针刀为主综合治疗创伤后粘连性膝关节强直23例

目的：观察针刀、CPM及牵引相结合治疗创伤后粘连性膝关节强直的疗效。方法：本组23例粘连性膝关节强直患者在保守治疗无效后,采用针刀松解、CPM功能锻炼及牵引相结合治疗,观察膝关节活动范围的变化。结果：15位患者治疗效果满意,6例患者有效,2例患者疗效不满意,总有效率91.3％。讨论：针刀、CPM及牵引相结合治疗创伤后粘连性膝关节强直疗效满意。     

针刺对老年痴呆大鼠行为学改变的影响

目的:观察针刺对老年性痴呆的疗效.方法:采用D-半乳糖加AlCl3诱导大鼠AD模型,分组处理,应用跳台实验检测大鼠记忆能力.结果:针刺组大鼠跳台实验潜伏期较模型组和治疗前明显延长,错误次数明显减少.结论:针刺可明显提高AD大鼠的记忆能力,改善老年痴呆症状.     

龙胆属秦艽组植物的化学成分和药理作用研究进展

龙胆属秦艽组植物是传统中药秦艽的基原植物.秦艽组植物主要含有环烯醚萜、三萜和甾体等成分,其主要药理作用是抗炎镇痛及健胃抑菌等.作者系统总结了关于这些化学成分和药理作用的研究进展,为秦艽组植物的进一步开发利用提供参考.     

中药复方托毒生髓方治疗慢性骨髓炎的实验研究

目的：观察中药复方托毒生髓方治疗慢性骨髓炎的疗效。方法：45只家兔随机分成4组：空白对照组正常饲养;其余3组制备慢性骨髓炎动物模型：右胫骨内侧钻开0．5cm×1．0cm骨窗,注入鱼肝油酸钠0．5ml和5×10^6CFu／ml金黄色葡萄球菌悬液0．5ml,骨蜡封闭骨缺损,3周后X线检查证实模型复制成功。托毒生髓方组以托毒生髓方提取液灌胃（5ml,每日2次）和局部外洗（10ml,每日4次）,庆大霉素组和模型组分别以庆大霉素稀释液10m1或生理盐水10ml外洗,每日2次或4次。治疗2个月,于治疗开始后第20、40、60天行白细胞计数、血清溶菌酶含量检测和动物病变肢体X线检查。结果：模型组白细胞计数和血清溶菌酶含量于各观察时间点均较空白对照组明显下降（P〈0．01）,庆大霉素组虽有所恢复,但仍明显低于空白对照组,托毒生髓方组则较模型组和庆大霉素组明显升高（P〈0．01）,治疗第60天均接近空白对照组（P〉0．05）。治疗第60天,托毒生髓方组X线诊断分型明显轻于模型组和庆大霉素组（P〈0．01）。治疗第20天X线影像显示,模型组则出现新的骨内脓肿及高密度坏死骨影像,庆大霉素组髓腔狭窄或消失,而托毒生髓方组炎症反应消退,原有的骨干畸形重新塑形。结论：托毒生髓方对于慢性骨髓炎兔模型病变部位的炎症控制以及骨结构恢复和髓腔再通有较好疗效,其机制可能与提高免疫力和促进成骨（没有检测促进成骨的指标,建议删除）有关。     

长托宁介导NLRP3炎性小体调控IKKβ/IKKα/NF-κB通路抑制脊髓损伤大鼠细胞焦亡

目的 探索长托宁对脊髓损伤大鼠细胞焦亡的影响及可能机制。方法 SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、脊髓损伤模型组（Allen’s法建立SCI大鼠模型）和长托宁治疗组（PHC组,腹腔注射长托宁2mg/kg,连续给药14 d）。各组大鼠进行运动功能（BBB）评分;HE、尼氏染色观察脊髓病理学变化;ELISA检测IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18的含量变化;TUNEL检测脊髓细胞凋亡;Western blot方法检测NLRP3、procaspase1、pro-IL1β、IKKβ、IKKα、P-IKKβ、P-IKKα、NF-κB的表达水平。结果 长托宁减轻SCI大鼠脊髓损伤,抑制炎症反应,抑制IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18释放,抑制细胞凋亡,下调炎症小体相关蛋白表达水平,降低NLRP3、pro-caspase1、pro-IL1β表达水平,抑制IKKβ/IKKα/NF-κB信号通路活性。结论 长托宁减轻SCI大鼠炎症反应,抑制NLRP3炎性小体,与调控IKKβ/IKKα/NF-κB通路有关。     

纳美芬介导NR2B/CaMKII/HDAC4通路改善NP大鼠神经病理性疼痛

目的 探讨纳美芬对神经病理性疼痛大鼠的改善作用及可能机制。方法 SPF级大鼠50只,随机分为假手术组(Sham组)、神经病理性疼痛模型组(NP组)与神经病理性疼痛模型+纳美芬干预组(NAL组),采用坐骨神经分支选择损伤法建立NP大鼠模型,NAL组予以纳美芬注射液干预,检测大鼠热缩足反射潜伏期(TWL)和机械刺激伤害感受阈值(MWT);HE和尼氏染色观察脊髓损伤及神经元数量;免疫荧光观察Ca^{2 +}表达;TUNEL染色观察神经元细胞凋亡情况;Western blot检测NR2B/CaMKII/HDAC4通路相关蛋白表达。结果 与NP组相比,纳美芬注射液显著提升NP大鼠的TWL和MWT(P<0.05);改善脊髓损伤,显著增加神经元数量(P<0.05);显著抑制NP大鼠神经元细胞凋亡,显著降低Ca ²⁺表达,同时纳美芬注射液显著促进NR2B、NR2B/CaMKII复合物的表达,显著抑制CaMKIIα磷酸化及HDAC4去乙酰化水平(P<0.05)。结论 纳美芬对NP大鼠术后神经性病理性疼痛具有改善作用,其机制可能与调控NR2B/Ca...     

肠道间质瘤10例临床分析

目的:探讨肠道间质瘤的临床表现、病理类型、诊断及治疗措施。方法:回顾性总结长海医院1991年至2001年经手术治疗并经病理证实了的10例病例。结果:主要表现为:阵发性腹痛、腹胀、消化不良、便血、腹部或直肠包块。病理类型:良性间质瘤2例、恶性间质瘤8例。结论:肠道间质瘤表现无特殊性、易误诊,内镜和X线钡灌肠检查是术前常用的方法,腹部核素扫描、超长型电子小肠镜可提高诊断率。治疗上应采取以手术为主的综合治疗。     

人乳腺癌多西他赛耐药细胞株MCF7/Docetaxel的建立及其生物学特征

目的 建立人乳腺癌多西他赛耐药细胞株MCFT/Doeetaxel,探讨其生物学特征.方法 采用多西他赛中等浓度、间歇作用法建立耐药细胞株MCF7/Docetaxel,采用噻唑蓝(MTT)比色法测定其对Doeetaxel的耐药指数,观察冻存、撤药对耐药性的影响,比较耐药细胞株与亲本细胞株生长曲线、群体倍增时间及贴壁率的不同,流式细胞仪检测细胞周期,软琼脂实验检测细胞的恶性增殖能力,罗丹明实验检测其对药物的摄入、排出能力.结果 人乳腺癌耐药细胞株MCF7/Docetaxel的耐药指数为16.2,冻存对耐药性无明显影响,撤药培养可使耐药性降低,MCF7/Docetaxel与MCF7细胞的群体倍增时间分别为(39.89±0.43)、(27.51±0.55)h(P＜0.05),耐药细胞株倍增时间延长,生长缓慢,G2、M期细胞比例增加(39.50±3.83)%、(23.59±2.51)%(P＜0.05),克隆形成率明显高于亲本细胞67%、23%(P＜0.05),对罗丹明的摄入减少,排出增多.结论 成功建立人乳腺癌多烯紫杉醇耐药细胞株MCF7/Docetaxel,生长及耐药性稳定.

Abstract：

Objective To establish a docetaxel-induced human breast carcinoma drug-resistant cell line MCF7/Docetaxel and study its biological characteristics. Methods The drug-resistant cell line MCF7/Docetaxel was established in culture by exposing MCF7 parent cells to moderate concentration of docetaxel over a period of 11 months. The resistance index to docetaxel was determined by methyl thiazol tetrazolium (MTT) assay. Cell growth curve was drawed and the doubling time was accounted. Flow cytometry (FCM) was performed to determine cell cycle. Fluorescence activated cell analysis (FACS) was employed to determine the concentration of fluorescence dye of rhodamine 123 ( Rh123) in the cells for the evaluation of drug-absorptive and expelling capacity. Results The resistant index of MCF7/Docetaxel was 16. 2. When MCF7/Docetaxel was stored with docetaxel at - 196℃ for 3 months and then went back to the normal environment, its characteristic of anti-tumor drug resistance was still maintained. But after being cultured in RPMI 1640 without docetaxel for a period of 1 month, MCF7/Docetaxel showed a decrease in the resistant index. As compared with the parent cells, MCF7/Docetaxel exhibited a prolonged doubling time [(39. 89 ±0. 43 vs 27. 51 ±0. 55 h,P＜0. 05] and lower growth rate. The percentages of cells in G2 and M phases were significantly increased in MCF7/Docetaxel in comparison with those in MCF7 [(39. 50 ± 3. 83) % vs (23. 59 ± 2. 51) % , P ＜ 0.05]. In soft agar growth test, MCF7/Docetaxel cells formed more cell clones than MCF7 cells (67% vs 23% ,P ＜0. 05). Finally, the concentration of Rh123 in MCF7/Docetaxel was lower than that in MCF7. Conclusion The newly established stable cell line MCF7/Docetaxel possesses typical drug-resistant characteristics and its drug-resistant phenotype is stable.     

基于转录组学和网络药理学探讨肉豆蔻挥发油干预低氧性肺动脉高压的作用机制

目的 基于转录组学和网络药理学探讨肉豆蔻挥发油（volatile oil from Myristica fragrans,VOMF）干预低氧性肺动脉高压（hypoxic pulmonary artery hypertension,HPAH）的作用机制。方法 通过SwissTargetPrediction数据库获取VOMF活性成分和药物潜在靶点,应用GEO数据库获取HPAH疾病相关靶点,Cytoscape软件构建“成分-靶点-疾病”网络;运用Pymol和MOE软件对VOMF关键活性成分与作用靶点进行分子对接。采用雄性SD大鼠制备肺动脉平滑肌细胞（pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs）,低氧处理并给予VOMF干预后,进行转录组学分析获取差异表达基因,采用Western blotting验证VOMF对细胞周期信号通路相关蛋白表达的影响。结果 网络药理学分析共得到VOMF潜在作用靶点512个,HPAH疾病相关差异靶点2 912个,交集基因80个;转录组学分析共得到40个共同差异表达基因。以P＜0.05为筛选条件将转录组学和京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析结果进行交集,得到交集通路8条,其中与HPAH密切相关的包括细胞周期信号通路、丝裂原活化蛋白激酶信号通路、缺氧诱导因子-1信号通路。结合文献报道和课题组前期研究,选取细胞周期信号通路进行验证。Western blotting结果显示,与对照组比较,模型组细胞周期蛋白依赖性激酶2（cyclin dependent kinase 2,CDK2）、CDK4、细胞周期蛋白D1（cell cycle protein D1,Cyclin D1）、Cyclin A2蛋白表达水平升高（P＜0.01、0.001）,p27Kip1蛋白表达水平降低（P＜0.01）;与模型组比较,VOMF组CDK2、CDK4、Cyclin D1、Cyclin A2蛋白表达水平降低（P＜0.05、0.01、0.001）,p27Kip1蛋白表达水平升高（P＜0.05、0.01）。结论 从网络药理学和转录组学角度初步阐明了VOMF能够通过干预细胞周期信号通路,进而干预HPAH的发生,可为后续的药理学研究和临床应用提供依据与参考。     

复合骨碎补总黄酮的丝素蛋白/壳聚糖支架在兔关节软骨损伤中的应用研究

目的 以丝素蛋白/壳聚糖支架为载体将骨碎补总黄酮应用于兔软骨损伤局部,观察修复效果,为临床提供实验数据。方法 制备丝素蛋白/壳聚糖支架、骨碎补总黄酮缓释微球与负载骨碎补总黄酮缓释微球的丝素蛋白/壳聚糖支架,扫描电子显微镜下观察支架形貌,同时检测该支架的体外缓释能力。24只新西兰大白兔随机分3组,利用电钻在股骨滑车部位构建直径3.5 mm、深1.5 mm的软骨损伤模型,空白组软骨缺损处不植入任何材料,对照组植入单纯的丝素蛋白/壳聚糖支架,实验组植入负载骨碎补总黄酮缓释微球的丝素蛋白/壳聚糖支架,术后12周、24周行标本大体与组织学观察,RT-PCR检测修复组织Sox-9、II型胶原与聚集蛋白聚糖mRNA的表达量,Western blot检测软骨缺损部位II型胶原蛋白表达,分析软骨修复效果。结果 丝素蛋白/壳聚糖支架具有良好的三维孔隙结构,孔洞之间相互联通;制备的载药微球表面较光滑,为较规则的圆球形;载药微球均匀分散于丝素蛋白/壳聚糖支架基质中。丝素蛋白/壳聚糖支架可在体外持续稳定地释放骨碎补总黄酮,实验组软骨损伤修复效果优于对照组,对应的ICRS评分与Wakitani组织学评分高于对照组...