基因芯片和组织芯片在前列腺癌基因诊断中的应用

前列腺癌是老年人疾病 ,占美国男性主要死亡原因第二位 ,近年来国人前列腺癌发病率有明显上升趋势[1] 。临床上亟待一种敏感的技术对前列腺癌早期诊断、治疗、演进趋势及预后进行评价 ,增加对前列腺癌本质的认识。新近发展的高通量基因表达分析平台———基因芯片及组织芯片技术 ,具有多样品并行处理能力 ,分析速度快 ,所需样品量少 ,污染少 ,现已用于前列腺癌的基因诊断、基因表达及寻找新基因等研究领域。我们对基因芯片和组织芯片技术在前列腺癌基因诊断研究方面的初步应用简要综述如下。一、基因芯片、组织芯片技术及其原理基因芯片 (ｇ…     

γ射线防治尿道狭窄与诱导成纤维细胞凋亡的关系

1998年 ,孙颖浩等[1] 采用尿道狭窄内切开或瘢痕电切术后尿道内γ射线放疗 (总剂量 10～ 15Gy)防治复发性尿道狭窄 ,疗效满意。为探讨γ射线在临床应用剂量范围内防治尿道狭窄的作用机制 ,我们研究了γ射线体外照射对尿道瘢痕成纤维细胞的杀伤效应。一、材料和方法1.成纤维细胞培养 :取手术切除的尿道增生性瘢痕组织 ,采用组织块贴壁法原代培养[2 ] 。细胞生长成片后传代培养。2 .实验分组 :取 8～ 10代指数生长期细胞进行实验。照射前 2 4h ,以红细胞计数法计数细胞 ,按 3× 10 6个 /瓶接种到 75ml培养瓶中。随机将各瓶细胞设置为未照射组…     

裸鼠前列腺原位移植PC3肿瘤模型的建立

建立理想的动物模型是阐明前列腺癌的发病机制、肿瘤与宿主的关系、癌侵袭与转移的过程和治疗措施有效性的实验基础。为此,我们以有关研究为参考[1],将PC3细胞在免疫缺陷小鼠背部皮下形成肿瘤,进而采用外科原位移植技术将肿瘤组织块种植于裸鼠的前列腺背侧叶,建成前列腺原位肿瘤模型,旨在为进行前列腺癌的研究提供有用的工具。一、材料与方法1.材料:4～6周龄雄性BALB/C裸小鼠30只,20～22g,SPF级,由中科院上海实验动物中心提供。10只用于背部皮下种植,20只用于前列腺原位种植。人前列腺癌PC3细胞株,长海医院中心实验室冻存。2.皮下种植:…     

人前列腺干细胞抗原在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备

目的:克隆并在大肠杆菌中表达人前列腺干细胞抗原(PSCA)基因,制备其抗血清.方法:通过PCR方法扩增包含蛋白融合点的PSCA基因片段,经DNA测序证实后克隆至带有Trx.6His标签的原核表达载体pET32a,重组质粒转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达结果,经Ni-NTA树脂亲和纯化的蛋白皮下注射免疫小鼠,ELISA检测抗血清的滴度,免疫组化鉴定其特异性.结果:PCR扩增得到241 bp的目的片段,序列测定证实与GenBank上登录的序列一致;成功构建了PSCA基因片段的原核表达载体pET32a-PSCA;在大肠杆菌中表达,于相对分子质量为20.4×103处有一蛋白新生带;PSCA融合蛋白免疫小鼠后,ELISA确认抗血清的滴度>1∶4 000.抗血清检测到前列腺癌组织中PSCA的表达. 结论:成功克隆、表达了人PSCA融合基因片段,并制备了相应的抗血清.     

肾上腺原始神经外胚层瘤一例报告

患者,男,41岁.因反复右腰腹部隐痛不适1年,加重1个月于2010年11月10日入院.查体:右侧腹部可扪及大小约15 cm×10 cm包块,无压痛,活动度差;肾区无叩击痛.B超检查:右侧肝肾间隙处见14.3 cm ×9.5 cm高回声区,边界可辨,内回声不均,可见无回声区.CT检查:右侧肾上腺区肿块,边界清晰,大小15.1 cm×11.3 cm ×9.6 cm,右肾、肝脏、胰腺受压推移,右肾筋膜累及,增强后病灶略有不均匀强化.实验室及内分泌检查未见异常.口服盐酸特拉唑嗪片2 mg/d 2周,术前3d补液扩容.全麻下行手术治疗,术中见肿瘤位于右肾上极,表面血管怒张,瘤体上缘与右肝下缘粘连,内侧与下腔静脉下极与右肾上极粘连.由于下极与右肾粘连明显,无法分离,遂将瘤体与右肾完整切除.     

雄激素非依赖性前列腺癌细胞亚系模型LNCaP-AI的建立

目的:建立雄激素非依赖性前列腺癌细胞亚系模型LNCaP-AI.方法:长期在去雄激素的血清环境下培养雄激素依赖性LNCaP细胞,培养出能够适直无雄激素环境的LNCaP-AI细胞亚系.MTT、RT-PCR、免疫荧光方法观察LNCaP-AI细胞在无雄激素环境下的增殖能力和表达及分泌前列腺特异性抗原(PSA)的水平.结果:LNCaP前列腺癌细胞在无雄激素中培养3个月后逐渐适应了无雄激素的环境,成为雄激素非依赖的LNCaP-AI细胞亚系.LNCaP-AI细胞在无雄激素的环境下迅速增殖,能够分泌PSA,但其PSA mRNA的表达水平是正常生长LNCaP细胞的44%.结论:成功构建雄激素非依赖性前列腺癌细胞亚系模型LNCaP-AI,可以模拟前列腺癌由雄激素依赖发展为雄激素非依赖的过程.     

输尿管软镜联合经皮肾镜治疗复杂性肾结石患者的护理

目的总结输尿管软镜联合经皮肾镜(endoscopic combined intra-renal surgery,ECIRS)治疗复杂性肾结石患者中的护理要点。方法回顾性分析2009年9月至2012年4月,在长海医院泌尿外科中心接受了输尿管软镜联合经皮肾镜治疗的32例复杂性肾结石患者的临床资料,总结了术前护理准备、术中配合以及术后仪器设备的清洗保养消毒等经验。结果所有患者均成功建立经皮肾镜通道,手术时间为56~170min,平均(75±20.5)min;术中出血30~210ml,平均(90±30.7)ml。所有患者均顺利实施手术,术中无大出血,无周围器官损伤,未发生肾盂穿孔等严重并发症。患者术后住院天数为4~7d,平均(5±1.2)d。结石最大直径4.8cm,平均(2.2±0.9)cm。有2例患者(6.25%)出现术后发热(体温38℃),经抗感染治疗后患者痊愈出院。结论术前掌握经皮肾镜和输尿管软镜等器械的特点,熟练手术操作步骤,术中与术者良好的沟通,是保证手术成功的关键。     

超声电子膀胱软镜在泌尿系疾病诊疗中的动物模型研究

目的 探讨超声电子膀胱软镜应用于泌尿系疾病诊疗的可行性. 方法 采用1 ～2岁雌性巴马香猪4只为实验模型,以超声支气管镜为雏形,通过B超模式观察不同膀胱充盈量下膀胱各层结构声像图,通过彩色多普勒超声模式观察膀胱周围重要血管的声像图,初步总结超声电子膀胱软镜的操作技巧和难点.采用专用一次性抽吸式活检针进行内镜超声引导下分层定位穿刺活检,活检组织送病理以验证超声分层定位的准确性,探讨超声电子膀胱软镜下穿刺的有效性和安全性. 结果 超声膀胱镜可同步显示内镜图像和超声图像.香猪膀胱充盈90 ml时,超声内镜下膀胱壁黏膜及黏膜下层、肌层、浆膜层层次清晰可辨并有助于穿刺针的分层定位,多普勒超声模式下,膀胱周围血管血流信号明显,超声引导穿刺可避免发生血管及周嗣脏器误伤.16处穿刺点送检组织病理结果与超声分层定位吻合. 结论 超声电子膀胱软镜诊断治疗泌尿系疾病安全可行,配套器械有待进一步改进.     

肾血管平滑肌脂肪瘤累及淋巴结一例报告

患者,女,42岁。因左腰部酸胀不适1周于1999年2月27日入院。Ｂ超示左肾上、中、下极分别探及大小为3.4ｃｍ×3.0ｃｍ,2.0ｃｍ×1.8ｃｍ,4.6ｃｍ　　作者单位:200433上海,第二军医大学长海医院泌尿外科(侯建国、孙颖浩、钱松溪);湖北省宜昌市第一人民医院泌尿外科(颜克钧)×4.5ｃｍ的相对强回声团,内回声欠均匀。ＣＴ示左肾前上极一8.0ｃｍ×7.0ｃｍ团块样组织。术前诊断为肾血管平滑肌脂肪瘤伴出血。1999年3月5日手术探查左肾前上极为暗红色囊实性肿块,9.0ｃｍ×7.0ｃｍ×6.0ｃｍ,质地稍硬,与周边组织无明显粘连,左肾门处淋巴结稍肿大。将左…     

高压氧与恶性肿瘤

恶性肿瘤内普遍存在缺氧现象，对肿瘤细胞的功能和增殖均会产生明显影响，进而使肿瘤对常规治疗变得相对不敏感。高压氧可以改变肿瘤内的缺氧微环境，作为辅助治疗能够提高某些恶性肿瘤的治疗效果。