胞浆抗原检测在急性双表型白血病中的诊断价值

目的 探讨胞浆抗原检测在急性双表型白血病(BAL)中的临床诊断、鉴别诊断价值。方法 采用流式细胞术(FCM)对500例初治急性白血病(AL)患，统一进行常规一线抗体的检测，其中对一线抗体诊断不清的80例加做二线胞浆抗原染色。结果 80例加做胞浆抗原检测后，依据EGIL(1998年)积分系统，符合BAL有10例(10／500例，2．0％)：T系／B系双表型3例(cCD3、cCD79a双阳性)、T系／髓系双表型3例(cCD3、MPO双阳性)、B系／髓系双表型4例(cCD79a、MPO双阳性)；符合急性未分化型白血病1例(0．2％)；符合AL伴系表达69例。结论 对诊断不清的AL病例，加做胞浆抗原检测，对进一步提高白血病的诊断水平，特别是对未分化型、双表型以及双表型的分类诊断、双表型与伴系表达白血病的鉴别诊断具有重要价值。     

汉防己甲素逆转白血病细胞株K562/ADM多药耐药性机制研究

目的 研究汉防己甲素(TTD)对慢性粒细胞白血病急性变白血病细胞株K562／ADM多药耐药(MDR)逆转的机理。方法 采用流式细胞仪检测细胞内化疗药物的浓度及细胞表面P糖蛋白(P-gp)的表达；荧光定量PCR法检测MDR1 mRNA；通过流式细胞仪检测Anexin—V判断凋亡细胞的数量。结果 10μmol/L的TTD处理K562／ADM细胞后，细胞内阿霉素(ADM)的浓度明显提高；K562／ADM细胞MDR1 mRNA／P-gp的表达下降；TTD能增强ADM致细胞凋亡的作用。结论 汉防己甲素的耐药逆转机制除了下调MDR1 mRNA／P-gp的表达引起细胞内抗癌药物的积聚外，增加抗癌药物致细胞凋亡也是耐药逆转的重要原因。．     

急性心肌梗死患者血浆中血小板P-选择素和血小板膜蛋白V的动态变化及其临床意义

目的 观察急性心肌梗死（AMI）患者血浆中血小板P-选择素（P-selectin）和血小板膜蛋白V（GPV）的动态变化，探讨急性心肌缺血前、后血小板活化的临床意义。方法 采用酶联免疫方法测定31例住院AMI患者发病12h内，第2d，第3d和1周时及30例正常人血浆中的P-selectin和GPV的含量，并对其动态变化进行比较。结果 AMI患者12h起P-selectin和GPV浓度明显高于正常组（P〈0．01），其中GPV当天达到高峰，P-selectin则在第2d达到高峰，第7d基本恢复正常范围（P〉0．05）。结论 GPV可以作为反映冠心病患者病程中血小板活化程度的一项新指标。     

过氧化体增殖物激活型受体γ激动剂罗格列酮对β-catenin信号途径的调控研究

目的在细胞和动物模型上,研究了调控β-catenin水平对血管平滑肌细胞分化增殖的影响。方法体外培养大鼠动脉平滑肌细胞,以过氧化体增殖物激活型受体(PPAR)γ激动剂—罗格列酮为刺激药物,观察细胞生长曲线、测定β-catenin及其上、下游基因GSK3β、cyclin D1的表达。另外,以高脂     

巨大血管瘤导致的脾肿大与出血

1　病例摘要患儿 ,男 ,3岁。发现皮肤淤点淤斑 4个月 ,右眼球结膜出血 1 0d。血小板计数为 40～ 47× 1 0 9/L。在外诊断为特发性血小板减少性紫癜 (ITP)。经静脉滴注地塞米松 1 0d ,用大剂量丙种球蛋白 2次 ,每次 3d ,均未见任何效果转来我院治疗。患儿父母为非近亲婚配 ,无家族史。体检情况发育营养良好 ,全身皮肤有较多的淤点淤斑 ,右眼球结膜严重出血 ,心肺正常 ,肝脏不大 ,但脾脏肋下 1 0cm至盆腔。B超检查证实有巨脾。实验室检查 :WBC 1 0× 1 0 9/L ,RBC 3.0× 1 0 9/L ,Hb 90 g/L ,血小板 1 0× 1 0 9/L。骨髓检查正常 ,全片…     

清髓性预处理异基因造血干细胞移植治疗恶性胸腺瘤并发重型再生障碍性贫血一例

胸腺瘤并发重型再生障碍性贫血(SAA)的发病率仅为0～1.4％[1].由于全血细胞重度减少,胸腺瘤并发SAA患者难以行肿瘤切除术,亦难以进行放疗和化疗,治疗SAA的免疫抑制剂对于恶性胸腺瘤亦不利.2011年8月,我院行异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗恶性胸腺瘤并发SAA 1例,现报告如下.     

氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞TET2表达及自噬的影响

目的 观察氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞自噬的影响及其调节机制.方法 氧化型低密度脂蛋白孵育人脐静脉内皮细胞24 h,RT-PCR检测TET2 mRNA表达,Western blot检测TET2以及自噬标记物Beclin 1、LC3的表达.TET2 siRNA转染人脐静脉内皮细胞,Western blot检测Beclin 1、LC3的表达.结果 人脐静脉内皮细胞经不同浓度氧化型低密度脂蛋白孵育24h后,浓度依赖性地下调TET2 mRNA以及蛋白的表达(P＜0.05),并且下调Beclin 1表达以及LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ的比值.TET2 siRNA转染人脐静脉内皮细胞后,Beclin 1表达以及LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ的比值明显降低.结论 氧化型低密度脂蛋白促进人脐静脉内皮细胞自噬,可能与下调TET2表达相关.     

Spacer区蛋白对ADAMTS13活性影响的研究

目的:本研究旨在获得血管性血友病因子裂解酶ADAMTS13中重组的spacer区蛋白,进一步探讨该区域对ADAMTS13功能发挥的作用。方法:以ADAMTS13全长质粒为模板,构建含spacer区基因序列的原核表达质粒,转染大肠杆菌,低温(30℃)IPTG诱导表达,收集超声上清并鉴定。并大规模诱导表达,利用Ni-NTA琼脂糖柱,梯度咪唑淋洗法纯化蛋白,应用SDS-PAGE和Western blot法鉴定纯化产品纯度和免疫学活性。利用重组蛋白与免疫性调节的血栓性血小板减少性紫癜(iTTP)患者血浆孵育,检测血浆中ADAMTS13的活性变化。结果:成功构建能表达spacer区的原核表达质粒并能有效表达蛋白。Western blotting结果显示,抗6×His抗体和抗人ADAMTS13抗体(针对Gln34-Trp688)分别能与重组蛋白在15 kDa处显单一条带。功能实验表明,该重组蛋白能够有效逆转iTTP患者中被自身抗体抑制的ADAMTS13酶活性。结论:重组蛋白具有较好的免疫原活性和纯度,为进一步研究spacer区对iTTP的发病机理提供了实验依据。     

一个F13A1基因大片段缺失所致凝血因子ⅩⅢ缺乏症家系的基因诊断

凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)是凝血过程中的最后一个凝血因子, 具有转谷氨酰胺酶活性, 催化纤维蛋白单体中α和γ链中的谷氨酰胺酰胺基与赖氨酸氨基之间共价结合, 从而形成不溶的纤维蛋白聚合物发挥止血作用[1]。血浆FⅩⅢ分别以2个A亚基(FⅩⅢ-A)和B亚基(FⅩⅢ-B)形成四聚体的形式存在, 其中A亚基具有转谷氨酰胺酶活性, B亚基作为载体保护A亚基免于降解[2-3]。根据亚基缺陷类型FⅩⅢ缺乏症分为FⅩⅢ-A亚基缺乏症和FⅩⅢ-B亚基缺乏症两大类, 后者临床出血表现较轻[4-5]。     

多抗夹心ELISA测定人血浆普莱单抗浓度

建立多抗夹心ELISA测定人血浆普莱单抗(anti-GPIIb/IIaF(ab)2)浓度的方法并进行方法学验证.采用复合快速免疫法免疫家兔获得抗血清,经常规及普莱单抗特异性亲和层析纯化,并以人AB型血浆偶联的Sephorose 4B凝胶去除与人血浆的交叉反应.以获得的特异性多抗包板,生物素标记的该多抗为检测抗体,建立测定人血浆普莱单抗浓度的多抗夹心ELISA法,并进行了方法学验证.复合快速免疫法可在较短的时间内获得了高滴度的抗普莱单抗的多抗;利用所获得的多抗构建的ELISA试剂盒测定普莱单抗的浓度范围为1.56～50ng·mL-1,方法学认证的各项指标符合药代动力学研究的要求,为进行临窗前及临床普莱单抗药物代谢动力学研究奠定了坚实的基础,为其它单抗及高分子生物技术药物的药代动力学研究提供了借鉴思路.