PSI诱导PC12细胞的PD模型中分子伴侣家族的氧化修饰

目的 鉴定蛋白酶体抑制剂(PSI)处理的PC12细胞帕金森病(PD)模型中发生氧化修饰的蛋白质;从蛋白质水平探讨PD的发病机制.方法 本实验分为对照组和实验组.PC12细胞孵育24h后,实验组加入终浓度10 μmol/L的PSI(以DMSO溶解),对照组加入DMSO,继续孵育24h后进行研究.MTT法检测细胞存活率;吖啶橙(AO)和溴化乙啶(EB)染色检测凋亡细胞;HE染色观察细胞内包含体的形成.采用2D凝胶电泳、质谱鉴定与Western blot技术相结合的方法在PD细胞模型中筛选氧化修饰的蛋白质.结果 在实验组中,MTT法检测显示细胞存活率降至85.46%±1.75%(对照组设为100%),差异有统计学意义(P<0.05);AO和EB染色显示早期凋亡细胞,凋亡百分率为12.41%±3.61%(P<0.05);HE染色可见胞浆内嗜酸性包含体的形成.经2D Evolution软件对Western blot图像及考染的制备胶图像进行分析和统计学处理,与对照组比较实验组有统计学意义的氧化水平显著升高的蛋白点有40个,其中13个蛋白点被质谱鉴定出来,其中3个蛋白点为分子伴侣家族成员:含TCPI的伴侣素亚单位3、葡萄糖调节蛋白58及热休克蛋白700结论首次在PD细胞模型中发现分子伴侣家族蛋白的氧化修饰,为PD发病机制的研究提供了新的线索.     

海人酸颞叶癫痫大鼠海马组织中细胞骨架蛋白的差异表达

目的 研究海人酸颞叶癫痫大鼠海马组织中差异表达的细胞骨架蛋白,为阐明癫痫的发病机制提供线索,为新型抗癫痫药物的研发提供分子靶点.方法 利用双向荧光差异凝胶电泳(2D-DIGE)、DeCyder分析软件、基质辅助激光解吸附电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)对海人酸诱导颞叶癫痫大鼠海马组织中的差异蛋白进行分离、分析及鉴定.结果 有5个差异蛋白点被鉴定为3种细胞骨架蛋白,其中微管蛋白α-1B和胶质纤维酸性蛋白表达上调,埃兹蛋白表达下调.结论 细胞骨架蛋白表达变化导致的细胞骨架受损可能与癫痫的发生发展相关,可能成为抗癫痫治疗新靶点.     

手法辅以中药热敷治疗斜方肌筋膜疼痛综合征

斜方肌筋膜疼痛综合征是临床常见病,患者因损伤的斜方肌筋膜局部粘连挛缩而引起长期疼痛和颈肌僵硬,迁延不愈[1].目前,治疗本病的常见的方法包括封闭、膏药外敷、湿针针刺、小针刀等[2-5],疗效不一.作者采用手法辅以中药热敷治疗本病,以观察综合康复疗法的治疗效果.现报告如下.     

终末期肾病患者血管平滑肌细胞凋亡情况及其影响因素分析

目的：观察终末期肾病（ESRD）患者血管平滑肌细胞（VSMC）凋亡情况及其影响因素.方法：在ESRD患者行动静脉内瘘手术时留取桡动脉0.5～1 cm,共43例.年龄相匹配的因外周血管疾病行血管手术4例患者的动脉作为对照,对照组肾功能正常.采用DNA片段原位缺口末端标记技术（TUNEL法）检测上述二组动脉血管平滑肌细胞凋亡情况,结果用凋亡指数表示.临床指标包括血钙、血磷、钙磷乘积、全段甲状旁腺素（iPTH）、血浆白蛋白（Alb）、血红蛋白（Hb）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、C-反应蛋白（CRP）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）.采用Pearson相关分析计算凋亡指数与上述临床指标的相关性.结果：ESRD患者的动脉中膜可见到明显的VSMC凋亡,而在对照组血管中膜,只见到极少量凋亡的VSMC.ESRD患者的VSMC凋亡指数与临床指标中的血磷、钙磷乘积、LDL水平呈显著正相关（P＜0.05）.结论：ESRD患者动脉存在明显的VSMC凋亡;血磷、钙磷乘积和LDL升高可能是VSMC凋亡的促进因素.     

肾穿刺活检石蜡组织切片DNA的提取和PCR扩增

目的建立从肾穿刺活检石蜡组织切片提取DNA并进行PCR扩增的方法。方法肾脏病理诊断为乙肝病毒相关性肾小球肾炎、原发性IgA肾病和膜性肾病各2例的肾活检组织蜡块，包埋时间1个月-5年。提取方法包括清洁切片、融蜡、消化及DNA的提取。紫外分光光度计测定DNA浓度。应用聚合酶链反应（PCR）扩增血管紧张素转换酶（ACE）和乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg）基因片段。结果2张2Ixm厚石蜡切片获取的DNA总量为10-30μg。ACE基因的PCR扩增结果显示，6例标本均在490bp和（或）190bp处显示清晰条带。HBcAg的PCR扩增结果显示，2例乙肝病毒相关性肾小球肾炎标本在132bp处显示清晰条带，其余4例阴性。结论本方法可以从肾穿刺活检石蜡切片中获取足够高质量DNA并进行PCR扩增，方法简便，结果稳定，不受包埋时间长短的限制，为肾脏疾病的辅助诊断、肾活检组织的大宗遗传学分析提供了可能。     

12例Ramsay Hunt综合征特点分析

<正>Ramsay Hunt综合征(Ramsay Hunt syndrome,RHS)是潜伏在膝状神经节的水痘带状疱疹病毒(varicella zoster virus,VZV)感染引起的一组特殊症状,典型表现为急性面瘫、耳部疱疹、耳痛,可伴听力下降、持续性眩晕、耳鸣、眼球震颤、头痛等症状^[1-2],是一种特殊类型的带状疱疹(herpeszoster,HZ),是继发性面神经麻痹的常见原因之一。为了深入了解RHS临床特点,探讨其脑脊液检查及面神经增强扫描等辅助检查在本病中的应用价值,本文拟对西安市第三医院2017年2月至2019年6月收治的12例确诊RHS患者的临床资料特点进行分析总结。     

锁定营养 体现点餐智慧

我们是一群容易喜新厌旧的人，可对食物的痴情却是一生一世，爱吃的东西多少年都不会变，只是，吮指回味之余，你真会在意它的营养成分吗？     

氨气吸入致呼吸道梗阻死亡二例

例1 女,26岁。因制冷设备爆炸氨溢漏致伤,于伤后3天入院。查体表无烧伤,但曾在密闭条件下吸入氨气,时间为5秒左右。病人呼吸道分泌物较多且粘稠,鼻咽部粘膜充血,心肺(-),RBC 4.2×10~(12)/L,WBC 6.7×10~9/L,PaO_2 9.45 kPa (1kPa=7.5mmHg),PaCO_2 5.9 kPa。病人于入院后第2天因呼吸道粘膜脱落、出血,引起呼吸道梗阻而死亡。例2 女,36岁。因储氨罐爆炸致伤,伤后11h入院,有密闭条件下高浓度氨气吸入史,吸入时间6秒左     

葛根素对大鼠全脑缺血再灌注后学习记忆障碍保护作用及其机制的研究

目的 探讨葛根素对大鼠全脑缺血再灌注后学习记忆能力的影响及其机制。方法 采用四血管阻断法建立SD大鼠全脑缺血再灌注损伤模型，暗回避反应法测定学习记忆能力，并应用免疫组织化学法、原位末端标记法，检测大鼠全脑缺血再灌注海马CA，区的bcl-2阳性细胞数、凋亡细胞数的动态变化。结果 (1)与再灌注组相比，葛根素组大鼠潜伏期明显延长；(2)脑缺血再灌注后，海马CA1区bcl-2蛋白的表达随再灌注时间不同而变化，缺血20min后再灌注24h达高峰，葛根素组bcl2蛋白的表达于相应的时间点明显增多；(3)脑缺血再灌注后海马CA1区神经元凋亡损伤在再灌注72h损伤最重，葛根素组可减少相应时点神经细胞凋亡数。结论 葛根素对全脑缺血再灌注后大鼠学习记忆能力具有明显的改善作用，其作用机制可能与通过上调bcl-2基因表达从而抑制或延迟脑缺血再灌注后细胞凋亡有关。     

姜黄素与甘草次酸联用对肝癌HepG-2细胞增殖的抑制作用

目的 研究姜黄素与甘草次酸单独、联合用药对肝癌细胞HepG-2增殖的抑制作用,探讨姜黄与甘草配伍的合理性和科学性。方法 不同浓度姜黄素（10.00、5.00、2.50、1.25 μg/mL）、甘草次酸（20.0、10.0、5.0、2.5 μg/mL）及两者对应浓度联合应用处理肝癌HepG-2细胞不同时间后（8、16、24 h）,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率;姜黄素5 μg/mL、甘草次酸10 μg/mL及两者联合应用处理HepG-2细胞24 h后,用流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期变化情况。结果 姜黄素、甘草次酸及联合用药对HepG-2细胞增殖均具有抑制作用,呈剂量相关性和时间相关性,且两药联合呈现相加或增强的作用;姜黄素、甘草次酸均能诱导HepG-2细胞凋亡,联合用药后诱导凋亡作用更强;姜黄素、甘草次酸及联合用药对HepG-2细胞均具有G2期阻滞作用。结论 联合用药具有比单用姜黄素或甘草次酸更强的抑制HepG-2细胞增殖、诱导细胞凋亡作用,姜黄与甘草配伍具有合理性和科学性。