DNA甲基转移酶3b催化区保守序列shRNA真核表达载体构建

目的构建针对基因DNA甲基转移酶3bmRNA催化区保守序列的shRNA真核表达载体,并对其克隆进行鉴定。方法以DNMT3bmRNA序列为靶基因设计3条shRNA和一条阴性对照HK,应用基因重组技术将其克隆到真核表达载体PGensil-1中,构建真核表达载体P-DNMT3b-shRNA1、P-DNMT3b-shRNA2、P-DNMT3b-shRNA3、P-HK。将重组质粒转化到大肠杆菌DH5α中,接种于LB平板后分别挑取5个单克隆菌落进行扩增,经筛选后对提取质粒进行测序鉴定。结果重组质粒经SalI酶切鉴定得到大小2个基因片段,大片段约为4．55kb,小片段约为440bp,与设计相同;四组重组质粒经测序鉴定显示插入完全正确。结论成功构建了P-DNMT3b-shRNA（1、2、3）及HK真核表达载体,为下一步实验奠定了基础。     

p53重组腺病毒联合顺铂或三氧化二砷对人膀胱癌EJ细胞的作用

目的：探讨p53重组腺病毒（Ad-p53）与顺铂（CDDP）或三氧化二砷（As2O3）联合应用提高膀胱癌疗效的可能性及其机制。方法：将Ad-p53[100感染强度（MOI）]与CDDP（0．5mg/L)或As2O3(2.0μmol/L）联合应用，通过细胞生长抑制实验、克隆形成实验、细胞周期分析、免疫组织化学分析以及裸鼠皮下移植瘤模型，观察其对膀胱癌EJ细胞的作用及机制。结果：与单独应用相比，Ad-p53与低剂量的CDDP或As2O3联合可明显抑制EJ细胞体外生长，诱导EJ细胞凋亡，EJ细胞G2／M期阻滞更明显；裸鼠体内肿瘤发生时间延迟，4周后肿瘤体积与单独应用时相比，差异有显著性（P＜0．05）。结论：基因治疗与化疗联合应用，可进一步提高膀胱癌的疗效。     

缬沙坦对伴有高血压病的代谢综合征患者血管性假血友病因子的影响

目的 观察伴有高血压病的代谢综合征（metabolic syndrome,MS）患者血浆血管性假血友病因子（von Willebrand factor,vWF）水平及应用缬沙坦后vWF的变化。方法 测定22例伴有高血压病的MS患者服用缬沙坦80 mg/d4周前后及29例健康体检者血浆vWF含量。结果 伴高血压病的MS患者血浆vWF显著高于健康对照者［(176±24)% vs (130±26)%,P<0.01］;vWF含量与收缩压（SBP）［r＝0.60,P<0.01］、舒张压（DBP）［r＝0.57,P<0.01］、平均动脉压（MAP）［r＝0.61,P<0.01］、体质量指数（BMI）［r＝0.53,P<0.01］、三酰甘油（TG）［r=0.36,P<0.05］、总胆固醇（TC）［r=0.49,P<0.01］、空腹血糖（FBG）［r＝0.45,P<0.01］呈正相关;缬沙坦治疗4周后,伴高血压病的MS患者血浆vWF水平较治疗前显著降低［(160±15)% vs (176±24)%,P<0.01］。结论 伴高血压病的MS患者血浆vWF水平较健康人明显增高;予缬沙坦治疗后,在有效降低血压的同时,可短期内降低vWF水平,改善血管内皮功能。     

p53重组腺病毒联合增殖细胞核抗原反义寡核苷酸治疗膀胱癌的研究

目的：探讨重组腺病毒p53(Ad-p53)与增殖细胞核抗原反义寡核苷酸（PCNA-ASO）联合应用对膀胱癌的抑瘤效应。方法：用腺病毒将p53{感染强度（MOI）100}导入细胞，PCNA-ASO(1.6μmol/L)在脂质体（Lipofectin）介导下转染细胞，通过噻唑蓝比色法（MTT）、流式细胞术、克隆形成、建立移植瘤模型，探讨其体内外抗瘤活性。结果：Ad-p53与PCNA-ASO联合应用明显抑膀胱癌胞EJ(89.3%)和BIU-87(78.6%)生长，细胞克隆形成能力分别下降74.8％和67.5％，S期比率（EJ细胞11.4％，BIU-87细胞14.6％）明显降低，细胞生长受阻于G1期(EJ细胞62.2％，BIU-87细胞56.8％)；联合应用7d后，肿瘤体积较初始分别下降47.6％和36.4％。结论：Ad-p53联合PCNA-ASO可抑制膀胱癌细胞体内外生长，产生协同效应。     

射干麻黄汤加减治疗小儿咳嗽变异性哮喘对炎症因子与T淋巴细胞的影响

目的 探讨射干麻黄汤加减治疗小儿咳嗽变异性哮喘(CVA)对炎症因子与T淋巴细胞的影响。方法 选取西安市中医医院2017年1月至2019年7月收诊的82例小儿CVA患者,随机分为研究组(41例,射干麻黄汤加减疗法+孟鲁司特钠)与对照组(41例,孟鲁司特钠),比较两组患者的IL-13IL-4水平、Treg、CD8⁺与CD4⁺水平及不良反应发生率。结果 治疗后研究组IL-13、IL-4、与CD8⁺水平及其不良反应发生率均较对照组低(P＜0.05);其Treg与CD4⁺水平均较对照组高(P＜0.05)。结论 射干麻黄汤加减疗法有助于改善小儿CVA患者的免疫功能,减少其不良反应与炎症反应。     

电项针对大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡调控因子的影响

缺血性脑血管疾病重要的病理生理过程,是脑缺血再灌注损伤,并能造成缺血级联反应,最终导致神经元死亡.本实验旨在观察大鼠脑缺血再灌注损伤后凋亡相关蛋白的表达情况及电项针疗法对其的影响.     

Effect of Ad-p16 Combined with CDDP or As_2O_3 on Human Bladder Cancer Cells

Summary:To evaluate the therapeutic efficiency of combined use of p16-expressing adenovirus andchemotherapeutic agents CDDP or As_2O_3 on human bladder cancer cell line EJ,the human bladdercancer cell line EJ were transfected with adenovirus-mediated p16 gene(Ad-p16),with administra-tion of cisplatin(CDDP)or arsenic trioxide(As_2O_3).The cell growth,morphological changes,cellcycle,apoptosis and molecular changes were measured using cell counting,reverse microscopy,flowcytometry,cloning formation,immunocytochemical assays and in vivo therapy experiments to evalu-ate the therapeutic efficacy of such combined regimen.Ad-p16 transfer and CDDP or As_2O_3 adminis-tration to EJ cells could exert substantially stronger therapeutic effects than the single agent treat-ment.Especially in in vivo experiments,combined administration of p16 and CDDP or As_1o_3 inducedalmost tumor diminish compared to the partial tumor diminish induced by single agent.Moreover,delivery of Ad-p16,or administration of minimal-dose CDDP