头孢克肟片人体药代动力学和生物等效性研究

目的研究头孢克肟供试制剂和参比制剂的药代动力学和人体生物等效性。方法用HPLC法测定18名健康受试者随机交叉口服200mg头孢克肟后血药浓度,用3P97进行最佳模型拟合,并计算药代动力学参数。结果不同时间药物在血清中的浓度符合2室模型,计算所得的供试制剂和参比制剂之间的主要药代动力学参数如下:Cmax为2.56±0.69,2.32±0.63 mg·L-1;tmax为3.17±0.66,3.5±0.62h,;tl/2β为3.15±0.49,3.31±0.51 h;AUC0-∞为19.91±5.18,19.09±5.36 mg·h.L-1;供试制剂对参比制剂的生物利用度为(106.22±1 8.48)％。结论供试制剂和参比制剂具有生物等效性。     

两种培养基分离鉴别酵母样真菌在临床上的应用

目的：探讨CHROMagar显色培养基和沙保弱培养基分离鉴别酵母样真菌的差异。方法：取临床标本263例，同时分别划线接种于两种培养基上，分离鉴别酵母样真茼。结果：CHROMagar显色培养基分离鉴别酵母样真茼快速、简便、准确，通过茸落显色易于观察、假阳性低、检测效果好。沙保弱培养基尚需改进本身质量。结论：CHROMagar显色培养基的质量在分离鉴别酵母样真苜上优于沙保弱培养基。     

姜黄素衍生物T63提高MCF-7/DOX细胞株对多柔比星敏感性的研究

目的:以人乳腺癌细胞MCF-7和耐多柔比星(doxorubicin,DOX)的人乳腺癌细胞MCF-7/DOX为研究对象,观察新型多芳烯姜黄素衍生物T63对这两株细胞系的影响,探讨T63能否逆转MCF-7/DOX细胞对多柔比星(DOX)的耐药性。方法:用MTT法检测T63的细胞毒性,同时检测T63对细胞株MCF-7/DOX药物敏感性的影响。用流式细胞术PI单染法分析T63或T63联合DOX对细胞周期的影响,观察细胞凋亡情况。用Western blot检测细胞凋亡相关蛋白表达。用Real-time PCR法检测相关基因的转录情况。结果:T63能够有效抑制MCF-7和MCF-7/DOX的增殖,且药效强于姜黄素,而T63对MCF-7和MCF-7/DOX的抑制增殖的效应差异不大。使用非细胞毒性剂量(0.75μmol/L)的T63能有效提高MCF-7/DOX对多柔比星的敏感性。PI单染法显示单独使用T63或者非细胞毒性剂量T63与多柔比星联合使用均能促进细胞凋亡。Western blot结果显示T63能够上调p53、p21、p27、Bim、Bax的表达,下调Bcl-2的表达。Real-time PCR结果表明T63对p53无显著影响。结论:T63可通过促进细胞凋亡的方式逆转MCF-7/DOX对多柔比星的耐药性,从而提示其可能具有临床应用价值,其具体分子机制有待进一步研究。     

丁基苯酞对放射性脑损伤模型大鼠皮质AQP4表达影响的观察

目的:观察丁基苯酞对单次全脑照射后大鼠大脑皮质水通道蛋白4 (AQP4)表达的影响.方法:将雄性SD大鼠60只随机分为假照射组、单纯照射组和丁基苯酞组,采用10 Gy单次全脑照射模型,制模后丁基苯酞组大鼠分别按剂量0.3、1.0和3.0 mg/kg丁基苯酞腹腔注射;依文思蓝(EB)法评价血脑屏障通透性改变;免疫组织化学法检测皮质AQP4表达的变化.结果:单纯照射组大鼠脑组织EB含量为(1.62±0.18) μg/g,与假照射组的(0.58士0.11)μg/g比较,差异有统计学意义,P=0.006;照射后1周单纯照射组大鼠脑组织皮质AQP4表达(1.67±0.63)较对照组(4.00土0.32)降低,P=0.004.与单纯照射组比较,不同剂量丁基苯酞组大鼠脑组织EB含量均降低(0.3mg/kg组,P=0.002;1.0 mg/kg组,P=0.004; 3.0mg/kg组,P=0.003);照射后1周不同剂量丁基苯酞组皮质AQP4表达有不同程度增加,呈现剂量依赖性(0.3mg/kg组,P=0.035;1.0 mg/kg组,P=0.042; 3.0 mg/kg组,P=0.006).结论:大鼠全脑照射后皮质AQP4表达呈时程性变化,丁基苯酞对AQP4有调节作用.     

基于“病证-效应-生物样本分析”方法的桑寄生祛风湿功效物质及归经研究

实验建立与桑寄生功效相对应的佐剂型关节炎模型,观察其祛风湿功效物质及其在大鼠体内分布与归经的关系。通过左后足注射弗氏完全佐剂(0.1 mL),8 d后阴性、模型组给予生理盐水,阳性对照组给予雷公藤多苷混悬液(10 mg·kg^-1),桑寄生高、中、低剂量组给予桑寄生高(10 g·kg^-1)、中(5 g·kg^-1)、低(2.5 g·kg^-1)剂量水煎液,连续给药21 d。造模第9天起,每7 d测1次大鼠左后足踝关节直径,给药第22天桑寄生高剂量组部分大鼠于不同时间点摘眼球取血,处死,并取心、肝、脾、肺、肾、胃、大肠、小肠、脑组织,其余大鼠均在给药30 min后摘眼球取血,取左后足踝关节,ELISA法检测血清中白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,HPLC检测高剂量组大鼠各组织中芦丁、萹蓄苷、槲皮苷的含量,DAS 2.0分析相关药动学参数。结果表明,桑寄生水煎液能明显改善佐剂型关节炎模型大鼠足肿胀状况,且能降低大鼠血清中IL-1β,TNF-α含量。大鼠体内功效物质分析结果显示芦丁仅在胃中有少量分布,萹蓄苷在组织中AUC_0-t为胃>小肠>肾,体内维持时间为肾=胃>小肠>肺>心;槲皮苷在组织中AUC_0-t为胃>肾>肝>心>肺>脾>小肠>脑>大肠>血清,体内维持时间为肾=肝=小肠=脑=肺=脾=心=胃>大肠>血清。由此得出,桑寄生水煎液可有效治疗佐剂关节炎模型大鼠。萹蓄苷、槲皮苷为桑寄生祛风湿功效的重要物质。萹蓄苷、槲皮苷在大鼠体内分布与桑寄生归肾、肝经的传统认识一致。     

马兜铃内酰胺-Ⅰ进入人肾小管上皮细胞及细胞内分布和蓄积的观察

目的:观察马兜铃内酰胺-Ⅰ(AL-Ⅰ)能否进入肾小管上皮细胞及其在细胞内的分布、蓄积情况。方法:以体外培养的人类近端肾小管上皮细胞系(HK-2)为研究对象,用不同质量浓度的AL-Ⅰ(5～20μg.mL^-1)处理细胞,采用荧光倒置显微镜观察细胞内由AL-Ⅰ产生荧光的有无及其分布,并在洗去含AL-Ⅰ的培养液后继续培养HK-2细胞48h,观察细胞内AL-Ⅰ荧光的持续情况以判断其蓄积性。结果:不同质量浓度的AL-Ⅰ(5～20μg.mL^-1)处理细胞0.5h内,均能在肾小管上皮细胞内观察到蓝绿色的AL-Ⅰ荧光,并且荧光仅分布于细胞浆中,而在细胞核内未观察到。在洗去含AL-Ⅰ培养液后继续培养时AL-Ⅰ的荧光可在细胞内持续存在48h以上,其持续存在部位仍为细胞浆。结论:AL-Ⅰ可以在短时间内迅速进入肾小管上皮细胞,其分布部位在细胞浆,不进入细胞核;AL-Ⅰ在细胞浆内的蓄积可能与其致肾损伤的毒性作用机制有关,即通过进入肾细胞并蓄积于细胞内在肾病过程中持续发挥毒性作用。     

"循经移疮泄毒"治疗癌肿方法的初步构建及临床意义

目的:构建"循经移疮泄毒"治疗晚期癌肿方法的操作流程,并初步分析其临床意义。方法:对晚期肝癌患者循足厥阴肝经在"膝关"腧穴下行部位实施移疮泄毒,采用ELECSYS电化学分光免疫法对移疮部位的渗出液和同期血清中肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)等进行检测,并与非肝经所对应脏腑晚期癌肿患者的循肝经移疮泄毒疗效进行对比分析。结果:在晚期肝癌患者循肝经移疮泄毒的发疱液中检出高于血清浓度的癌胚抗原(CEA)等物质。结论:采用"循经移疮泄毒"法,有助于癌肿毒性物质排出体外。     

MicroRNA-200a suppresses the Wnt/β-catenin signaling pathway by interacting with β-catenin

The Wnt/β-catenin signaling pathway is crucial for human organ development and is involved in tumor progression of many cancers. Accumulating evidence suggests that the expression of β-catenin is, in part, regulated by specific microRNAs (miRNAs). The purpose of this study was to determine the expression of a recently identified epithelial to mesenchymal transition (EMT)-associated tumor suppressor microRNA (miR)-200a, in cancer cells. We also aimed to identify specific miR-200a target genes and to investigate the antitumor effects of miR-200a on the Wnt/β-catenin signaling pathway. We employed TOP/FOP flash luciferase assays to identify the effect of miR-200a on the Wnt/β-catenin pathway and we confirmed our observations using fluorescence microscopy. To determine target genes of miR-200a, a 3' untranslated region (3' UTR) luciferase assay was performed. Cell viability, invasion and wound healing assays were carried out for functional analysis after miRNA transfection. We further investigated the role of miR-200a in EMT by Western blot analysis. We found fluctuation in the expression of miR-200a that was accompanied by changes in the expression of members of the Wnt/β-catenin signaling pathway. We also determined that miR-200a can directly interact with the 3' UTR of CTNNB1 (the gene that encodes β-catenin) to suppress Wnt/β-catenin signaling. MiR-200a could also influence the biological activities of SGC790 and U251 cells. Our results demonstrate that miR-200a is a new tumor suppressor that can regulate the activity of the Wnt/β-catenin signaling pathway via two mechanisms. MiR-200a is a candidate target for tumor treatment via its regulation of the Wnt/β-catenin signaling pathway.     

IPSS-V/S在TUVP术后下尿路症状评估的临床价值

目的：探讨国际前列腺症状评分的排尿期/储尿期评分比值（international prostatic symptom score-voiding/storage sub－score ratio,IPSS-V/S）在经尿道前列腺汽化电切术（transurethral electrovaporization prostatectomy,TUVP）术后下尿路症状（lower urinary tract symptoms,LUTS）再评估的临床价值。方法：回顾性分析了2015年1月至2016年12月期间234例接受TUVP的良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia,BPH）患者的国际前列腺症状评分（international prostatic symptom score,IPSS）等临床资料。按照IPSS-V/S比值将患者分为A组（IPSS-V/S≤1,80例）和B组（IPSS-V/S>1,154例）。术后6个月再次评估IPSS,储尿期症状评分（international prostatic symptom score-storage,IPSS-S）,排尿期症状评分（international prostatic symptom score-voiding,IPSS-V）和生活质量评分（quality of life,QOL）。结果：234例患者术后6个月IPSS和QOL较术前明显降低,差异有统计学意义（t=33.0,P=0.000;t=34.3,P=0.000）。术后6个月B组患者IPSS改善程度明显优于A组[（12.36±3.67）分 vs. （8.20±3.21）分]（t=8.96,P=0.000）。其中A组术后6个月IPSS-S明显高于B组[（9.61±2.88）分 vs. （5.55±2.63）分]（t=10.8,P=0.000）;而2组患者术后6个月时IPSS-V对比无统计学差异（t=1.56,P=0.120）。虽然A组术后6个月的QOL明显改善[（3.59±0.91）分 vs.（5.19±0.55）分]（t=14.8,P=0.000）,但是基本满意及以上者仅占13.75%,明显低于B组的70.78%。A组术后6个月IPSS-S各症状评分均有一定改善,改善程度从高到低依次为尿急评分、尿频评分和夜尿评分,其中夜尿评分改善率最低,仅为36.3%（29/80）,是A组患者IPSS及QOL改善较小的重要原因。结论：相比IPSS,IPSS-V/S更能准确反映TUVP术后疗效,LUTS排尿期症状改善明显优于储尿期症状。对于以夜尿症为主的BPH/LUTS患者,TUVP对患者QOL改善有限,需要引起临床医师重视。     

132例胆道闭锁Kasai术后患儿生存率及影响因素分析

目的：探讨影响胆道闭锁（biliary atresia,BA）患儿Kasai术后生存率的因素,为临床治疗方案选择及预后判断提供依据。方法：2007年1月至2014年1月间胆道闭锁行肝门空肠吻合术（Kasai术）且资料完整的患儿共132例,随访至2015年1月。所有数据录入SPSS19.0进行统计分析,运用寿命表法计算生存率,分别采用Kaplan-Meier法及COX比例风险回归模型对132例患者的手术时年龄、巨细胞病毒感染、术中病检肝硬化程度、术后是否应用激素与生存率间关系进行单因素和多因素综合分析。结果：132例患儿存活35例,死亡97例;存活患儿中位随访时间为53.3（12~86.17）个月。BA患儿Kasai 术后1年预计生存率为（32.0±6.0）%,2年及5年预计生存率分别为（26.0±4.0）%及（24.0±4.0）%;术后未应用激素组存活率为18.7%（17/91）,应用激素组存活率为43.9%（18/41）;肝硬化组存活率为18.9%（14/74）,非肝硬化组存活率为36.2%（21/58）,经Log-rank检验,术后应用激素及非肝硬化为影响患儿长期生存的重要因素（P=0.027,P=0.037）;经COX回归分析发现,术后激素应用是影响患儿生存率的重要独立因素（RR=0.602,95%CI=0.377~0.964,P=0.034）。结论：Kasai术为提高胆道闭锁患儿生存率的有效治疗方式。术后合理应用激素治疗可能是提高术后生存率的重要措施之一。