2型常染色体显性遗传性多囊肾病致病基因突变研究

目的建立检测2型常染色体显性遗传性多囊肾病致病基因PKD2突变的方法,分析中国汉族人PKD2基因的突变。方法收集临床确诊的中国汉族人常染色体显性遗传性多囊肾病(ADPKD)患者48例,用试剂盒提取外周血白细胞DNA,利用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术进行突变分析,对异常条带的PCR产物进行核苷酸序列测定,明确突变位点和方式。结果从48例中成功检测到4种突变,包括1种无义突变、1种移码突变、2种错义突变。第1种为外显子5的1249C→T,417位编码氨基酸发生无义突变。第2种为外显子13的第2401位碱基A缺失,造成编码氨基酸移码突变。第3种突变为外显子1的568G→A,编码氨基酸改变为190Ala→Thr;第4种为外显子5的1168G→A,编码氨基酸改变为390Gly→Ser。结论PCR-SSCP技术可用于PKD2的直接基因诊断,并从本组患者中检测到4种突变,丰富了PKD2基因突变谱,为今后开展ADPKD的直接基因诊断、产前诊断和囊肿前诊断提供了一种有用方法。     

5-aza-CdR对肝癌SMMC7721细胞株PDCD4基因甲基化及表达的影响

目的 研究5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-CdR)在肝癌细胞株SMMC7721中对程序性细胞死亡因子4(PDCD4)表达的影响及可能机制.方法 培养肝癌细胞株SMMC7721,用5-aza-CdR处理肝癌细胞株SMMC7721,Western-blotting检测DNMT3b、PDCD4蛋白在处理前后的变化,甲基化特异性PCR即MSP检测PDCD4基因启动子区域甲基化水平.结果 1×10~(-6)mol/L、5×10~(-6)mol/L的5-aza-CdR作用于SMMC7721细胞后,DNMT3b表达水平降低,而PDCD4表达水平升高,且浓度之间有差异;MSP示药物处理前PDCD4启动子区域处于高甲基化水平,在用5×10~(-6)mol/L药物处理后,其启动子发生了去甲基化.结论 5-aza-CdR可以抑制DNMT3b在SMMC7721中的表达,且可能通过改变抑癌基因PDCD4启动子甲基化状态影响PDCD4表达.     

罗格列酮对多囊肾囊肿衬里上皮细胞p38促分裂原活化蛋白激酶信号通路的影响

Objective To investigate the effect of rosiglitazone on p38 mitogen-activated protein kinase (p38MAPK) pathway in polycystic kidney cyst-lining epithelial cells. Methods The cyst-lining epithelial cells (PKD cells) from human polycystic kidney were treated with rosiglitazone (10 μmol/L), peroxisome proliferator-activated receptor-γ (PPARγ) inhibitor GW9662 (10 μmol/L), rosiglitazone (10 μmol/L) +GW9662 (10 μmol/L), p38MAPK specific inhibitor SB203580 (10 μmol/L), SB203580 (10 μmol/L)+ rosiglitazone(10 μmol/L) for 2 hours followed by epidermal growth factor (EGF) stimulation. Protein expressions of p38, phuspho-p38 (p-p38) and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) were detected by Western blot. p38 mRNA was examined by RT-PCR. Expression of c-fos and c-jun was observed by immunocytochemistry. Results (1) EGF markedly up-regulated the expressions of p38, p-p38, PCNA, c-fos anti c-jun compared with control group (P<0.01). (2) Compared with EGF treated group, rosiglitazone significantly reduced p38 activation and mRNA expression (P<0.01, respectively). Rosiglitazone, rosiglitazone+SB203580 could significantly down-regulated p-p38, PCNA, c-fos and c-jun expression (P<0.01, respectively) with no significant difference between these two groups. (3) GW9662 partially reversed the reduction effect of rosiglitazone. Conclusions Rosiglitazone can inhibit proliferation of autosomal dominant polycystic kidney disease cyst-lining epithelial cells partially through down-regulating p38 activation and reducing c-fos, c-jun and PCNA expression. The above effect of rosiglitazone is in part PPARγ-independcnt.     

欧洲五维健康量表评估老年髋部骨折术后生活质量变化的研究

目的探讨欧洲五维健康量表(EQ-5D)评价老年人髋部骨折术后患者生存质量变化及可行性。方法前瞻性选择老年髋部骨折手术患者97例,于术后6个月采用EQ-5D量表对患者进行生活质量评估,并与伤前生活质量进行比较。结果 EQ-5D量表中五个维度及直观式健康量表共六项观察指标两次测量分值相关系数分别为0.892、0.793、0.921、0.886、0.748、0.972。EQ-5D量表中五个维度Cronbach’sα系数分别为0.739、0.821、0.912、0.863、0.740;内容效度为0.972。老年髋部骨折术后6个月EQ-5D指数出现明显降低(P<0.05);根据各变量进行组间比较,发现除年龄65~75岁外,其余组EQ-5D指数均出现明显降低(P<0.05)。结论 EQ-5D量表老年髋部骨折患者术后生存质量信度及效度均较好;老年髋部骨折患者术后6个月其生存质量明显降低,可能与高龄、术前合并并存症数量、骨折及内固定方式、住院期间并发症情况、出院后居住环境和护理条件及术后下地活动时间有关。     

重型颅脑外伤侧裂区损伤并大面积脑梗死40例临床探析

探究重型颅脑外伤侧裂区损伤并大面积脑梗死的预防措施与治疗方法。选取收治的40例重型颅脑外伤侧裂区损伤并大面积脑梗死患者进行调查研究。随机平均分调查组和对照组,每组20例,调查组对患者采用手术治疗而对照组采用保守治疗即药物治疗,观察两组治疗效果。对40例重型颅脑外伤侧裂区损伤并大面积脑梗死患者进行4个月的跟踪,统计其治疗及预后情况,调查组预后良好9例,中残5例,重残3例,植物生存0例,死亡3例,存活率达77.50%。而对照组预后良好4例,中残2例,重残2例,植物生存1例,死亡11例。重型颅脑外伤侧裂区损伤并大面积脑梗死进行手术治疗比传统保守治疗更加有利于患者摆脱生命危险,并能提高治疗效果,提高患者生活质量,具有积极临床价值。     

微创手术治疗脑出血破入脑室40例临床分析

目的 探讨自发性脑出血破入脑室患者的治疗方法和效果。方法 采用单纯血肿穿刺引流、单纯一侧或双侧侧脑室穿刺引流、血肿穿刺加侧脑室穿刺引流治疗40例脑出血破入脑室患者，术后用尿激酶及腰椎穿刺释放脑脊液。结果 显著进步65％（26／40），进步14％（6／40），无变化5％（2／40），死亡15％（6／40）．总有效率80％（32／40）。结论 微创钻颅血肿穿刺、脑室穿刺溶血引流结合腰椎穿刺释放脑脊液治疗脑出血破入脑室的方法简单、实用、疗效确切。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ在Han:SPRD大鼠肾脏中的表达分布及其意义

目的观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)在HanSPRD大鼠不同表现型中的表达分布,探讨PPAR-γ途径在常染色体显性多囊肾病(ADPKD)发病中的作用及机制.方法采用免疫组化方法研究PPAR-γ的表达分布,RT-PCR方法检测各表现型中不同性别不同时期肾脏皮质组织PPAR-γ及TGF-β1、MCP-1的mRNA表达情况,组织学分析并量化囊肿指数(cyst index)、纤维化评分(fibrosis score)及间质炎细胞浸润程度.结果HanSPRD纯合子及杂合子大鼠PPAR-γ在肾皮质近端小管及囊肿上皮细胞中表达明显增高,在近端小管上皮细胞中主要分布于胞浆,而在囊肿上皮细胞则易位于核周及细胞核.纯合子(Cy/Cy)及杂合子(Cy/+)较正常大鼠(+/+)PPAR-γ及TGF-β1、MCP-1mRNA表达上调,同时雄性杂合子表达水平高于同周龄雌性杂合子(P＜0.05).雄性杂合子组织学指标囊肿指数、肾脏纤维化评分及间质炎细胞浸润程度高于雌性杂合子(P＜0.05).结论 PPAR-γ在该模型中表达上调与TGF-β1、MCP-1表达水平及肾脏组织学改变显著相关,PPAR-γ激活可能对于ADPKD病程进展有一定保护作用.     

结肠癌致急性肠梗阻41例治疗体会

本院自 1990～ 2 0 0 0年 4月间手术治疗结肠癌性肠梗阻病人 4 1例 ,现将治疗结果和体会报道如下。1　临床资料1.1　一般资料　本组病例男 2 3例 ,女 18例 ,平均年龄 5 6(32～ 83)岁 ,5 0岁以上 2 8例 ,30岁以下 2例。平均病程 3.5 (4ｈ～ 6ｄ)ｄ。全组病例均有腹胀、腹痛 ,大便习惯改变或便血史 ;肛门停止排气 ,排便 2 9例 ;弥漫性腹膜炎 2例 ,贫血 6例。1.2　围手术期处理及术式　全部病人入院后均给予积极的非手术治疗 ,包括胃肠减压 ,输液 ,纠正水电解质及酸碱失衡 ;同时使用抗生素 ,氨基甙类或头孢类 +0 .5 %甲硝唑静脉给药。经治疗 2…     

院校门诊部院前急救体系建设与管理的思考

院校门诊部除承担学校教职员工及学员的预防、医疗、保健、康复和心理等工作外,还担任着突发性危重患者的院前急救工作。创建院前急救体系,对满足学校教职员工与学员急救医疗需求,做好以教学为中心的卫勤保障工作有重要作用。1创建院前急救体系的必要性1.1创建院前急救体系是新形势下院校工作的内在需求     

syndecan-4对碱性成纤维细胞生长因子诱导人肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质分泌的影响

目的 研究syndecan-4对碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）诱导人肾小球系膜细胞(HMC)增殖及细胞外基质（ECM）分泌的影响,并探讨syndecan-4-蛋白激酶Cα（PKCα）途径在其中的作用。 方法 免疫荧光方法观察syndecan-4在HMC上的表达。筛选有效的syndecan-4-siRNA转染HMC,噻唑蓝（MTT）比色法检测HMC在bFGF不同作用时间下的增殖差异;ELISA法检测细胞上清液中的Ⅰ、Ⅳ型胶原和纤连蛋白（FN）含量;荧光定量PCR观察syndecan-4和PKCα含量的变化。 结果　syndecan-4蛋白在HMC有表达。bFGF可促进HMC的增殖及FN、Ⅳ型胶原的分泌,使得每百万看家基因中PKCα拷贝数明显增加。转染syndecan-4 siRNA后,显著降低了HMC的增殖速度（48~60 h时点,P < 0.01）、ECM分泌（FN：24 h时点,P < 0.01,48~96 h,P < 0.05;Ⅳ型胶原：72~96 h时点,P < 0.05）及PKCα含量 （0 h时点,P < 0.05,12 ~48 h时点,P < 0.01）。 结论 syndecan-4参与调控bFGF诱导HMC的增殖及ECM分泌过程。syndecan-4-PKCα途径可能在其中扮演重要作用。