长链非编码RNA GAS5在绝经后骨质疏松症肾阴虚证的表达及对骨免疫细胞因子的调控作用

目的 研究长链非编码RNA GAS5 (long non-coding RNA GAS5,lncRNA GAS5)在绝经后骨质疏松症（postmenopausal osteoporosis,PMOP）肾阴虚证的表达及其对骨免疫相关细胞因子的调控作用。方法 随机选择绝经后妇女,经骨密度检测和中医辨证分型,分为肾阴虚证组（38例）、肾阳虚证组（32例）和健康对照组（35名）。通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测外周血单核细胞中lncRNA GAS5的表达。通过慢病毒介导的RNA干扰技术,抑制THP-1人单核细胞中lncRNA GAS5基因的表达,并应用细胞因子抗体芯片技术检测骨免疫相关细胞因子的表达变化。结果 与对照组比较,lncRNA GAS5在PMOP肾阴虚证组和肾阳虚证组的表达水平均明显降低（P<0.01）;与肾阳虚证组比较,肾阴虚证组lncRNA GAS5的降低趋势更明显（P<0.05）;RNA干扰抑制lncRNA GAS5表达后,与对照组比较,干扰组lncRNA GAS5的表达下调67.58%,而白细胞介素(IL-6、IL-7、IL-17)、转化生长因子β(TGF-β1)、集落刺激因子（G-CSF 、M-CSF）等23种骨代谢相关细胞因子的表达水平显著上调,重组人巨噬细胞炎症蛋白-1β（MIP-1b）、白细胞介素1 b （IL-1 b）、胞间黏附分子-1（ICAM-1）等3种因子的表达下调。结论 lncRNA GAS5在PMOP肾阴虚证中低表达;体外抑制lncRNA GAS5的表达可影响骨免疫相关细胞因子水平。     

基于临床流行病学调查的原发性骨质疏松症中医基本证候研究

目的：探讨原发性骨质疏松症的证候因素和证候特征。方法：根据临床流行病学调查和调查问卷的方法，采用描述性统计、聚类分析和决策树等数据挖掘技术，对横断面调查数据进行分析。结果：（1）原发性骨质疏松症除骨痛、驼背、身高变矮、骨折外，中医主要症状为腰膝酸软、视物模糊、发脱、腿沉、倦怠乏力和畏寒肢冷；次要症状为怕热、眼睛干涩、烦躁易怒、头晕、齿摇、耳鸣、气短、便秘和盗汗。（2）原发性骨质疏松症的主要证候为肾阳虚证、肾精不足证、肾气虚证、肾阴阳两虚证、脾肾阳虚证、肾阴虚证和肝肾阴虚证，主要证候因素为阴虚、阳虚、气虚、气滞、湿浊和血瘀；（3）阴虚决策树诊断模型以五心烦热、盗汗和便秘三个变量为主，阳虚决策树诊断模型以畏寒肢冷、大便稀溏、腰膝酸软、头晕和气短五个变量为主。结论：（1）原发性骨质疏松症中医6个主要症状和9个次要症状，主要证候因素为阴虚、阳虚、气虚、气滞、湿浊和血瘀，常见证候为肾阳虚证、肾精不足证、肾气虚证、肾阴阳两虚证、脾肾阳虚证、肾阴虚证和肝肾阴虚证。（2）原发性骨质疏松症是以肾、肝、脾三脏虚损为本，气滞、湿浊、血瘀为标的本虚标实之证。     

通络生骨胶囊治疗股骨头坏死的Ⅲ期临床试验

目的:评价通络生骨胶囊治疗股骨头坏死的疗效及安全性。方法:采用随机双盲、双模拟、阳性药对照的多中心研究方法,共治疗股骨头坏死患者428例,其中治疗组320例,对照组108例。结果:通络生骨胶囊对股骨头坏死的临床症状体征总有效率为79．06％;对照组健骨生丸则为71．30％,两组比较无显著差异。X线片改变,通络生骨胶囊组71．23％有死骨吸收,其中43．84％为明显吸收,而对照组55．45％有死骨吸收,其中32．67％为明显吸收;通络生骨胶囊组67.12％有新骨形成,其中31．85％为明显成骨,而对照组51．49％有新骨形成,其中25．74％为明显成骨。两组差异有显著性意义(P<0．05)。两组药物的不良事件发生率均很低。结论:通络生骨胶囊治疗股骨头坏死是有效和安全的。     

屈曲位整脊手法治疗腰椎管狭窄症的机理研究

我们通过３７例腰椎管狭窄症伸屈脊髓造影和１３例腰椎管狭窄症动态ＣＴ扫描，测量分析不同体位下Ｌ３～Ｌ５Ｓ１硬膜囊矢径和Ｌ４，５间隙黄韧带厚度的变化情况，结果显示：Ｌ３、Ｌ３、４、Ｌ４、Ｌ４，５，Ｌ５硬膜囊矢状径屈曲位明显大于后伸位，差异非常显著或显著（Ｐ＜０．００１，Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５），Ｌ４，５，间隙黄韧带厚度前屈位明显小于后伸位，差异非常显著（Ｐ＜０．００１）。我们认为屈曲位整脊手法治疗腰椎管狭窄症可以减轻黄韧带对硬膜囊和神经根的压迫，增大硬膜囊矢状径，扩大椎管的有效空间，减少腰椎管的狭窄程度，缓解临床症状达到治疗目的     

续苓健骨方对骨质疏松模型大鼠miRNA表达谱的作用研究

目的通过分析骨质疏松症大鼠模型miRNA表达谱变化,探讨续苓健骨方治疗骨质疏松症的分子机制。方法建立去卵巢法骨质疏松模型大鼠12只,分为模型组6只、续苓健骨方组6只。假手术组6只为对照。造模1个月后,续苓健骨方灌胃12周,检测大鼠胫骨骨密度,检测腰椎miRNA表达谱,对差异表达的miRNAs进行生物信息学分析。结果与假手术组比较,模型组腰椎miRNAs 58条显著下调、97条显著上调;与模型组比较,续苓健骨方组腰椎miRNAs下调的50条显著上调、上调的60条显著下调;与假手术组比较,续苓健骨方组腰椎miRNAs仅8条有差异。生物信息学分析发现,差异miRNAs靶基因主要参与HIF-1、甲状腺激素、Hedgehog、GnRH、自噬、c AMP及MAPK等信号通路。结论建立了续苓健骨方治疗骨质疏松模型大鼠的miRNA表达谱;差异miRNAs可能通过调控HIF-1、甲状腺激素、Hedgehog、GnRH、自噬、c AMP及MAPK等信号通路参与续苓健骨方对骨质疏松大鼠的治疗过程。     

雌激素受体和骨钙素基因多态性位点联合PXh单倍型对绝经后妇女骨密度的影响

目的 探讨雌激素受体(ER)基因(Xba Ⅰ、Pvu Ⅱ)、骨钙素基因(Hind Ⅲ)多态性位点联合型与绝经后妇女骨密度的相关性.方法 采用双能X线(DXA)骨密度仪检测307例绝经后妇女腰椎和左侧股骨上端骨密度,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测ER基因Xba Ⅰ、PvuⅡ和Hind Ⅲ多态性.结果 (1)XX型大转子骨密度C(O.600±0.104)g/cm2]低于xx型[(0.653±0.119)g/cm2],P<0.05;Xx型、有X等位基因组的股骨颈[分别为(0.695±0.087)g/cm2和(0.697±0.088)g/cm2]、大转子[(0.592±0.106)g/cm2和(0.594±0.105)g/cm2]、Ward's三角[分别为(0.500±0.115)g/cm2和(0.505±0.123)g/cm2]骨密度低于xx型[分别为(0.737±0.108)g/cm2、(0.653±0.119)g/cm2、(0.554±0.130)g/cm2]、无X等位基因组[分别为(0.737±0.108)g/cm2、(0.653士0.119)g/cm2、(0.554±0.130)g/cm2],均P<0.05.(2)PP型、有P等位基因组Ward's三角骨密度分别低于pp型、无P等位基因组(P<0.05).(3)hh型、有h等位基因组的股骨颈、大转子、Ward's三角骨密度低于HH型,无h等位基因组骨密度低于HH型(均P<0.05).(4)含有PX、PXh单倍型组股骨颈、大转子、Ward's三角骨密度分别低于元PX、无PXh单倍型组(均P<0.05).结论 ER基因Xba Ⅰ、骨钙素基因Hind Ⅲ多态性与绝经后妇女骨密度相关,X、h等位基因对骨密度有不利影响,PXh单倍型可作为福州地区绝经后妇女骨质疏松的遗传标记物.     

基因芯片在肾虚证研究中的应用

随着现代科学技术的发展,中医"证"的科学性面临严峻的考验,"证"本质研究一直难以有突破性进展.目前基因芯片技术日趋成熟,将成为"证"本质研究的一个重要手段.本文主要从基因芯片技术的概况及其在中医肾虚证的应用等方面现状做一综述.     

绝经后骨质疏松症肾阳虚证的关联基因LTBP1 mRNA 的表达研究

目的研究绝经后骨质疏松症肾阳虚证的关联基因LTBP1及PCSK6的mRNA表达水平,探讨绝经后骨质疏松症肾阳虚证与LTBP1及PCSK6基因表达的关联性。方法随机选择绝经后骨质疏松症患者,中医辨证肾阳虚证组25例,32例健康绝经后妇女为对照组,RT-PCR法检测外周血LTBP1及PCSK6 mRNA的表达。结果肾阳虚证组LTBP1 mRNA表达水平低于健康对照组(F=7.473,P=0.008),差异有统计学意义;肾阳虚证组PCSK6 mRNA表达水平较健康对照组比较,有降低趋势,但差异无统计学意义;通过GO分析参与到的生物途径有细胞外组织形成、代谢过程、磷酸化作用、蛋白磷酸化、TGF-β的细胞外基质合成、BMP信号通路、细胞分泌等;通过Pathway分析参与到弹性纤维形成、细胞外基质组织、整合胰腺癌的通路、TGF-β信号通路、发育生物学、神经生长因子信号转导等通路相关。结论骨质疏松症肾阳虚证与LTBP1基因表达下调相关联。     

补肾方药影响骨质疏松症相关信号转导通路的研究进展

骨质疏松症是一种多因素导致的全身代谢性骨骼疾病。中医学认为,肾虚是本病的主要病因。补肾方药通过影响骨质疏松症相关信号的转导,维持骨重建平衡,改善骨的内部结构,从而达到防治骨质疏松的目的。笔者就近年来补肾方药影响骨质疏松症相关信号转导通路的相关文献作一综述,以期为骨质疏松的进一步深入研究提供依据。     

六味地黄丸对绝经后骨质疏松症肾阴虚证JAK/STAT信号通路基因的影响

目的通过观察六味地黄丸对绝经后骨质疏松症肾阴虚证JAK/STAT信号通路基因的影响,探讨六味地黄丸治疗绝经后骨质疏松症肾阴虚证的分子机制。方法随机选择绝经后骨质疏松症肾阴虚证组6例,健康绝经后妇女对照组3例。六味地黄丸治疗肾阴虚证组3个月后,用JAK/STAT信号通路芯片检测其基因表达的变化。结果治疗前肾阴虚证组与正常对照组相比,差异表达基因:PRLR、JUN、JUNB、INSR,表达均下调;肾阴虚证组治疗后与治疗前相比,差异表达基因有25条,上调11条,下调14条,其中JUN、JUNB疗后明显上调。差异表达基因生物学功能分析,免疫相关基因:PRL、PRLR、OSM、ISG15、IL4R;细胞生长增殖与细胞周期相关基因:F2、SOCS3;与STAT蛋白相互作用的转录因子和共同活化基因:JUN、JUNB、SMAD3、SMAD5、SMAD4、SP1、YY1;JAK/STAT信号通路的负反馈调节基因:PIAS1、SOCS4;衔接蛋白基因:SRC、STAM。结论六味地黄丸治疗绝经后骨质疏松症肾阴虚证的机制可能与其调控JAK/STAT信号通路的相关基因有关,这些基因的功能与免疫调节、细胞生长增殖及成骨生长关联。