尿管软镜及微创经皮肾镜(mini-percutaneous nephrolithotomy,MPCNL)钬激光碎石治疗肾盏结石的疗效.方法 分别采用输尿管软镜碎石术和微创经皮肾取石术治疗单发肾盏结石患者55例和83例,统计2种方法治疗各个肾盏结石的手术时间、碎石成功率、术后住院天数和并发症.结果 上盏直径≥2 cm的结石,输尿管软镜碎石和MPCNL的手术时间分别为(56±7.0) min 和(52±9.2) min,碎石成功率分别为66.7%和87.5%;直径<2 cm的结石,手术时间分别为(42±9.0) min 和(44±9.9) min,碎石成功率分别为91.7%和100%.中盏直径≥2 cm的结石,2组的手术时间分别为(59±7.9) min 和(48±10.3) min,碎石成功率分别为66.7%和95.2%;直径<2 cm的结石,手术时间分别为(38±8.4) min 和(43±10.5) min,碎石成功率分别都为100%.下盏直径≥2 cm的结石,2组的手术时间分别为(68±9.3) min 和(44±10.2) min,碎石成功率分别为51.7%和92.6%;直径<2 cm的结石,手术时间分别为(56±5.3) min 和(40±10.1) min,碎石成功率分别为66.7%和100%;2组均无重要并发症.PCNL组的术后住院天数显著高于输尿管软镜组.结论 对于有手术指征的肾盏结石,若直径≥2 cm,不论其位置,推荐行MPCNL;若直径 <2 cm ,如结石位于上盏、中盏,推荐首选输尿管软镜下钬激光碎石,如位于下盏,可以考虑选择MPCNL.