显微注射法和精原干细胞介导法制备乙肝病毒X基因转基因小鼠的方法学比较

目的 探讨经济简便有效的制备转基因小鼠的方法。方法 分别将线形和环状乙肝病毒X基因表达载体pcDNA3-X按常规显微注射入小鼠受精卵。导入假孕雌鼠，同时应用微量注射针将脂质体包裹的pcDNA3-X表达麓体直接注入C57BL／6N小鼠雄性小鼠睾丸的曲细精管内，运用PCR法和免疫组化法对所有转基因仔鼠进行鉴定．比较这两种方法的优缺点．结果 显微注射法繁琐，技术要求高，阳性率相对较高，达16．6％。精原干细胞介导法技术简便．阳性率为6．25％。结论 初步证明用精原干细胞介导法是一种经济简便有效的制备X基因转基因小鼠的方法。     

雪旺细胞分离技术的研究

作者用酶消化的方法分离雪旺细胞（Schwanncell，SCs），比较了匀浆与否，及不同浓度的胰酶、胶原酶、胰酶／胶原酶混合液对不同材料所获分离SCs数量的影响。发现：1．不同酶的消化效果有一定的差异，其中胶原酶最好，胰酶／胶原酶混合液次之。2．浓度高的酶较浓度低者分离的细胞多。3．匀浆后用酶消化较不匀浆者效果好。4。匀浆后用酶消化，SCs数于20分钟时达到高峰；若不匀浆，酶消化30-40分钟SCs数才达到高峰。5．从脊神经节分离获得的SCs较坐骨神经者多。     

肿瘤干细胞学说与肿瘤治疗

目的 分析近年来肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)领域的主要研究成果,为肿瘤治疗和CSC的研究提供思路.方法 广泛查阅近年来有关CSC与肿瘤治疗的相关文献,并进行总结和分析.结果 CSC的概念于2001年提出,至今已在多种组织中得到证实.CSC研究包括各种实体CSC分离鉴定、CSC起源、微环境、生长机制以及肿瘤治疗等方面.根据CSC学说,传统的肿瘤治疗方法存在缺陷,CSC新治疗思路可能彻底治疗肿瘤.结论 CSC学说目前还存在一些争议,但为肿瘤的治疗提出了革命性思路和方向.     

鸡菌的液体发酵研究和化学成分分析

采集中国西昌的野生鸡土从菌子实体，经分离、纯化、保存于ＰＡＤ斜面培养基中，进而从液体摇瓶培养扩大到５００Ｌ发酵罐生产。结果：在ｐＨ６．５～７，温度２８～３０℃，经３０小时左右发酵培养，获得菌丝体最大收率为２４．５ｇ／Ｌ（干重）。对其菌丝体化学成分与野生子实体进行对比测试，结果显示：液体发酵菌丝体含有蛋白质４９．１８％，碳水化合物１０．７５％，脂８．４７％，多糖７％，香豆精０．２５％，皂甙０．１％，较野生子实体更高。具有工业化生产价值     

白障明的诱变性试验研究

作者用鼠伤寒沙门氏菌回变试验,小鼠骨髓红细胞微核试验及CHL细胞染色体畸变试验,对白障明进行了诱变性试验研究。结果表明鼠伤寒沙门氏菌回变试验为阴性,该药可能不诱发基因突变,NIH小鼠骨髓红细胞微核试验及CHL细胞染色体畸变试验均为阴性,说明该药可能不诱发体内,体外染色体损伤作用。     

乙型肝炎病毒的垂直传播及对发育的影响

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是引起以肝脏炎性病变为主并可引起多器官损害的病原体。它除侵犯肝细胞外,也可见于人体的其他器官,如白细胞、胆管上皮细胞、血管平滑肌细胞、脾脏、骨髓、精子、胰腺、肾脏等,严重危害人体健康。我国是乙型肝炎高发区,HBV表面抗原(HBsAg)     

黄芪总苷对肝癌BEL-7402细胞株的抑制作用

目的研究黄芪总苷对肝癌BEL-7402细胞增殖的抑制作用及探讨作用机理。方法肝癌BEL-7402细胞与不同浓度的黄芪总苷培养12,24,48 h,应用MTT和流式细胞术分析黄芪总苷对细胞的作用。结果黄芪总苷对肝癌BEL-7402细胞增殖具有明显的抑制作用并呈剂量、时间依赖性。黄芪总苷对肝癌BEL-7402细胞具有促进凋亡作用,并且上调p53基因表达。结论黄芪总苷可抑制肝癌BEL-7402的增殖,其抑制肝癌BEL-7402作用与其促进肿瘤细胞凋亡、上调p53基因表达有关。     

慢性肾功不全患者血清r—IFN水平的变化及意义

目的：探讨尿毒症患者血清r-IFN(r-干扰素）水平变化及意义。方法：采用对流免疫电泳法及火箭电泳法检测了我院1995年11月至1996年11月住院慢性肾功不全患者68例血清r-IFN水平。结果：慢性肾功不全患者血清r-IFN水平明显下降,氨质血症组和尿毒症组与正常对照组有明显差异（P＜0．05）,氨质血症组与尿毒症组无明显差异（P＞0．05）。结论：慢性肾功能不全患者免疫功能低下,血清r-IFN水平较正常人显著降低。     

用精原细胞介导法制备乙肝病毒X基因转基因小鼠的实验研究

目的：探讨精原细胞介导法制备乙肝病毒X基因转基因小鼠的可行性。方法：构建乙肝病毒X基因表达载体pcDNA3-X;应用微量注射针将脂质体包裹的pcDNA3-X表达载体直接注入C57BL／6N雄性小鼠睾丸的曲细精管内，于第一次注射后6周，与雌鼠交配，用PCR法和免疫组化法检测仔鼠基因组中的外源DNA和肝组织中表达的pX蛋白。结果：测序结果与文献报道一致，并且X基因在Hela细胞中表达；共产仔鼠16只，其中1只为阳性仔鼠，阳性率为6．25％。结论：初步证明用精原干细胞介导法制备X基因转基因小鼠是可行的。