亚甲蓝对精子运动及质膜完整性的影响

体外研究发现亚甲蓝( methylene blue,MB)会抑制人精子的活力[1].为进一步研究MB对精子的毒性作用,我们通过低剂量MB与人精子共孵育2h的体外实验以及高剂量MB连续灌服大鼠14 d的在体实验,观察MB对精子生成、精子活力以及精子质膜完整性的影响.     

吸烟对精子染色质结构完整性影响的探讨

目的:探讨吸烟对精子染色质结构完整性的影响。方法:784例男性不育患者从病例库中选取,根据吸烟与否及每日吸烟支数(≤10、11~19、≥20)和吸烟年限(≤5、6~9、≥10)进行分组,比较各组患者精液常规检测参数及精子染色质结构受损和精子核成熟情况。精子染色质结构完整性采用流式细胞仪检测,DNA损伤程度和不成熟精子指数分别以DNA损伤指数(DFI)和高DNA着色性(HDS)来表示。结果:吸烟≥20支/日和吸烟年限≥10年的患者组精液量、前向运动精子比例低于其他组而精子畸形率高于其他组(P<0.05);吸烟组男性的DFI和HDS值均升高(P<0.05);HDS与前向运动精子比例呈负相关(r=-0.18,P<0.05),DFI与HDS均与精子畸形率呈正相关(r=0.31与r=0.39,P均<0.05)。结论:日吸烟量≥20支或吸烟年限≥10年对男性的精液量、前向运动精子比例和精子畸形率都有影响,吸烟影响男性精子DNA完整性和精子核成熟。     

ssp411基因敲除小鼠生育表型的初步研究

目的对ssp411基因的生育功能进行初步研究。方法利用PB转座子插入建立小鼠模型ssp411基因敲除小鼠各基因型之间交配后,检查雌鼠生殖道是否见栓。记录出生小鼠的窝仔数,性别,出生20 d仔鼠体质量、基因型等数据;记录出生后90 d雄仔鼠的睾丸重量,进行组织形态学研究,并对附睾尾精子进行活力分析。结果 ssp411缺陷型雌鼠可以正常生育,而雄鼠无自然生育能力。ssp411基因敲除雄鼠能够与母鼠自然交配形成阴道栓,但是没有子代出生,且在交配后母鼠输卵管壶腹部未见精子。睾丸的组织形态学研究和睾丸称量结果表明,ssp411蛋白缺失可以影响精子的生成。ssp411基因敲除雄鼠的附睾精子活力也明显差于对照组。结论 ssp411基因缺陷不影响雌性生殖,但影响雄鼠的精子生成功能,造成少弱精子症,并引起雄性不育。     

内皮素对培养幼大鼠子宫内膜的血管效应

木文为证实在体外培养条件下内皮素对幼鼠子宫内膜血管收缩效应以及Ｃａｐｔｏｐｒｉｌ抑制内皮素的作用，并且与临床相关药剂加以比较。实验分六组，分别加：内皮素－１、前列腺素Ｆ２α、Ｃａｐｔｏｐｒｉｌ、消炎痛以及内皮素加Ｃａｐｔｏｐｒｉｌ至培液中。对照组只加佐剂。培养的组织块经制片和超薄切片、染色，在光镜与电镜下观察。同时进行图象分析测定内膜血管的直径和管腔面积以显示血管的收缩状态。结果显示培养４ｈ内皮素收缩血管效应明显，前列腺素与其相似。Ｃａｐｔｏｐｒｉｌ有抑制内皮素缩血管效应。培养８ｈ缩血管效应减弱，培养２４ｈ其效应基本消失。     

小鼠胚胎正常着床与实验性延缓着床的比较

本实验企图了解小鼠正常着床与实验性延缓着床的规律。将对照组与延缓着床组的怀孕小鼠,分别在1—7天或1—10天处死,取子宫和输卵管,常规固定,石腊包埋,连续切片,HE染色,光镜观察。结果表明,孕1—3天,两组形态特征相似,孕3天之后,延缓组滞育胚胎运行减慢,发育迟缓。雌二醇注射24、48、72小时,与对照组第5、6和7天相同。延缓组着床前胚胎变性较多。除滞育期激素条件外,延缓着床与正常着床过程基本相同。     

精原干细胞体内转染途径建立rsP3111转基因小鼠的可行性研究

目的构建目的基因rsp3111与荧光蛋白融合表达的质粒，并且实现目的基因在体外受精胚胎及在体附睾成熟精子中表达。为进一步通过精原干细胞体内转染途径建rsp3111转基因小鼠奠定基础。方法将rsp3111基因以Xholl和BdmHI酶切后插入经同样酶切处理的真核细胞表达质粒pDsRed-Monomer—N1中，重组质粒为pDsRed-Monomer—N1-rSP3111。采用共培养和脂质体介导方法将ICR小鼠精子与pDsRed-Monomer—N1-rSP3111质粒共孵育，再与成熟的卵母细胞体外受精；或用脂质体介导睾丸直接注射法，将pDsRed-Monomer—N1-rSP3111导入小鼠睾丸中，通过PCR及荧光显微镜观察体外受精后的受精卵及体内睾丸转染rsp3111基因后附睾精子中是否有外源rsp3111基因的表达。结果PCR结果表明，rsp3111基因成功地转入了附睾精子及受精卵中。荧光检测结果表明，目的基因rsp3111在体外受精胚胎及睾丸的曲细精管中均有表达。结论通过雄性生殖细胞载体法实现了大鼠配子特异性蛋白rSP3111在小鼠受精卵及睾丸、附睾精子中的表选为进一步通过精原干细胞体内转染途径建立rsp3111转基因小鼠奠定了基础。     

甲孕环酯对家兔着床前子宫内膜细胞超微结构的影响

本文采用家兔交配前3天,小剂量单次给甲孕环酯,光镜和电镜观察着床前家兔子宫内膜及腺体细胞形态。结果显示实验组在孕1天出现分泌样改变,孕3天分泌活跃,孕6天分泌减低;对照组在孕3天出现分泌样结构,孕6天达高峰。因此,本实验进一步表明,在交配前3天单次给药,甲孕环酯仍能使子宫内膜提早转化,但分泌活动不能持续很久。     

成人肝移植术后血流动力学超声正常参考值范围及影响因素分析

目的通过大数据查询统计分析获得肝移植术后血流动力学超声参数的正常参考值范围, 并分析其影响因素。方法应用天津市第一中心医院自主开发的临床肝移植超声影像大数据库软件V1.0查询2012年12月至2021年6月成人肝移植术后患者在术后第1 d(1D)、第7 d(7D)、第1个月(1M)、第6个月(6M)、第1年(1Y)、第5年(5Y)、第10年(10Y)的超声血流动力学参数, 包括门静脉内径(PVD)、门静脉流速(PVV)、肝动脉峰值流速(S)、肝动脉舒张末期流速(D)、肝动脉S/D、肝动脉阻力指数(RI)、肝右静脉内径(RHVD)、肝右静脉流速(RHVV)、肝中静脉内径(MHVD)、肝中静脉流速(MHVV)等, 并进行统计学分析获得各参数的95%参考值范围。结果本研究共纳入成人肝移植术后患者1 740例, 共12 242次监测结果, 肝移植术后最长随访时间22年。超声血流动力学参数PVD无明显变化, PVV从术后1D到长期随访呈持续略减低趋势;肝动脉流速S、D在肝移植术后7D最高, 之后随着术后时间的延长呈减低趋势;肝动脉S/D在术后7D最低, 随着肝移植术后监测时间的延长呈增高趋势;肝...