肝癌组织中livin基因表达及与乙型肝炎病毒X蛋白的关系研究

目的 探讨livin基因在肝癌组织中的表达及乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus Xprotein,HBx)对其表达的影响.方法 采用免疫组化染色法检测10例正常肝组织和30例肝癌组织中livin基因的表达.建立稳定转染HBx基因的L02(L02-X)细胞系,采用Real-time PCR和Western blot检测L02-X)细胞系转染HBx基因前后livin基因表达的变化.结果 Livin基因在肝癌组织的表达明显高于正常肝组织,且livin基因的表达与肝癌的大小、病理分级无明显相关性(t=1.688,P=0.103;γ=-0.137,P=0.471;P＞0.05),与门静脉癌栓有关(t=2.24,P=0.033;P＜0.05).转染HBx基因后livin基因mRNA表达水平上调(t=6.73,P＜0.05).结论 livin基因高表达引起的凋亡抑制可能在肝癌的发生、发展中起重要作用,HBx基因可以在转录水平上调其表达.     

乙型肝炎病毒X蛋白对血管内皮生长因子的调节通路研究

目的 研究NF-kB信号转导通路在乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)调节血管内皮生长因子(VEGF)表达中的作用.方法 建立稳定转染HBx基因的L02细胞系(L02-HBx),用不同浓度的NF-kB信号转导通路阻断剂吡咯二硫氢基甲醋酯(PDTC)阻断NF-kB信号转导通路,荧光双标激光扫描共聚焦显微镜观察转染前后及PDTC加入前后NF-kB信号转导通路的激活及失活情况,同时用实时荧光定量PCR和Western blot技术检测转染前后及PDTC加入前后VEGF在mRNA及蛋白水平的表达变化.结果 以L02细胞为参照,转染HBx基因后的L02-HBx细胞NF-kB信号转导通路被激活,VEGF mRNA和蛋白水平分别增加(4.07±0.31)和(4.34±0.64)倍,差异有统计学意义(P<0.05);加入25.0和50.0μmol/L的PDTC作用24 h后,L02-HBx细胞NF-kB信号转导通路被阻断,VEGF mRNA表达水平分别增加(2.33±0.22)和(1.86±0.18)倍;VEGF蛋白表达水平分别增加(2.52±0.29)和(2.17±0.34)倍,与未加入PDTC的L02-HBx细胞的差异有统计学意义(P<0.05).12.5μmol/L PDTC作用24 h后,VEGF mRNA和蛋白水平的变化无统计学意义(P>0.05).结论 NF-kB信号转导通路是HBx上调VEGF表达、促进肝癌血管生成的途径之一.     

腹腔镜肝癌根治术的热点与未来发展

随着腹腔镜肝切除技术的发展与推广,腹腔镜肝切除中的一些难点,如术中出血的控制、解剖性肝切除、巨大肝癌切除、腹腔镜下联合肝脏分割与门静脉支结扎的二步肝切除术(ALPPS)等方面均基本解决。术中超声与荧光染色技术也得到普及。本文就上述问题做一概述,并对腹腔镜肝切除未来发展提出思路,以进一步推动我国腹腔镜肝切除的技术进步。     

入肝血流联合肝下下腔静脉阻断在腹腔镜肝切除术中的应用

目的评价入肝血流联合肝下下腔静脉阻断在腹腔镜肝切除中的安全性及疗效。方法回顾性分析2015年1月至2015年12月由同一医疗组开展的腹腔镜下肝切除51例,其中入肝血流联合肝下下腔静脉阻断(联合阻断组)32例,入肝血流阻断(Pringle组)19例。记录术中阻断时间、出血量、血流动力学改变、术后肝功能、肾功能变化,及并发症的发生率。结果联合阻断组入肝血流平均阻断时间17 min,肝下下腔静脉阻断时间12 min。Pringle组平均阻断时间23 min。联合阻断组术中出血量平均(370.1±107.9)ml,1例病人输血,显著低于Pringle组(560.3±191.3)ml,术中输血3例。联合阻断组无手术中转开腹,Pringle组中转开腹1例。阻断肝下下腔静脉,病人平均动脉压由阻断前的(92.3±4.7)mmHg下降至(71.3±4.6)mmHg,心率则由阻断前的(73.9±6.9)次/min增快至(93.5±10.7)次/min。松开阻断带后,在无明显出血情况下,平均动脉压和心率可自行恢复至阻断前水平。两组肝功能和肾功能恢复无明显差异,总体并发症无明显差异。结论腹腔镜下入肝血流联合肝下下腔静脉阻断安全有效,并能减少术中出血量及中转率。     

联合断流术治疗食管胃底静脉出血51例分析

目的探讨联合断流术治疗门静脉高压症并食管胃底静脉曲张的效果。方法对2005年1月至2013年6月间采用择期联合断流术的51例肝硬化门静脉高压症临床资料进行回顾性分析。结果所有患者均无手术死亡。平均手术时间为（3．6±0．8）h,输血量为（547±120）ml,术后平均住院天数为（10．3±3．2）d。胸腔积液6例（11．8％）,腹水7例（13．7N）,门静脉血栓12例（23．5％）,均无吻合口瘘和吻合口狭窄。肝性脑病0例,再出血率3．9％（2／51）。术后6个月随访,食管胃底曲张静脉消失35例（68．6％）,显著改善15例（29．4％）,无明显变化者1例（2．O％）。结论联合断流术可以有效治疗食管胃底静脉曲张,并发症少,再出血率低,是一种值得推广的治疗门静脉高压症的手术方式。     

TRAIL的抗肝细胞癌作用研究

目的 探讨TRAIL对HCC的治疗作用。方法 用不同浓度TRAIL处理肝癌细胞株HepG2、SMMC7721，观察经药物处理前后肿瘤细胞的凋亡发生率。采用分子克隆技术构建了真核表达质粒pIRES-EGFP-TRAIL，转染肝癌细胞株HepG2、SMMC7721细胞，观察其疗效。体内实验建立裸鼠肝癌模型，观察TRAn。的抑癌作用。结果TRAR，(100ng／m1)处理24h，肝癌细胞凋亡发生率约10％，而Jurkat细胞凋亡率达70％以上，胆管癌细胞QBC939凋亡发生率约50％。真核表达质粒TRAIL体外转染肝癌细胞后对肝癌细胞的生长无显著性的抑制作用。体内直接瘤体注射pIRES-EGFP-TRAIL可有效的导入TRAIL基因并获得高表达，但对裸鼠肝癌无明显抑制作用。结论 肝细胞癌对TRAIL诱导的凋亡有耐药现象，提示HCC中存在抑制TRAIL诱导凋亡的因素，单一的TRAIL疗HCC疗效有限。     

KLF6mRNA Expression in Primary Hepatocellular Carcinoma

Hepatocellularcarcinoma(HCC)isoneofthethreeleadingcausesofcancerdeathsworldwide.Itsprogressionisbelievedtoresultfromtheaccumulationofgeneticalterationsatnumerouslocicontrollinggrowthandproliferation.Asamodelforbothmultistepandmultipathwaycarcinogenesis,he…     

凋亡抑制蛋白Survivin在肝癌中的表达及其与临床特征的关系

Survivin是近年发现的凋亡抑制蛋白家族 (IAPs)中的一个成员 ,主要通过抑制caspase级联反应下游共同通路的caspase 3 ,7发挥其抗凋亡作用[1,2 ] 。Survivin在多种肿瘤组织中均有表达 ,我们采用免疫组织化学技术检测Survivin在肝癌和肝硬化组织中的表达 ,并探讨其表达与临床特征的关系。一、材料和方法1.标本来源 :收集武汉同济院肝脏外科中心 1999年 6月～ 2 0 0 0年 6月手术切除肝癌标本 3 8例 ,癌旁组织 2 7例 ,术前均未行放疗及化疗 ,其中男 3 3例 ,女 5例 ,平均年龄 47.3岁 ,门静脉高压性肝硬化 10例 ,所有标本均经病理证实。其中高…     

动态分析老年重症乙肝患者乙肝病毒全基因组及其表达蛋白抗原性变化

目的 动态分析1例老年重症乙型肝炎患者全基因组序列变化，在全基因组水平上阐述HBV基因组变异对其不同基因生物学特性的影响。方法 一次扩增全长乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)DNA基因组，测序鉴定，建立HBV全基因组克隆、转染表达。结果 通过测序鉴定、同源性比较和真核细胞转染分析，显示HBV基因组序列变异集中在S基因，其表达蛋白前后有抗原性变化。结论 S基因变异可以导致S蛋白抗原性变化，打破宿主体内免疫耐受，诱发重症肝炎的发生。