淋巴结细针穿刺标本的流式细胞术分析

目的 评价淋巴结细针穿刺标本流式细胞术分析方法在诊断淋巴结病变,以及在恶性淋巴瘤和淋巴结反应性增生鉴别诊断中的应用价值.方法 对99份疑为淋巴结病变的淋巴结针吸标本涂片进行常规细胞学分析,并结合病理活组织检查确诊分型.使用三色标记的流式细胞术方法分析针吸标本中各细胞免疫表型(CD3、CD3、CD4、CD5、CD10、CD19、CD20、CD23、CD45、K、λ、FMC7、 CD34),确定标本中各细胞组成及有无异常表型细胞.对于淋巴瘤病例,则按照WHO分型标准,根据免疫表型进一步确定其亚型,并对各类病例流式细胞术分型结果和细胞学结果进行比较.结果 99份标本中,细胞涂片检出淋巴瘤40例,转移癌29例,反应性增生、坏死、结核30例,有2例非霍奇金淋巴瘤(NHL)被误诊为反应性增生;对其中18例NHL进行了病理活组织检查,其中包括B淋巴细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)16例,T淋巴细胞非霍奇金淋巴瘤2例.流式细胞术分析结果显示,99份标本中检出淋巴瘤35例(淋巴母细胞淋巴瘤4例,T淋巴细胞病变1例,其余30例为B-NHL);有28份B-NHL检测到K或λ轻链限制性表达,其K:λ或λ:K大于3:1,B淋巴细胞所占比例为(73.2±27.2)%,其中26份能根据免疫标志物的表达确定其亚型.经病理活组织检查确定为B-NHL的16份标本中,仅2例滤泡淋巴瘤与流式细胞术分型结果不一致.对于反应性增生及转移癌等标本,流式细胞术分析未查见异常淋巴细胞,其k:λ或λ:k均小于3:1.结论 淋巴结细针穿刺标本的流式细胞术分析有助于淋巴结病变的诊断和鉴别诊断,并可确定NHL的亚型.     

低相对分子质量肝素对内毒素诱导的内皮细胞表达vWF:Ag、PAI-1和PS的影响

目的观察低相对分子质量肝素（LMWH）对内毒素（LPS）作用下人脐静脉内皮细胞（HUVEC）表达血管性血友病因子相关抗原（vWF：Ag）、纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）及蛋白S（PS）的影响。方法常规从脐带分离及培养HUVEC，取第1～3代HUVEC于24孔板进行分组实验。应用酶联免疫吸附法（ELISA）或免疫比浊法测定HUVEC上清液中的vWF：Ag、PAI-1及PS。结果（1）在LPS刺激下，HUVEC培养上清液中vWF：Ag量较对照组增加（由2．0％增至3．5％），差异有显著性（P〈0．05）。不同浓度LMWH（20u／ml、50u／ml、100u／ml）均可抑制LPS对HUVEC表达vWF：Ag的影响，与内毒素组比较，差异有显著性（P〈0．05）；（2）在LPS刺激下，HUVEC表达PAI-1的量增加，与对照组比较，差异有显著性（P〈0．05）。加入不同浓度的LMWH，可下调LPS对HUVEC表达PAI-1的影响。各剂量组与LPS组比较，差异均有显著性（P〈0．05）；（3）以1μg／ml LPS刺激HUVEC，PS表达量下降，与对照组比较，差异有显著性（P〈0．05）。同时加入LMWH可上调LPS对HUVEC表达PS的影响，各剂量组与LPS组比较，差异有显著性（P〈0．05）。结论LPS可上调HUVEC表达vWF：Ag及PAI-1，下调HUVEC表达PS。LMWH能拮抗上述作用。提示：LMWH对LPS诱导的内皮细胞的活化与损伤有保护作用，在重症炎症状态下使用LMWH可能有利于器官功能的恢复和预防DIC。     

一步法RT-PCR检测慢性粒细胞白血病BCR-ABL融合基因

目的：建立一步法RT-PCR检测CML患者BCR—ABL融合基因的实验方法。方法：Trizol试剂提取细胞RNA,用特异引物一步法RT—PCR检测BCR—ABL融合基因．并作灵敏度试验。结果：本方法的灵敏度可达到10pg水平。对25例CML患者检测BCR-ABL融合基因,阳性率为100％．并可检测出BCR—ABL融合基因各种融合方式。结论：一步法RT—PCR检测BCR-ABL融合基因有很好的灵敏度和特异性,操作简便、快速,特别适用于临床检测。     

氟达拉宾治疗难治性慢性淋巴细胞白血病临床疗效观察

我们采用前瞻性的自身前 后对照研究设计方案 ,对单独使用氟达拉宾治疗的 16例晚期难治性慢性淋巴细胞白血病 (CLL)患者的临床疗效进行观察。病例和方法1　病例　 16例晚期CLL(采用Binet分期的C期 )患者 ,男9例 ,女 7例 ,均为 1998年至 2 0 0 2年 6月在四川大学华西医院血液科确诊病例 ,按张之南主编的《血液病诊断及疗效标准》(第 2版 )诊断。中位年龄 6 3(5 6～ 73)岁。2　方法2 .1　设计方案 :前瞻性自身前 后对照研究。2 .2　干预措施 :上述 16例晚期CLL患者均首先用CP方案(瘤可宁 0 .2mg·kg-1·d-1,泼尼松 0 .5mg·kg-1·d-1,均…     

血管免疫母细胞性淋巴结病：附5例报道

血管免疫母细胞性淋巴结病(AILD)是一种发病较少、疾病定义及性质尚有争议的一类全身性淋巴结病。临床上以发热、全身淋巴结及肝脾长大、皮肤损害以及多克隆γ-球蛋白血症为主要特征。目前采用相类似的命名还有免疫母细胞性淋巴结病(IBL)、淋巴肉芽肿病X(LgX)。我院1978～1989年间收治5例AILD,现结合文献对木     

羟基脲联合化疗治疗高白细胞性急性白血病32例

目的研究羟基脲联合化疗治疗高白细胞性急性白血病(HAL)的作用.方法回顾性研究1996年1月至2000年12月我院血液科采用羟基脲联合化疗治疗的32例高白细胞性急性白血病患者.结果32例HAL患者口服羟基脲3～5天后外周血白细胞中位数由224(100～560)×109/L降至15(3.0～42.5)×109/L,患者高粘滞综合征明显改善或消失.随后联合化疗获得完全缓解20例,部分缓解5例,未缓解7例,总有效率78.13%.结论羟基脲联合化疗治疗高白细胞性急性白血病,简便,快速,价廉,有效.若需进一步提高疗效,防止复发,可采用干细胞移植等措施.     

非血缘供者异基因骨髓移植治疗慢性粒细胞白血病

探讨非血缘供者异基因骨髓移植对慢性粒细胞白血病的治疗,并对移植相关并发症作了详细观察和处理.预处理方案为标准BuCy,马利兰(Bu)4mg/(kg.d)×4;环磷酰胺(Cy)60mg/(kg.d)×2.2例供者均来自台湾慈济骨髓捐赠中心,HLA基因配型(SSOP法)与患者完全配合.采髓量分别为1230ml和1010ml,其中植入的单个核细胞为2.13×108/kg和2.38×108/kg;CD34+细胞为2.3×106/kg 和2.8×106/kg;CFU-GM 4.6×105个/kg 和5.3×105个/kg,BFU-E 1.2×105个/kg 和1.7×105个/kg,CFU-GEMM 3.6×105个/kg 和4.5×105个/kg.移植物抗宿主病的预防采用环胞素A+氨甲蝶呤+人体丙种球蛋白.结果:在移植后+24和+16天患者中性粒细胞恢复达≥0.5×109/L,在+64和+45天血小板≥2.0×109/L,+30天骨髓染色体核型分析,2例均达90%以上供者嵌合,+100天达完全嵌合,Ph1染色体(-),血型转变为供者血型,DNA可变数目重复序列检测(VNTR)证实供者源造血重建.结论:HLA相合非血缘异基因骨髓移植治疗慢性粒细胞白血病获得成功,重建了患者造血功能;移植相关并发症的及时发现和正确处理是保证移植成功的重要因素.     

非洲爪蟾VEGF肿瘤疫苗治疗小鼠纤维肉瘤的研究

目的：探讨非洲爪蟾VEGF肿瘤疫苗免疫抗小鼠纤维肉瘤的作用.方法：采用BALB/c小鼠建立Meth A小鼠纤维肉瘤模型.实验肿瘤小鼠随机分成3个治疗组：非洲爪蟾VEGF（xVEGF）组、小鼠VEGF（mVEGF）组、生理盐水对照（NS）组.观察小鼠肿瘤生长、生存率和治疗的毒副反应,并检测抗自身mVEGF抗体、肿瘤微血管密度（microvessel density, MVD）.结果：xVEGF组肿瘤明显小于mVEGF组或NS对照组（P＜0.05）,xVEGF组小鼠生存率也明显高于mVEGF组或NS对照组（P＜0.01）.Western Blot检测发现异种蛋白质疫苗免疫的小鼠体内产生了抗自身mVEGF抗体,xVEGF组肿瘤MVD明显低于mVEGF组或NS对照组（P＜0.01）.结论：非洲爪蟾VEGF疫苗治疗可诱导纤维肉瘤小鼠产生抗自身VEGF免疫反应及抗肿瘤作用.     

CCL20重组慢病毒对小鼠肿瘤生长的影响

目的 通过CCL20重组慢病毒整合的间充质干细胞,观察肿瘤原位高表达CCL20能否激发机体的抗肿瘤免疫。方法 构建小鼠CCL20重组慢病毒lenti—mCCL20,体外转导BALB／c小鼠间充质干细胞（mMSCs）,杀稻瘟索（blasticidin）筛选出稳定表达mCCL20的混合克隆,命名为lenti—mCCL20-mMSCs,与CT26混合后皮下接种至同系BALB／c小鼠,设lenti-null—mMSCs与CT26混合接种、mMSCs与CT26混合接种、CT26单独接种为对照,观察肿瘤生长情况。结果 构建了重组慢病毒lenti—mCCL20,体外转导BALB／c小鼠MSCs,获得lenti—mCCL20-mMSCs,动物实验发现CCL20瘤内表达增加肿瘤内淋巴细胞的浸润,但促进肿瘤生长。结论 CCL20瘤内表达增加肿瘤内淋巴细胞的浸润,促进肿瘤生长,机制有待进一步研究。     

免疫抑制治疗对再生障碍性贫血患者外周血淋巴细胞胞浆内TNF-ɑ/IFN-γ表达的影响

本研究探讨免疫抑制治疗对再生障碍性贫血(AA)患者外周血淋巴细胞胞浆内肿瘤坏死因子-浕(TNF-浕)/干扰素-γ(IFN-γ)表达的影响。利用流式细胞术检测25例再生障碍性贫血初发病人和20例经免疫抑制治疗后的再生障碍性贫血患者外周血中CD3+淋巴细胞胞浆内TNF-浕/IFN-γ的表达情况。结果显示:再生障碍性贫血初发组CD3+淋巴细胞胞浆内TNF-浕、IFN-γ的表达率分别为(5.97±6.78)%和(15.20±11.28)%,正常对照组为(1.56±0.87)%,(1.76±0.87)%,两者之间的差异有统计学意义(p<0.05);免疫抑制治疗组CD3+淋巴细胞胞浆内TNF-浕、IFN-γ的表达率分别(1.67±1.26)%,(4.35±4.33)%,与初发组之间的差异有统计学意义(p<0.05)。结论 :再生障碍性贫血患者淋巴细胞胞浆内TNF-浕/IFN-γ的表达高于正常对照组,免疫抑制治疗可以显著下调胞浆内TNF-浕/IFN-γ的表达。