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脐血CD34^+造血干细胞体外扩增的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:探讨在体外液体培养中,多种细胞因子联合应用对脐血 C D34+ 造血细胞的扩增作用。方法:用 Isolex 50 免疫磁珠法分离纯化脐血 C D34+ 细胞,在液体培养中,经不同细胞因子组合的诱导,检测有核细胞和集落形成细胞( C F C)的增殖倍数。结果:干细胞生长因子、白细胞介素 I L3、 I L6、粒细胞集落刺激因子和红细胞生成素5 种细胞因子联合对脐血 C D34+ 细胞扩增效果最好,其增殖高峰在第3~4 周,单个核细胞数和 C F U G E M M 增殖倍数最高分别达3268±1024 倍和85±31 倍。结论:以干细胞生长因子、 I L3、 I L6 为主的不同细胞因子组合,能维持脐血 C D34+ 细胞在体外长期造血达6 周,使 C F Cs 大量扩增,这在造血调控研究和造血细胞支持治疗中具有重要意义 相似文献
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目的: 探讨白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-11(IL-11)对脐血CD34+细胞诱导分化为巨核细胞及其产生血小板的影响。方法: 采用免疫磁珠法(MACS)分选8例健康产妇足月顺产的胎儿脐血中CD34+细胞,以含血小板生成素(TPO 50 μg/L)、白细胞介素-3(IL-3 10 μg/L)、干细胞因子(SCF 50 μg/L)的无血清培养基作为对照组,分别添加10 μg/L IL-6、IL-11、IL-6+IL-11作为实验组,培养14 d后观察结果。利用细胞计数仪检测单个核细胞数;流式细胞仪计数培养体系中的CD41+细胞和血小板;用倒置显微镜观察培养体系中的细胞生长情况;用显微镜和流式细胞仪观察凝血酶诱导后的血小板凝集情况。结果: 各实验组单个核细胞数与对照组无明显区别(P>0.05),而CD41+细胞和血小板数量明显多于对照组(P<0.05)。培养第14 d后倒置显微镜下可见实验组中血小板样颗粒物明显多于对照组,而且经凝血酶诱导后有明显血小板凝集。结论: IL-6和IL-11可诱导脐血中CD34+细胞分化为巨核细胞并产生功能性血小板。 相似文献
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老年肿瘤患者血清中抗-B 减弱三例报告 总被引:4,自引:0,他引:4
<正> 在血型常规检定中,我们发现3例老年肿瘤患者血清中抗-B 减弱,现报告如下。一、病例摘要例1,男性,83岁,住院号185814。因反复血尿1年余入院。贫血貌,双肾区叩击痛(一)。实验室检查:血型 O 型,血红蛋白75g/L,白细胞4.7×10~9/L,中性64%,淋巴34%;免疫球蛋白 IgG12.98g/L,IgA2.82g/L, 相似文献
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目的 研究中国人个体ABO血型系统中具有混合外观凝集特征的B3变异型的分子遗传背景.方法 血型血清学方法鉴定2例ABO血型疑难样本的红细胞表型,应用连续凝集方法和13个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)位点检测法,排除外源性或内源性DNA嵌合的可能.对ABO基因第6、7外显子和部分内含子进行聚合酶链反应和DNA序列分析,并进一步通过克隆测序法鉴定2个样本的ABO基因单倍型.结果 2个无关个体红细胞与抗-B和抗-AB发生混合外观凝集,连续凝集法和STR检测排除了样本的外源性DNA污染和内源性遗传嵌合子,根据血清学特征确定这2个个体红细胞均为A183血型.单倍型序列分析发现2个样本为A1B杂合子,其中B等位基因与B101相比,差异仅在第7外显子的425T>C错义突变,导致B糖基转移酶多肽链M142T替换.结论 在中国人群中发现一种新的可能导致B3变异型的ABO等位基因. 相似文献
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浙江省汉族人群血小板同种抗原1—6基因频率的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:检测浙江省汉族人群中HPA1-6系统对偶抗原a,b基因频率的情况,方法:实验样本DNA的抽提采用愉速盐析法,HPA基因分型采用PCR-SSP方法。结果:在本研究的浙江省汉族人群中HPA-Ia基因频率为0.996,HPA-1b基因频率为0.004,HPA-2a基因为0.903,HPA-2b基因为0.097,HPA-3a基因频率为0.681,HPA-3b基因频率为0.319。HPA-4a基因频率为0.996,HPA-4b基因为0.004,HPA-5a基因频率为0.967,HPA-5b基因频率为0.03,HPA-6a基因频率为0.991,HPA-6b基因频率为0.009,结论:HPA 1-6系统中对偶抗原b基因频率最大的为HPA-3b。 相似文献
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cisAB亚型第6、7外显子及侧翼内含子序列分析 总被引:6,自引:0,他引:6
目的 研究汉族ABO血型系统cisAB亚型的分子遗传基础。方法 在标准血清学鉴定和PCR-SSP基因分型的基础上,对汉族cisAB亚型进行第6,7外显子及侧翼内含子DNA扩增,PCR产物经割胶纯化后直接序列分析。结果 血清学鉴定表明2例标本分别为A2B3和A3B,先证者的PCR-SSP基因分型肯定了其中的B和O1基因。DNA序列分析表明,其第6外显子有261G缺失/不缺失杂合;第7外显子与A1基因相比,有T467C杂合和C803G杂合,796位为正常C,表明其血型为罕见的cisAB亚型。结论 467T,796C和803C三处核苷酸的独特性决定了cisAB亚型的分子遗传基础。 相似文献
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目的 分析HLA-B新等位基因HLA-B*9534的核苷酸序列,并建立HLA-B * 9534单链扩增技术.方法 采用商品化快速抽提试剂盒抽提标本基因组DNA,采用PCR技术扩增先证者HLA-B基因的第1~8外显子序列,PCR产物经双酶切后直接测序分析第2、3、4外显子.应用序列特异性引物PCR建立HLA-B*9534单链扩增技术,获得HLA-B*9534等位基因的单链产物,并对单链产物进行第2、3、4外显子测序分析.结果 先证者标本存在2个HLA-B等位基因,直接测序结果经软件分析显示与最接近的HLA-B*1518和B*4601组合存在1个碱基不匹配,即第593位A/G杂合.单链扩增技术将先证者等位基因分离后,测序得到两个等位基因为HLA-B*4601和HLA-B*9534.与最接近的HLA-B*1518的第2~4外显子序列相比,HLA-B*9534仅在第3外显子存在一个碱基的不同,即第593位A→G的改变,导致第174位氨基酸天冬酰胺改变为丝氨酸,该等位基因序列已递交GenBank(EU046491),并经世界卫生组织HLA命名委员会正式命名为HLA-B*9534.结论 发现一个新的HLA-B*9534等位基因,建立的HLA-B*9534单链扩增技术是可行的. 相似文献
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尸肾移植中人类白细胞抗原-Ⅱ类配型 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨同种异体尸肾移植中HLA-I类抗原配型的可行性。方法:应用基因分型技术,对27例尸肾移植供体和49例受体进行HLA-DRB、DQB回顾性分型。结果:在这些未做配型而进行移植的供-受者中,HLA-DRB、DQB完全配合率分别仅为2.0%和10.2%,完全不配合率分别为30.6%和8.2%;将这些供体与受体作HLA-I类配型后再作选择性移植,则同为这些供、受者,其HLA-DRB、DQB的完全配合率分别可选8.2%和40.8%,而完全不配合率仅为10.2%和0。完全不配合的受者移植效果要比其他受者差。结论:在尸肾移植中进行HLA-Ⅱ类配型,不但可行,而且必要。 相似文献
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国产某丙型肝炎病毒抗体试剂中吸光度/临界值的作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究某国产抗-HCV试剂样本吸光度/临界值(S/Co)的意义,探讨国产试剂检测抗-HCV的初步程序和标准。方法采用某国产试剂通过ELISA法检测295000例无偿献血者的抗-HCV,对其阳性反应的样本采用Ortho抗-HCV试剂通过ELISA法进行检测。Ortho试剂阳性反应的样本进行HCV重组免疫印迹实验(RIBA),并对其中的106例Ortho试剂阳性反应的样本进行核酸检测。结果在295000例样本中,某国产试剂抗-HCV阳性反应为681例,阳性率为0.23%。某国产试剂阳性反应的样本经Ortho试剂检测后阳性反应为367例,符合率为53.8%,其中Ortho试剂S/Co值≥3.8为66.2%。在Ortho试剂S/Co值≥3.8的样本中,某国产试剂S/Co值≥8.0的占94.2%;而Ortho试剂S/Co值〈3.8的样本中,某国产试剂S/Co值〈8.0的占99.2%。367例Ortho阳性反应样本中,RIBAHCV阳性223例,阳性率为60.8%;在国产试剂S/Co值≥8.0的样本中,RIBA阳性率为95.7%;而同一种国产试剂S/Co值〈8.0的样本中,RIBA阳性率为2.2%。106例Ortho试剂阳性反应样本中核酸检测阳性为42例。结论国产抗-HCV试剂在检测无偿献血者样本中存在较高的假阳性率,一定程度上造成了血源和血液的浪费。某国产试剂S/Co值≥8.0和Ortho试剂S/Co值≥3.8具有一定的相关性,在实验室检测抗-HCV上具有一定诊断价值。 相似文献