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大鼠FasL+Sertoli细胞的分离与鉴定 总被引:2,自引:1,他引:1
为了将睾丸Sertoli细胞应用于细胞治疗,应用胶原酶、胰蛋白酶及脱氧核糖核酸酶消化制备睾丸Sertoli细胞,并对其做生活观察、透射电镜检查,了解其功能状态。SABC法标记Fas配体和卵泡刺激素受体的表达情况,对睾丸Sertoli细胞加以鉴定。培养的睾丸Sertoli细胞,形态完整,细胞器和细胞核保持良好,有丰富的线粒体、内质网、高尔基复合体和溶酶体,功能状态良好。且高度表达Fas配体和卵泡刺激素受体,出现优势生长现象。Fas配体阳性的睾丸Sertoli细胞可以作为联合移植的供体,发挥其免疫赦免作用。 相似文献
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新生儿胎粪性肠梗阻是全身粘液分泌腺萎缩为特点的囊性纤维性变在消化系统的局部表现 ,又称“粘滞病”。新生儿粘滞病比较少见 ,死亡率极高。我院自 1988~ 1999年共收治 9例 ,现报告如下。1 资料与方法1 1 一般资料 本组 9例。男 5例 ,女 4例。年龄出生 1~ 6d ,平均 2d。体重 2 0 0 0~ 3 5 0 0g,平均 2 5 0 0g。1 2 临床表现 患儿生后 1~ 2d内即开始呕吐 ,进行性加重 ,呕吐物中含有胆汁。腹部膨隆 ,右下腹可扪及结实的块状物 ,无胎粪排出。直肠指诊可触及粪块。1 3 手术方法 术前纠正脱水、酸中毒 ,补液 ,禁食 ,置胃肠减压… 相似文献
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目的 探讨大型哺乳动物胰岛机械化大量分离、纯化的方法,为人类胰岛移植物的大量制备摸索创造条件.方法 应用改进的机械化胰岛分离、纯化系统,用HCA和UW液顺序原位灌洗犬胰腺,主副胰管插管,4℃胶原酶-V(1.5 g/L)+胰酶抑制剂pefabloc(0.4 mmol/L)灌注后,Ricordi-Chamber消化罐消化,4℃COBE2991连续密度梯度离心纯化,测定胰岛当量(IEQ)、胰岛纯度及存活率、胰岛素及C-肽的释放量、培养24 h后光镜及电镜观察.结果 胰腺消化时间为(25.0±6.0)min,胰岛外分泌腺包裹率为(9.4±2.4)%,消化后胰岛收获量为(17.2±3.6)×104IEQ/每个胰腺,纯化后胰岛收获量为(8.3±2.0)×104IEQ/每个胰腺,胰岛纯度为(89.7±3.5)%.纯化胰岛体外低糖与高糖刺激下胰岛索分泌量及C-肽的释放量良好,培养24 h后形态结构及功能正常.结论 本实验室改进的胰岛机械分离方法及各设备运行可靠,获得的胰岛形态功能良好,可望用于临床人类胰岛的大量制备. 相似文献
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目的探讨Lumican基因的表达与结直肠癌发生、发展之间的关系。方法应用RT- PCR方法检测49例结直肠癌组织及其癌旁正常黏膜上皮组织内Lumican mRNA的表达水平,并进行统计学分析。结果RT-PCR结果表明结直肠癌组织中Lumican mRNA均呈阳性表达,癌旁正常黏膜上皮组织内Lumican mRNA的表达显著低于癌组织(P<0.01)。Lumican mRNA的表达水平与患者的性别、年龄、组织病理分型、淋巴结转移及Dukes分期无关。结论结直肠癌组织中Lumican mRNA的表达增强提示Lumican mRNA在结直肠癌组织中的高表达对结直肠癌的发生发展可能起重要作用。 相似文献
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先天性胆管囊肿内引流术后胆管癌:附25例报告 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 探讨先天性胆管囊肿内引流术后癌变及其手术处理原则。方法 对1970~1996年间收治的先天性胆管囊肿行内引流术的82例患者进行随访,并对其中术后25例癌变患者的临床资料进行分析。结果 本组先天性胆管囊肿内引流术后癌变率为30.49%(25/82),其中囊肿十二指肠吻合术后癌变率为35.29%(14/51),囊肿空肠Roux—en—Y吻合术后癌变率为22.58%(1l/31)。25例中3例行胰十二指肠切除术,4例行肿瘤切除胆道重建术,4例行局部病灶切除外引流术,14例肿瘤广泛转移无法切除仅行外引流术。结论 囊肿内引流术后癌变率高,应该摒弃该术式。 相似文献
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目的 探讨胰岛冻存前后经高压氧细胞旋转培养系统(HORCCS)培养后移植入糖尿病大鼠能否提高胰岛移植的效果.方法 将分离纯化的大鼠胰岛分为:A.体外实验组:将各组大鼠胰岛经HORCCS培养或普通培养30 d,检测细胞内DNA和胰岛素含量,胰岛存活率,胰岛素分泌水平.B.胰岛移植实验组:将各组大鼠胰岛经HORCCS培养或普通培养7d,然后移植,观察移植受体血糖和胰岛素水平.电镜观察各胰岛移植实验组中培养7 d时的胰岛的超微结构改变.结果 经高压氧 RCCS培养14 d的胰岛存活率及胰岛素分泌水平高于普通培养组(P<0.05).移植了经HORCCS培养的胰岛后,受体血糖在移植后2周即恢复为正常值,并维持到移植后10周.全部受体维持正常血糖耐受曲线.电镜下可见经HORCCS培养后,冻存复苏胰岛表面形成微小的孔道.结论 胰岛冻存前后经高压氧RCCS培养后可以建立营养输送管道,不但有利于氧和营养物质的运输,更有利于胰岛内细胞的均匀一致的冻存,从而减少冻存对胰岛的损害,提高胰岛的分泌活性和成活率. 相似文献
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目的通过机械分离胰腺的方法,提高成人胰岛数量和质量。方法切取8个成人尸体胰腺,并保存于4℃UW液中。首先经主胰管插管灌注复合胶原酶溶液,使胰腺膨胀,然后将胰腺剪切成5~8块,放入Ricordi室中,于37℃下机械震荡消化。收集的胰岛溶于100mlUW液中,放置30min。先将Ficoll液泵入COBE2991细胞分离仪中,然后泵入UW/胰岛制剂,最后加入M199液冲洗。收集纯化的胰岛,计算胰岛当量(IEQ)和纯度,检测胰岛的活性。结果热缺血时间为0~1min,冷缺血时间0.5~4h。纯化前收集的胰岛数量平均为(376.7±50.2)×103IEQ,纯化后为(378.6±56.7)×103IEQ;胰岛收获率平均为(86.8±9.4)%,镶嵌的胰岛平均占(11.0±2.7)%;收获的胰岛纯度平均为(88.3±5.1)%;经AO-PI染色后检测胰岛的活度为(91.3±7.8)%。胰岛素分泌指数平均为5.87±0.81。结论通过机械分离胰腺的方法,可以获得更多的胰岛数量和更高的胰岛活性,适合用于临床移植。 相似文献
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