芹黄素提高胸苷激酶基因系统治疗前列腺癌疗效的研究

目的　观察芹黄素 (apigenin)对前列腺癌 (PC)细胞PC 3m生长的影响及其对单纯疱疹胸苷激酶 /更昔洛韦 (HSV tk/GCV)系统“旁观者效应”的调控 ,寻求增强该系统对PCa疗效的途径。方法　四甲基偶氮唑盐比色法 (MTT法 )检测 1、10、10 0 μmol/Lapigenin对PC 3m细胞生长的影响 ,观察 10 μmol/Lapigenin预处理后GCV对tk基因阳性 (tk+ )比例为 10 %和 5 %的混合细胞的杀伤作用及 18 α 甘草次酸 ( 18 α glycyrrhetinicacidAGA)对其影响 ,并检测apigenin联合GCV的杀伤效应。结果　Apigenin可抑制PCa细胞增殖 ,呈时间和剂量依赖关系 (P <0 .0 5 0 ) ;低浓度( 10 μmol/L) apigenin预处理对PC 3m细胞增殖无影响但可使“旁观者效应”明显增强 (P <0 .0 0 1) ,10 μmol/L和 10 0 μmol/LGCV对tk+ 为 10 %细胞的杀伤率由 ( 16.15± 1.64 ) %和 ( 2 3 .46± 3 .2 1) %提高到 ( 4 5 .89± 3 .2 8) %和 ( 5 9.86± 2 .44 ) % ,该作用可被AGA抵消。联合应用apigenin和GCV后杀伤率更为显著 ,达 ( 62 .5 8± 4.2 9) %和 ( 83 .16± 3 .72 ) %。结论　Apigenin不仅可以直接杀伤PC细胞 ,还可通过增强HSV tk/GCV系统“旁观者效应” ,发挥间接杀瘤效应 ,从而提高该系统治疗PC疗效。     

经尿道前列腺切除术后患者再次入院的诊治分析

目的探讨经尿道前列腺切除术（TURP）后患者再入院的原因和治疗方法。方法采用回顾性的临床研究方法,分析2004年5月至2011年3月良性前列腺增生（BPH）患者行TURP后再次入院的比率、原因和治疗方法。结果 1604例前列腺电切术后再入院93例,约占接受手术治疗者的5.8%,平均再入院时间17个月。其中膀胱颈疤痕狭窄18例,行膀胱镜下疤痕切除术;腺体复发42例,行再次TURP术;反复肉眼血尿并急性尿潴留17例,均在膀胱镜下行血块清除术;尿道狭窄16例,11例行尿道镜下冷刀内切开,5例行尿道外口切开术,术后联合定期尿道扩张治愈。结论 BPH患者行TURP后再次入院的比率为5.8%,腺体复发是TURP术后再入院的主要原因。术前准确诊断、合理选择手术方式及术中、术后正确处理是预防TURP术后再次入院的关键。     

UpIb启动子-Smac重组体促膀胱癌细胞凋亡的实验动物研究

目的: 探讨携带Smac基因的膀胱癌细胞特异性表达质粒pcDNA3.1-UpIb promoter-Smac用脂质体包裹后注射到实验动物瘤体内的表达及促癌细胞凋亡的效应。 方法: 将人膀胱癌细胞株BIU-87注射到Balb/c-nu/nu雄性裸鼠的皮下,构建膀胱癌皮下移植瘤模型。当移植瘤长至直径约0.5cm时,用脂质体将pcDNA3.1-UpIb promoter-Smac包裹后隔天1次连续3次注射到瘤体内,间隔1天后,连续3天瘤体内注射适量丝裂霉素C诱导凋亡。设三组对照:单用脂质体质粒组、单用丝裂霉素C组和空白组。RT-PCR检测瘤组织Smac mRNA的表达,免疫组织化学法检测瘤组织Smac蛋白的表达,苏木素伊红染色镜检、DNA Ladder带凝胶电泳分析和TUNEL-荧光标记检测观察瘤组织癌细胞的凋亡情况。 结果: 膀胱癌裸鼠移植瘤模型构建成功。瘤体内注射脂质体包裹的pcDNA3.1-UpIbpro-moter-Smac后,与未注射脂质体质粒的对照组比较,Smac的表达增强约2.1倍;先注射脂质体质粒后丝裂霉素C处理和单用丝裂霉素C处理的瘤组织均可见典型的凋亡细胞,但前者的凋亡率为49.8%,显著高于后者的23.5%(P<0.01)。 结论: 膀胱癌裸鼠移植瘤模型瘤体内直接注射脂质体包裹的pcDNA3.1-UpIb promoter-Smac后,所携带的Smac基因能够在瘤组织中有效表达,并对丝裂霉素C诱导的瘤细胞凋亡有显著的促进作用。该质粒配合丝裂霉素C等凋亡诱导药物的应用,可望为膀胱癌的靶向基因治疗提供一新的治疗模式。     

结直肠癌患者血浆K-ras基因突变情况分析

采用直接测序法检测42例结直肠癌患者血浆、肿瘤组织及20例正常人血浆中K-ras基因突变情况。结果42例结直肠癌患者血浆K-ras基因突变17例（40.48%）,肿瘤组织K-ras基因突变19例（45.24%）。对照组无血浆K-ras基因突变。认为K-ras基因突变发生于结直肠癌早期。检测血浆K-ras基因突变可作为结直肠癌的辅助诊断方法。     

Smac/DIABLO蛋白在泌尿系统肿瘤表达的研究

线粒体促凋亡蛋白(the second mitochondrial activator of caspase/direct IAP binding protein with low PI Smac/DIABLO)的结构特征与其功能密切相关,在诱导泌尿系统肿瘤细胞凋亡,增加肿瘤细胞的化疗敏感性及增强免疫力等方面显示出良好的应用前景,以Smac/DIABLO蛋白及其类似物为基础的药物或生物制品将为泌尿系统肿瘤的治疗开辟一个新领域.     

鹿角状肾结石开放取石的术式选择

目的:探讨鹿角状肾结石开放取石的术式选择、预防术中意外切肾和术后失肾的措施。方法:术中根据结石形态与肾脏解剖关系选择术式。对23例鹿角状肾结石患者行开放取石术治疗,左肾鹿角状结石9例,右肾10例,双肾4例。手术前后加强防治感染,术后充分引流,以预防术后失肾。结果:手术均顺利完成,结石均于术中取尽。术中无一例意外切肾。术后1个月随访全部患者的术侧肾脏功能恢复良好。结论:对鹿角结石,根据结石的形态、分布、肾盂类型、肾积水状态和肾实质厚度等因素综合判断,选择合理的术式,能保障手术安全、干净取石。     

逼尿肌收缩强度与膀胱排空能力关系的研究

目的：研究逼尿机收缩强度[detrusor contraction strength，又称Watts factor（WF），瓦特因子]与膀胱排空能力的关系。方法：126例患埏，年龄13－78岁，平均56岁。包括良性前列腺增生61例，女性下尿路综合征39例，压力性尿失禁19例，尿道狭窄7例。常规方法行尿流率、压力－流率测定。采用WF等为研究参，将患者按照有无梗阻分组，比较最大尿流率（Qmax)、剩余尿（PVR）、最大尿流率时逼尿肌压（PQmax）、最大逼尿肌收缩强度（WFmax），将患者按照有无剩余尿分组，比较最大逼尿肌收缩强度。结果：有梗阻组最大尿流率低，剩余尿多，PQmax及WFmax明显增高；有剩余尿组WFmax值明显低于无剩余尿组。结论：膀胱出口梗阻时，WF增加但作用有限。剩余的产生与梗阻密切相关，也与逼尿肌活动低下密切相关。研究WF或收缩力时要考虑梗阻因素。     

锤头型核酶特异性阻断雄激素受体表达对前列腺癌细胞生长的影响

目的：探讨核酶阻断雄激素受体（AR）基因表达治疗前列腺癌的可能性。方法：在脂质体介导下，锤头型抗雄激素受体核酶表达载体转染前列腺癌细胞，采用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）检测ARmRNA，四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖活性，流式细胞仪（FCM）检测细胞周期时相，原位末端转移酶标记法检测细胞凋亡。结果：核酶表达载体转染1－5d后，前列腺癌细胞AR mRNA水平降低32．6％－40．7％（P＜0．05），细胞生长抑制率18．28％－35．34％（P＜0．05），细胞周期阻滞于G2／M期，诱导细胞凋亡，细胞凋亡比率增加20．70％（P＜0．01）。结论：应用核酶特异性切割ARmRNA，能有效阻断AR基因的表达，诱导前列腺癌细胞凋亡，有可能成为前列腺癌基因治疗的有效方法之一。     

嗜铬细胞瘤50例分析

目的：总结嗜铬细胞瘤的诊治体会。方法：回顾性分析50例嗜铬细胞瘤的临床资料。结果：82％的患者有高血压史，平均病程28个月。血儿茶酚胺和尿香草基苦杏仁酸增高者分别为68％，84％。B超、CT定位诊断阳性率为90％，95％；术前诊断正确率为94％。良性嗜铬细胞瘤43例，恶性嗜铬细胞瘤7例，其中：2例临床病程为良性而病理诊断为恶性，1例初次发病即为恶性，4例为复发性。2例恶性嗜铬细胞瘤伴肝转移放弃治疗，1年后死亡。结论：患者延迟就诊，基层医生对该病缺乏认识是导致误诊的主要原因。复发性嗜铬细胞瘤有很高的恶变性，应尽可能完整切除肿瘤，并加强随访。     

三氧化二砷免疫毫微球的制备及活性检测

目的 制备单抗BDI-1导向的三氧化二砷免疫蛋白微球[As2O3-(BSA-NS)-BDI-1]并检测其特异性结合膀胱肿瘤细胞的活性。方法 通过蛋白交联固化及N一羟基琥珀酰亚胺基-3-(2-吡基二硫)-丙酸脂(SPDP)交联的方法制备蛋白免疫微球。还原电泳、光镜和电镜的方法鉴定As2O3，免疫微球的共价连接与活性。吖啶橙染色检测肿瘤细胞凋亡。结果还原电泳可见免疫微球被还原后在远端形成两条蛋白条带。光镜下可见蛋白微球在肿瘤细胞周围并随细胞移动。电镜下可见蛋白微球与肿瘤细胞紧密连接且形态完整。吖啶橙染色可见免疫微球处理的膀胱肿瘤细胞表现出凋亡特征。结论 制备的As2O3-(BSA-NS)-BDI-1由共价键连接且能特异性的结合膀胱肿瘤细胞BIU-87而发挥诱导凋亡的作用。