三七总皂甙对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的保护作用

摘要：目的:探讨三七总皂甙预处理对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的保护作用。方法:建立大鼠原位肝移植模型，然后分为三七预处理组（P组）、对照组（N组）和假手术组（S组）3组，取血检查ALT，AST；用免疫组化法检测caspase-3和TNF-α的表达，TUNEL法检测肝细胞凋亡，行肝组织病理检查。结果:鼠肝移植模型N组的血ALT，AST数值、肝细胞中caspase-3和TNF-α的表达及肝细胞的凋亡均明显高于P组，差异均有显著意义（P<0.05）。结论:肝细胞凋亡加重移植肝缺血再灌注损伤，三七总皂甙预处理对大鼠肝移植缺血再灌注损伤有保护作用。     

UW液保存失当致移植肝原发性无功能

目的 分析University of wisconsin液保存失当导致移植肝Primary nonfunction的原因。方法 将保存失当的UW液灌注供肝。结果 移植肝发生急性的肝窦内栓塞继发肝静脉栓塞，下腔静脉栓塞。结论 保存不当的UW液不能用于供肝的灌注，否则将导致严重的移植肝原发性无功能(PNF)。     

不同亲属供肾肾移植临床疗效观察

目的：评估不同亲属活体供肾肾移植的临床疗效。方法：回顾总结我院实施的40例亲属活体供肾肾移植的效果，其中夫妻间供肾3例，丈夫给妻子1例，妻子给丈夫2例；父母给子女21例；兄弟姐妹间供肾16例。结果：所有供者术后7d内出院．随访2～48个月。供者肾功能均正常；所有受者肾功能均恢复后出院，其中夫妻间供肾肾移植手术患者中，1例患者术后3d发生加速排斥反应；父母给子女的21例接受移植手术的患者中2例肾移植术后7d左右发生急性排斥反应．经大剂量激素冲击治疗后恢复；兄弟姐妹间供肾的16例肾移植手术患者中．1例患者术后移植肾功能延迟至第4周恢复正常。结论：亲属活体供肾肾移植效果明显优于同期尸体供肾移植．其中父母给子女供肾或兄弟间供肾肾移植效果较好，夫妻间供肾效果相对稍差。     

红细胞容积分布宽度与肾移植术后ARDS患者病死率的相关性分析

目的  探讨红细胞容积分布宽度（RDW）与肾移植术后急性呼吸窘迫综合征（ARDS）患者病死率的相关性。方法  回顾性分析106例肾移植术后ARDS患者的临床资料, 根据RDW的高低分为RDW正常组（≤15.0%, 68例）和RDW升高组（ > 15.0%, 38例）。比较两组患者的基本情况和不良事件发生情况, 绘制Kaplan-Meier曲线比较两组的50 d病死率, 采用Cox比例风险回归分析ARDS患者死亡的风险因素。结果  106例患者中, 50 d内死亡总例数为46例（43.4%）。两组在序贯器官衰竭评估（SOFA）评分、血清肌酐、血红蛋白及血小板计数的差异有统计学意义（均为P < 0.05）。RDW升高组患者的50 d病死率及感染性休克发生率明显高于RDW正常组, 差异均有统计学意义（均为P < 0.05）, Kaplan-Meier生存曲线分析表明, RDW升高组与正常组患者的50 d病死率差异有统计学意义（P < 0.01）。Cox比例风险回归法单因素分析发现, 血红蛋白 < 100 g/L、血清肌酐 > 133 μmol/L、血小板计数 < 100×10⁹/L、重度ARDS、RDW > 15.0%均为ARDS患者50 d内死亡的潜在危险因素（均为P < 0.05）。多因素分析发现, 重度ARDS[比值比（OR）=12.77, 95%可信区间（CI）11.63~15.39, P < 0.001]和RDW > 15.0%（OR=2.01, 95%CI 1.02~3.94, P < 0.043）为ARDS患者50 d内死亡的独立危险因素。结论  RDW升高与肾移植术后ARDS患者疾病严重程度和50 d病死率相关, 可以作为一项较有意义的预测肾移植术后ARDS患者预后的临床指标。     

肾移植受者血清抗血管内皮细胞特异性抗体的提取和纯化

目的  探讨肾移植术后出现排斥反应的受者血清中抗血管内皮细胞特异性抗体的提取和纯化方法。方法  首先分离培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)。收集肾移植术后肾功能不良受者的血清样本, 应用流式细胞术进行抗血管内皮细胞特异性抗体的筛选; 用Luminex抗体检测平台检测血清中抗人类白细胞抗原(HLA)和主要组织相容性复合体Ⅰ类相关链A (MICA)的抗体。在确定血清标本中存在有抗血管内皮细胞特异性抗体后, 用HUVEC将其吸附。洗涤细胞后再将吸附的抗体从细胞膜上洗脱下来, 再用Protein-A/G磁珠再次纯化和浓缩洗脱液中的抗体IgG。采用流式细胞术检测洗脱液中抗体活性, 用SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)凝胶和免疫印迹法鉴定纯化的抗血管内皮细胞特异性抗体(IgG)。结果  在386例肾移植受者的血清中, 选取血清肌酐(Scr)>400 μmoI/L、抗HLA抗体阴性、抗MICA抗体阴性和荧光反应强度(MFI)>16的5例受者的血清样本, 纯化后的抗血管内皮细胞特异性抗体IgG在SDS-PAGE凝胶显示免疫球蛋白重链(纯度>95%)。流式细胞术结果显示纯化的抗体具有重新结合血管内皮细胞表面抗原的特性。结论  采用人脐静脉血管内皮细胞吸附肾移植受者血清中抗血管内皮细胞特异性抗体的提纯方法可取得较好效果。     

大鼠肾移植模型手术改良技巧探讨

目的  探讨大鼠肾移植模型手术的改良方法。方法  供体Sprague-Dawley(SD)大鼠21只, 受体Wistar大鼠42只。采用双侧供肾。受体左肾切除后借助自制导管, 行受体肾动脉与供体肾动脉、受体肾静脉与供体下腔静脉端端吻合, 供体输尿管带膀胱瓣与受体膀胱吻合, 最后切除右肾, 腹腔内注入头孢米诺10 mg, 关腹。记录手术时间, 动、静脉吻合时间, 冷、热缺血时间等手术数据; 术后大鼠存活3 d认为模型建立成功, 计算建模成功率, 分析死亡原因。结果  供体手术时间为(32.7±5.6)min, 供肾修整时间为(4.2±1.1)min。受体手术时间为(42.3±4.9)min, 其中动脉吻合时间为(10.1±3.2)min, 静脉吻合时间为(13.9±2.5)min, 尿路重建时间为(6.3±1.4)min。热缺血时间为(5.4±1.8)s, 冷缺血时间为(56.2±7.3)min。42只受体大鼠中, 建模成功40只, 成功率为95%。另2只受体大鼠死亡, 其中1只死于血管吻合口出血, 1只死于尿瘘引致的腹膜炎。结论  采用改良的血管端端吻合法建立大鼠肾移植模型具有操作简单、手术时间短、成功率高的特点。     

前列腺素E1后处理对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的  探讨前列腺素E1（PGE1）后处理对大鼠移植肝缺血再灌注损伤（IRI）的保护作用及其机制。方法  建立SD大鼠肝移植模型,随机分为3组：IRI组、PGE1后处理组（PGE1组）及假手术组（S组）。检测各组血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、超氧化物岐化酶（SOD）及丙二醛（MDA）的含量;采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）方法检测移植肝组织内肿瘤坏死因子（TNF-α）信使核糖核酸（mRNA）的表达水平;苏木精-伊红染色（HE）观察移植肝病理形态学变化。结果  供肝再灌注后2及6 h,PGE1组的大鼠血清ALT、AST和MDA水平及TNF-α mRNA的表达低于IRI组（P <0.05）,血清SOD水平高于IRI组（P <0.05）,光镜下PGE1组肝组织损伤较IRI组轻。结论  PGE1后处理可通过提高肝组织的抗氧化能力,降低TNF-α来减轻大鼠移植肝IRI。

     

移植肝缺血-再灌注损伤程度的评估及其与肝移植患者预后的关系

目的探讨移植肝缺血-再灌注损伤程度的评估方法及其与肝移植患者预后的关系。方法218例良性终末期肝病患者，在移植肝恢复血液灌注后1h采取外周静脉血，测定丙氨酸转氨酶浓度（定义为基础肝功能），同时采用组织气体分析仪测定肝组织的氧分压，并取肝组织活检，计算水变性及坏死细胞百分比，分别对上述3项指标进行评分，再根据各指标得分之和将缺血-再灌注损伤程度划分为5级（0～Ⅳ级），统计围手术期（术后2周内）、术后近期（术后2周至1个月）、术后中远期（1个月以上）的患者死亡率。结果移植肝缺血再灌注损伤程度评为0级者157例（A组），死亡7例（4．5％），71．4％（5／7）死于术后3-6个月；缺血-再灌注损伤程度评为Ⅰ级者25例（B组），死亡5例（20．0％），80．0％（4／5）死于术后2周至3个月；缺血-再灌注损伤程度评为Ⅱ级者23例（C组），死亡5例（21．7％），80．0％（4／5）死于术后2周至3个月；缺血-再灌注损伤程度评为Ⅲ级者8例（D组），死亡7例（87．5％），85．7％（6／7）死于术后1个月内；缺血-再灌注损伤程度评为Ⅳ级者5例（E组），全部死亡，80．0％（4／5）死于术后1个月内。A组各期死亡率明显低于B组、C组（P〈0．05）和D组、E组（P〈0．01）；B组、C组间各期死亡率的差异无统计学意义（P〉0．05）；B组、C组各期死亡率均低于D组、E组（P〈0．05）。结论基础肝功能、组织氧分压以及水变性和坏死细胞百分比三项指标可基本反映移植肝缺血-再灌注损伤程度；缺血-再灌注损伤评级达Ⅲ～Ⅳ级者术后死亡率较高。     

乌司他丁在肝移植围手术期中的应用

目的 :研究乌司他丁 (UTI)在肝移植手术期中的作用。方法 :在 1999年 8月～ 2 0 0 0年 12月对 2 9例各种终末期肝病施行 31例次肝移植 ,本组术前 3天及术后 7d分别应用UTI。对照组为 1995年以来施行的 36例未用UTI肝移植组。两组分别观察血、尿淀粉酶、HCT、IL - 2、BUN、Cr、ARDS、胸水、腹水等指标。结果 :用药组较对照组术后近期各种并发症、病死率明显减少。结论 :UTI具有抗手术侵袭、减少炎性介质释放、稳定细胞膜等效应 ,并因而减少肝移植术后并发症及病死率。     

肾移植术后肺部感染28例临床分析

目的:探讨肾移植术后肺部感染的原因、诊断与治疗.方法:对本院28例肾移植术后肺部感染患者的临床资料进行回顾分析.结果:28例患者中确诊细菌感染47例次(47%),巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)23例次,真菌17例次,结核杆菌5例次,卡式肺囊虫2例次,6例次未找到明确病原菌.感染的中位时间为移植术后79.50 d,平均时间为移植术后84.64 d;感染时间分布为:术后3个月之内14例,3～6个月10例,6个月之后4例.28例肺部感染患者中并发急性肺损伤急性呼吸窘迫综合征16例,其中13例行机械通气治疗,12例治愈.本组28例患者中,共治愈24例,死亡4例.结论:肾移植术后肺部感染多发生于术后半年尤其是3个月内,病情发展迅速,发展为ARDS后治疗难度加大,预后差,感染病原体多样,确诊困难,影像学检查意义非常必要.早期联合抗细菌、抗病毒、抗真菌及抗支原体治疗,及时调整免疫治疗方案,有低氧血症表现时需无创鼻导管/面罩吸氧,加强营养及患者自身抵抗力,适时予以呼吸机辅助砰吸是救治成功的关键.