马钱子发酵品中生物碱化学成分研究

目的研究马钱子经朱红栓菌固体发酵产物(发酵品)的生物碱成分。方法采用溶剂提取、硅胶柱色谱等方法对马钱子发酵品的生物碱成分进行分离纯化,根据化合物的理化常数和波谱数据鉴定其结构。结果从马钱子发酵品中共分离得到10个生物碱成分,分别鉴定为士的宁(1)、马钱子碱(2)、伪士的宁(3)、16-甲氧基士的宁(4)、番木鳖次碱(5)、士的宁氮氧化物(6)、马钱子碱氮氧化物(7)、士的宁氯甲氯化物(8)、马钱子碱氯甲氯化物(9)和喜树次碱(10)。结论马钱子发酵品的大部分化学成分仍然是吲哚类生物碱,其中仅有10是单萜吡啶生物碱,为首次从该种植物中分离得到;化合物4是首次从该植物的种子中分离得到;化合物8和9可能为氯仿提取过程中产生的人工加合物。迄今未见朱红栓菌中含有上述生物碱的报道。与生品相比,马钱子发酵品中生物碱成分发生了一定的变化,其中化合物4、6、7和10可能为发酵品新增成分,这些生物碱成分的鉴定为马钱子发酵"去毒存效"原理提供了理论依据。     

广防己中马兜铃酸Ⅰ的提取工艺优选及真菌发酵对其含量的影响

目的:优化广防己中马兜铃酸Ⅰ的提取工艺,并探讨真菌发酵降低毒性作用的可能性。方法:采用L9(34)正交设计,以提取时间、溶剂倍数、甲醇浓度、提取次数4个因素为考察指标,直接加热回流法提取,采用高效液相色谱法(HPLC)测定广防己及其两种药用真菌(F1菌和F2菌)发酵品溶液中马兜铃酸Ⅰ的含量,流动相为乙腈-1%冰醋酸水溶液(51:49),流速为1.0mL/min,检测波长315nm,柱温30℃。结果:最佳制备工艺为粉末40目,加10倍量60%甲醇直接加热回流提取一次1h;与广防己药材相比,两种发酵品GF1和GF2中马兜铃酸Ⅰ的含量均明显下降,下降率分别为68.67%和52.67%,且有新的色谱峰出现。结论:该工艺马兜铃酸Ⅰ提取率高,稳定性好,提示真菌发酵可能对广防己的减毒具有一定的意义。     

知母中具抑瘤活性的芒果苷的微波辅助提取工艺

目的?优化知母中微波辅助提取芒果苷的工艺条件,研究其对人乳腺癌细胞株MDAMB231的增殖抑制作用。方法?采用单因素试验,考察乙醇浓度、提取时间及固液比对提取得率的影响。以四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT法）观察不同浓度芒果苷对MDAMB231细胞生长的影响。结果?微波辅助提取芒果苷的最佳工艺条件为乙醇浓度30%,提取时间60s,固液比1∶40（g/mL）,在此条件下,芒果苷的得率为1.82%。MTT法显示,不同浓度的芒果苷对MDAMB231细胞均有抑制作用,其中1、5、10μmol/L 浓度芒果苷对MDAMB231细胞抑制作用最为显著,其24h抑制率分别为 20.55%、22.26%和22.94%。结论?微波辅助提取省时,操作简单,收率高;芒果苷能明显抑制人乳腺癌细胞株MDAMB231的增殖。      

2种HPLC检测器测定莲子心中3种酚性生物碱含量的比较

目的?建立反相HPLC荧光检测（fluorescence detector,FD）法,测定中药莲子心中莲心碱（liensinine,Lien）、异莲心碱（isoliensinine,Iso）和甲基莲心碱（neferine,Nef）等3种酚性生物碱的含量,并与HPLC紫外检测器（ultravioletvisible detector,UVD）的测定结果进行比较。方法?采用Phecda C₁₈色谱柱（5μm,4.6mm ×250mm）,乙腈 0.015mol/L十二烷基磺酸钠冰醋酸（55∶45∶1）为流动相;流速:1.0 mL/min;柱温:30℃。FD的激发波长为280nm,发射波长为319nm;UVD的检测波长为282nm。结果?用FD检测莲子心中3种酚性生物碱的回归方程和相关系数（r）分别为:A_Lien =134994C_Lien +970790,r_Lien = 0.9990;A_Iso =330030C_Iso +647307,r_Iso = 0.9993;A_Nef =165207C_Nef +807442,r_Nef =0.9995。三者均具有良好的加样回收率（>95%）,且所得莲子心中Lien、Iso和Nef的含量与UVD测得值基本一致。结论?HPLCFD法测定莲子心中莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱含量方法可靠、结果准确,与HPLCUVD法一样适用于莲子心药材中酚性生物碱的定量控制。      

镰形棘豆脂溶性生物碱含药血清对人肺癌A549细胞活力、凋亡及周期的影响

目的研究藏药镰形棘豆脂溶性生物碱(OFLA)含药血清对人肺腺癌A549细胞活力、凋亡及生长周期的影响。方法将SD大鼠随机分为5组:空白对照组,OFLA低、中、高剂量组(90,135,270 mg·kg~(-1))和阳性药组(环磷酰胺,36 mg·kg~(-1)),连续给药5 d,制备含药血清。采用CCK-8法检测细胞活力;Annexin-VFITC/PI双染法检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期。结果与空白对照组比较,OFLA各给药组的A549细胞活力在12,24,48 h均明显降低(P0.01),不同浓度的OFLA含药血清均对A549细胞的活力有不同程度的抑制作用,呈现剂量依赖性,并且与作用时间呈正相关趋势。作用24 h后,OFLA各给药组均出现不同程度的细胞凋亡,低、中、高剂量组的细胞凋亡率分别为41.1%、57.6%、60.9%,与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P0.01,P0.001)。与空白对照组比较,OFLA含药血清中、高剂量组的G0/G1期细胞比例显著提高(P0.05,P0.01),S期细胞比例显著降低(P0.05)。结论 OFLA可以抑制人肺癌A549细胞的活力,诱导细胞凋亡以及延缓细胞周期进程,将细胞生长周期阻滞在G0/G1期。     

短刺小克银汉霉对马钱子生物碱盐转化工艺的研究

目的 为提高短刺小克银汉霉对马钱子中马钱子碱与士的宁的转化率,构建高效的短刺小克银汉霉微生物转化体系。方法 根据菌种的生长代谢规律,采用单因素实验法,以马钱子碱硫酸盐和士的宁硝酸盐作为底物,以对底物的转化率作为指标,对可能的影响因素进行了考察。结果 获得了优化的转化工艺,即接种量为4%、发酵时间为2.5 d、底物质量浓度为20 mg/L、转化时间为3 d、培养温度为28 ℃、培养基初始pH值为6.5、摇床转速为150 r/min。在此工艺条件下,2种底物的平均转化率分别达到了77.75%与77.10%。结论 短刺小克银汉霉对2种底物的平均转化率分别提高了约17%与22%,此微生物转化体系能够满足马钱子减毒存效研究的需要。     

原发性高血压患者短时收缩压变异性观察

目的研究原发性高血压（EH）短时收缩压变异性（SSBPV）的变化,推测SSBPV在EH上的病生理机制。 方法用无袖带式动态血压仪检测31例性别和年龄匹配的EH患者的SSBPV,并与正常组（n=32）比较。按静坐、站立、心算、握力、踏车依次进行,每组监测10分钟,每2次心跳采样1次,有效血压记录不少于300点。 结果（1）EH组与对照组在踏车时的SSBPV较其余的状态差异均显著（P<0.01）。（2）对照组中SSBPV依次为握力>站立>心算>静坐,且各状态间差异显著（P<0.05）,尤其在站立与静坐间（P<0.01）。（3）EH组心算与握力时的SSBPV较同组静坐时差异显著（P<0.05）。（4）EH组静坐、站立、心算时的SSBPV较正常组明显升高（P<0.01）;但握力、踏车时与正常组无差异（P>0.05）。 结论无论EH患者抑或正常人,脑力劳动与等长、等张运动是SSBPV增强的重要因素,体位改变对SSBPV的意义尚不能肯定。SSBPV既与收缩压显著升高有关,也可独立于收缩压之外。EH较正常人于静坐、站立、心算时SSBPV明显升高,但握力、踏车时差异不显著。SSBPV增大是EH一个重要特征,主要由于动脉压力反射敏感性减退及阻力小动脉结构重塑所致血管收缩反应性增强,其可能参与靶器官损害。     

RP－HPLC法测定紫金解毒饮中绿原酸的含量

建立了ＲＰ－ＨＰＬＣ测定紫金解毒饮中绿原酸含量的方法。固定相ＯＤＳ－Ｃ＿（１８）柱，２５０×４．６（ｉ．ｄ．）ｍｍ，流动相甲醇－１‰磷酸水溶液－四氢呋喃（２５：６０：１５），检测波长为３２８ｎｍ。绿原酸的平均回收率为９９．２７％。本法简便、快速、重现性好，可以作为控制紫金解毒饮质量的检测手段。     

胶束HPLC法测定玉清安液中小檗碱型生物碱的含量

建立了一种胶束－反相高效液相色谱法，用来测定玉清安液中小檗碱、掌叶防己碱和药根碱的含量。固定相为ＹＷＧ－Ｃ１８柱，１０μｍ，４．６（ｉ．ｄ．）×２５０ｍｍ，流动相为０．１ｍｏｌ／Ｌ酒石酸－甲醇－十二烷基磺酸钠（３０：７０：１），检测波长为３４５ｎｍ；小檗碱、掌叶防己碱和药根碱的加样回收率分别为９９．７７±２．２８％，１００．１１±２．４９％和１０２．６２±２．１０％。     

五例臀上动脉伤的处理

我科自１９８１～１９９４年共处理臀上动脉伤５例，深感处理此类伤有其特殊性及复杂性。报告如下。临床资料１．一般资料：５例均为男性，年龄１５～４７岁。致伤原因：刀刺伤４例，车祸致骨盆骨折并骶髂关节脱位１例。４例经动脉造影证实，１例术中证实。４例系开放性损...