TIMP-1绿色荧光蛋白真核表达载体的构建和鉴定

目的:构建并鉴定TIMP-1绿色荧光蛋白真核表达载体.方法:提取胃癌组织总RNA,用TIMP-1基因引物进行RT-PCR,将扩增产物克隆至pGEM-T载体,PCR鉴定及测序证实后,BamH Ⅰ和HindⅢ双酶切pGEM-T-TIMP-1重组体,回收TIMP-1,再将其亚克隆到绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C3中,并对阳性克隆进行酶切鉴定和测序分析.结果:构建的pEGFP-C3-TIMP-1表达载体分别作PCR及双酶切鉴定,证实其中有目的片段完整插入,插入片段测序结果与TIMP-1序列设计完全一致,将其转染人胃癌BGC-823细胞后,TIMP-1的表达定位在细胞胞浆内.结论:成功构建了TIMP-1绿色荧光蛋白真核表达载体,为TIMP-1的肿瘤靶向治疗研究奠定了基础.     

罗格列酮对环孢素A致大鼠慢性肾纤维化的改善作用

目的:探讨罗格列酮(RSG)对环孢素A(CsA)所致的大鼠肾脏纤维化的改善作用.方法:SD大鼠随机分为3组:低盐饮食对照组(n=12)、慢性CsA肾病(CCN)模型组(CsA组,n=15)和RSG处理组(n=15),在实验的第14天随机处死6只大鼠并于第35天处死剩余大鼠,观察大鼠校正肌酐清除率(Ccr)和肾脏组织学病变进展,并应用RT-PCR和免疫组织化学技术检测肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA和蛋白的表达情况.结果:与低盐饮食对照组相比,CCN模型组大鼠第14天Ccr显著降低(P＜0.01),肾间质浸润的单个核细胞数及肾皮质TGF-β1 mRNA水平均显著增加(P＜0.05),这些指标在第35天改变更加显著,并且出现肾间质纤维化积分的显著增加(P＜0.01).RSG在这两个时间点能够不同程度地改善这些指标.结论:RSG能够延缓CsA导致的大鼠肾脏纤维化进展.     

郑州市城区中老年人代谢综合征流行病学调查研究

随着人口老龄化加剧及饮食结构和生活方式的调整,代谢综合征(MS)在人群中的患病率逐年增高,因其而引起心脑血管疾病和慢性肾脏病的发生率也逐年增加.     

狼疮性肾炎诱导治疗的变迁

肾脏是系统性红斑狼疮最常累及的器官,即狼疮性肾炎。最近几十年,伴随生物医药研发、循证依据增加与临床指南更新,狼疮性肾炎诱导治疗已经发生了重大变迁,文章结合临床研究、指南更新及临床经验,介绍狼疮性肾炎诱导治疗方案的的演绎与变迁,旨在帮助临床医生了解狼疮性肾炎诱导治疗的最新策略和未来方向,以期提高狼疮性肾炎诱导治疗缓解率,改善患者预后。     

miR-214/eNOS轴参与糖尿病大鼠肾损伤的机制研究

目的 探讨微小RNA-214(miR-214)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)轴参与糖尿病大鼠肾损伤的作用机制。方法 探讨糖尿病大鼠肾组织miR-214及尿白蛋白的动态变化:将雄性SD大鼠随机分为对照组和链脲菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病模型组,检测各组大鼠第0、1、2、6周肾组织miR-214及尿白蛋白变化。探讨miR-214/eNOS轴参与糖尿病大鼠肾损伤的分子机制:雄性SD大鼠随机分为对照组,STZ组,STZ + Scrambled anti-miR组,STZ + anti-miR-214组,STZ + Scrambled anti-miR +eNOS抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(NG-nitro-L-argininemethylester,L-NAME)组和STZ +anti-miR-214+L-NAME组。STZ诱导为糖尿病后13周检测各组大鼠体重、肾重与空腹血糖并收集血、尿与肾组织标本;ELISA法检测尿白蛋白和肾皮质eNOS蛋白水平;PAS染色评估肾组织病理学改变;qRT-PCR检测肾皮质TGF-β1、MCP-1与肾小球eNOS mRNA的表达。结果 糖尿病大鼠肾组织miR-214表达显著升高,且早于蛋白尿1周出现;抑制miR-214促进糖尿病大鼠肾小球eNOS mRNA与肾皮质eNOS蛋白表达,伴随蛋白尿和肾脏病理损伤显著减轻及肾皮质TGF-β1与MCP-1水平下降;eNOS抑制剂L-NAME阻断了anti-miR-214的肾保护作用。结论 miR-214/eNOS轴参与糖尿病大鼠肾损伤的分子机制,抑制miR-214可减轻糖尿病肾损伤。     

219名煤矿尘肺病患者肺功能结果分析

目的:探讨煤矿尘肺病患者肺功能的改变。方法:测定219名煤矿尘肺病患者肺功能,观察肺通气功能指标肺活量、用力肺活量、最大通气量、1秒量、1秒率、峰流速和用力呼气流速等各项指标的改变。结果:煤矿尘肺病患者肺通气功能指标存在一定程度的减低,以1秒率和用力呼气中期流速减低更为明显。结论:肺通气功能肺活量、用力肺活量、最大通气量特别是小气道功能1秒量、1秒率、峰流速和用力呼气流速等各项指标可作为煤矿尘肺病患者肺功能评定指标。     

罗格列酮对环孢素A所致肝细胞毒性的保护作用

本实验拟用罗格列酮（RGZ）ZP预环孢素A（CsA）刺激下的大鼠肝细胞，观察其过氧化物酶体增殖物受体γ（PPARγ）、转化生长因子β1（TGFβ1）和纤维连接蛋白（FN）及丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）的表达，探讨RGZ对CsA肝毒性的保护作用。     

老年肾小管间质性肾炎-眼色素膜炎综合征一例

患者,女,60岁,因发热半个月,肾功能不全1周于2009年4月12日入院.半个月前出现发热,达39.0℃,伴寒颤、咳嗽、恶心、乏力,于当地诊所治疗无效,并出现双眼视物模糊、疼痛、流泪及结膜充血,以左眼显著.1周前当地查BUN 9.59 mmol/L,Scr 395 μmol/L,24 h尿蛋白量0.42 g.1 d前复查BUN 29.1 mmol/L,Scr 589 μmol/L,后入我院.查体:T 38.6℃,BP 130/85 mm Hg,双眼结膜充血,心肺腹部检查无异常,双下肢无水肿.     

白蛋白对肾小管上皮细胞增殖的影响

目的探讨蛋白尿检在不同时间点对大鼠近端。肾小管上皮细胞增值的影响。方法观察组采用体外培养大鼠近端肾小管上皮细胞（Rat proximal renal tubular epithelial cells,NRK-52E）,取生长状态良好,待其接近融合时模拟体内大量蛋白尿环境,给予不同浓度（10、20、30mg·ml^-1）去脂牛血清白蛋白（fat free bovine serum albumin,BSA）刺激,共同孵育6、12、18、24h;对照组给予同体积无血清培养基共同培养。采用MTT试验检测BSA对体外培养NRK-52E细胞毒作用。结果与对照组比较,白蛋白浓度为10mg·ml^-1时对NRK-52E细胞分别作用6、12、18和24h后,对细胞增殖程度影响没有差异（P〉0．05）。当白蛋白浓度为20mg·ml^-1时,对NRK-52E细胞作用6h后,细胞增殖程度与对照组比较没有差异（P〉0．05）,但随着作用时间的延长,细胞增殖低于对照组（P〈0．05）。当白蛋白浓度为30mg·ml^-1时,随着作用时间的延长细胞增殖几乎停滞,与对照组比较有统计学差异（P〈0．05）。结论白蛋白以时间和剂量依赖方式抑制NRK-52E细胞增殖,并可促进肾小管上皮细胞凋亡。     

罗格列酮对环孢素A所致肾毒性保护作用的机制

目的：观察罗格列酮（RGZ）对环孢素A（CsA）所致肾组织炎细胞浸润及肾间质纤维化的作用,探讨RGZ对CsA肾病（CCN）的保护作用.方法：将28只健康雄性SD大鼠随机分成：①对照组（n=6）,LSD;②RGZ组（n=6）,LSD＋RGZ[5mg/（kg.d）];③CsA组（n=8）,LSD＋CsA[15mg/（kg.d）],④RGZ＋CsA组（n=8）,LSD＋CsA[15mg/（kg.d）]＋RGZ（5mg/（kg.d））.在实验开始后的2wk及5wk处死大鼠,分别用免疫组化方法检测CD68和ColⅣ,RT-PCR方法检测MMP-9和TIMP-1的表达量;HE,Masson染色观察肾脏病理改变.结果：与对照组相比,CsA组及RGZ＋CsA组CD68,ColⅣ,MMP-9,TIMP-1的表达均增高,肾小管间质单个核细胞浸润数及肾间质纤维化程度显著增加,且CsA组显著高于RGZ＋CsA组.RGZ组无明显变化.结论：RGZ可显著降低CsA对肾脏的毒性作用,其机制部分是通过降低CCN大鼠CD68,ColⅣ,MMP-9,TIMP-1的表达,从而改善肾间质纤维化.