膀胱癌干细胞关键转录因子Oct4的表达及与肿瘤干细胞的关系

目的检测干细胞关键转录因子Oct4在人膀胱癌组织及细胞系BIU-87中的表达，探讨Oct4的表达在膀胱癌发生发展中的意义及与肿瘤干细胞的关系。方法采用免疫组织化学方法对49例膀胱癌组织病理标本、采用免疫细胞荧光和逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法对膀胱癌细胞系BIU-87进行Oct4表达的检测。结果Oct4在膀胱癌中的表达率为81．6％（40／49），Oct4阳性细胞率约为0．6％，Oct4表达的阳性细胞率及强度与膀胱癌的分级、复发和转移无明显相关性（P〉0．05）。在BIU-87细胞中存在少量的Oct4阳性细胞，RT-PCR证实存在Oct4的弱表达。结论膀胱癌中有少量细胞表达全能干细胞标志物Oct4，这些细胞很可能是膀胱癌干细胞，这将为其最终分离和鉴定人膀胱癌干细胞提供重要的基础。     

正电子发射体层成像在肺癌诊断和分期中的价值

目的了解正电子发射体层成像(PET)在肺癌诊断和分期中的价值。方法收集1998年9月至2003年4月间行PET和CT检查,且诊断明确的肺部疾病患者的临床资料,对PET和CT检查结果与病理检查结果进行对比分析。结果在此期间共收集104例患者,其中肺癌64例(60%),肺部良性疾病40例(40%)。肺癌患者PET的标准摄取比值(SUV值)中位值为4.5(1.2～11.7),明显高于良性患者的1.0(0～7.7);且肺癌患者的SUV值与肺癌组织学类型、分化程度、临床分期和病灶大小均无关(P>0.05)。PET诊断肺癌的敏感性、特异性和准确性分别为88%、85%和87%;CT的敏感性、特异性和准确性分别为73%、28%、57%,PET的特异性和准确性显著高于CT(P<0.05)。对于胸腔淋巴结转移诊断的敏感性、特异性和准确性CT:N1期分别为33%、73%、59%,N2期分别为80%、79%、79%,N3期特异性及准确性均为97%;PET:N1期分别为33%、82%、65%,N2期分别为60%、83%、85%,N3期特异性及准确性均为85%;两者差异无统计学意义(P>0.05)。结论PET在鉴别肺内病灶良恶性质上有优势,对胸腔内淋巴结转移的诊断要结合CT结果综合判断。     

血小板源性生长因子-D在膀胱癌中的表达及其临床意义

目的 观察血小板源性生长因子-D(PDGF-D)在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达,探讨PDGF-D与膀胱移行细胞癌的发生发展之间的关系及其临床意义.方法 分别采用实时定量逆转录-聚合酶链反应(real-time RT-PCR)法和蛋白免疫印迹(Western blot)法检测62例膀胱移行细胞癌组织、10例癌旁正常膀胱组织中PDGF-D mRNA和蛋白的表达,并分析其与临床病理之间的关系.结果 PDGF-D mRNA在BTCC中的表达量是正常对照组的1.89倍,PDGF-D蛋白在癌组织中的表达明显高于正常膀胱组织(相对吸光度比值:正常组0.231±0.041,癌症组0.689±0.083,P＜0.05).而且随着肿瘤病理分级的升高及淋巴结转移的出现,PDGF-D mRNA和蛋白的表达水平均逐渐升高,各组问差异有统计学意义(P＜0.05).但不同分期的癌组织中PDGF.D mRNA和蛋白的表达水平的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PDGF-D表达增强与膀胱癌的发生及分化、转移密切相关,可能在膀胱癌的发生发展中发挥重要作用.     

p16重组腺病毒联合顺铂或三氧化二砷对人膀胱癌EJ细胞作用的实验研究

目的　探讨 p16重组腺病毒 (Ad p16 )与顺铂 (CDDP)或三氧化二砷 (As2 O3 )联合应用对人膀胱癌EJ细胞体内外生长的抑制效应及机制。　方法　将Ad p16与CDDP或As2 O3 联合应用 ,通过细胞生长抑制实验 ,克隆形成实验 ,细胞周期分析 ,免疫组织化学分析 ,以及裸鼠皮下移植瘤模型 ,观察其对人膀胱癌EJ细胞的作用及机制。　结果　与单独应用相比 ,Ad p16与低剂量的CDDP或As2 O3 联合应用可明显抑制EJ细胞的体外生长 ,诱导EJ细胞凋亡 ,明显阻滞EJ细胞G1期 ;裸鼠体内肿瘤发生时间延迟 ,4周后肿瘤体积与单独应用时相比差别有显著性意义 (P <0 .0 5 )。　结论　Ad p16与CDDP或As2 O3 联合应用 ,有可能进一步提高膀胱癌的治疗效果     

含线粒体促凋亡蛋白基因人膀胱移行上皮特异性表达载体的构建及表达

目的 构建含线粒体促凋亡蛋白基因（Smac）、人尿路斑块蛋白Ⅰb（Up Ⅰb）启动子调控的真核表达载体，检测其在膀胱癌细胞的表达。方法 MluI＋XbaI分别双酶切含SmaC的真核表达质粒pcDNA3．1-Smac和UpⅠb启动子片段，T4DNA连接酶环化目的片段构建新质粒，酶切凝胶电泳和测序鉴定。新质粒转染12孔BIU-87细胞，逆转录,聚合酶链反应（RT-PCR）检测6孔的Smac mRAN表达，免疫组织化学过氧化酶标记的链霉卵白素（SP）法检测另6孔的Smac蛋白表达。结果 pcDNA3．1-Smac中人巨细胞病毒启动子（CMV）和T7噬菌体启动子（T7）被成功替换为upⅠb启动子，构建新质粒pcDNA3-UpⅠb promoter-Smac；转染后BIU-87细胞Smac mRNA表达增强2.1倍、71％癌细胞中Smae蛋白表达增强（P＜0．05）。结论 UpⅠb启动子调控含Smae的真核表达载体构建成功，且能在膀胱癌细胞中有效表达。     

高原寒冷地区战时伤员救治情况分析与研究

目的：旨在探讨未来现代化战争时，高原寒冷地区伤员救治的新模式和采取的新措施。方法：采用回顾性调查的方法收集资料，利用构成比指标进行资料的统计学描述，选用X^2检验进行统计学处理。结果：伤员中上等兵所占比例最高；战伤诊断位居首位的是枪弹伤，其次为冻伤，再次为高山适应不全症；有49．34％的伤员后送时间不超过5天，有57．74%的伤员在野战医院停留不超过3天，转院和后送的伤员占到伤员总数的64．83％。结论：未来现代化战争中，伤情对伤员生命和伤残的威胁更大，对伤员的救治和后送尤其要突出及时性和连续性，使伤员得到及时良好的治疗和归队前的康复护理。     

Caspase-3在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义

目的 检测Caspase家族中Caspase-3在膀胱移形细胞癌（BTCC）组织及正常膀胱组织中的表达，探讨Caspase03的表达在膀胱癌发生发展中的意义。方法 采用免疫组织化学和实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（RT—QPCR）方法对30例膀胱癌和15例正常膀胱组织中Caspase-3的表达进行检测。结果 免疫染色标本中，在正常膀胱组织和膀胱癌中Caspase-3的阳性表达率分别为80％和30％，两者差异有统计学意义（P〈0．05）。Caspase-3在膀胱癌组织中的△△CT值是正常膀胱组织的1．9274（1．1248—2．5413）倍，但病理分级之间和临床分期之间均差异无统计学意义。结论 Caspase-3表达下调导致细胞凋亡减少，可能在膀胱癌的发生发展过程中起重要作用。     

Expression and Prognostic Significance of Livin in the Progression of Bladder Cancer

It has been suggested that progression of bladder transitional cell cancer (BTCC) may be regulated at the molecular level by a typical pattern of expression of genes involved in apoptosis. Re-cently Livin, belonging to the inhibitors of apoptosis (IAP) family, has been found to be expressed in most solid tumors, where its expression is suggested to have clinical significance. In order to explore the significance of Livin expression in the development of BTCC, immunohistochemistry and RT-QPCR were used to detect the expression of Livin mRNA in tumor tissues and adjacent normal tissues of 30 cases of BTCC. The results showed that the positive rate of Livin expression in adjacent normal tissues and tumor tissues was 0 and 60% (18/30) respectively. The -△△CT value of Livin in BTCC tissues was 8.0454 (7.4264-8.6644) times of that in adjacent normal tissues. The expression of Livin mRNA had no correlation with tumor pathological grades and clinical stages. It was sug-gested that there was weak expression of Livin mRNA in adjacent normal tissues, but strong in tumor tissues.     

XIAP在膀胱癌中的表达及其与肿瘤增殖活性的关系

目的探讨XIAP在膀胱移行细胞癌(TCC)中的表达及其与TCC增殖活性的相关意义。方法应用免疫组织化学SABC技术检测47例TCC癌组织,6例正常膀胱黏膜组织中XIAP及增殖细胞核抗原Ki-67的表达水平。结果6例正常膀胱组织中仅有1例XIAP表达阳性(16．67%),而在47例TCC癌组织中有37例XIAP表达阳性(78．73%),与正常膀胱组织相比,膀胱癌组织中XIAP表达显著增高(P＜0．01)；复发的TCC癌组织中XIAP的阳性表达率(89．47%,17/19)明显高于初发的癌组织(71．43%,20/28)(P＜0．05)；但是,不同分级和分期的癌组织中XI- AP的表达差异无统计学意义(P＞0．05)；此外,XIAP表达阳性的TCC癌组织中具有较高的核增殖活性,其Ki-67标记指数为(37．51±15．85)%,明显高于XIAP表达阴性的TCC癌组织的(17．76±11．42)%(P＜0．05)。结论XIAP在TCC癌组织中呈高表达,其表达与肿瘤的分级和分期无明显相关,但是与肿瘤的核增殖活性相关,这可能与TCC发生的早期事件及药物耐受机制有关。