显色法芯片技术快速鉴定分枝杆菌菌种

 目的 利用显色法芯片技术建立快速鉴定分枝杆菌菌种的方法。 方法 根据美国国家生物技术信息中心（NCBI）提供的分枝杆菌 16S rDNA 基因的保守区和突变区（第 129 ~ 267 位核苷酸的 A 突变区、第 430 ~ 500 位核苷酸的 B 突变区）分别设计引物和寡核苷酸探针，用地高辛标记引物并制备玻璃芯片。采用双重 PCR 技术分别对 16 种分枝杆菌标准株、5 种非分枝杆菌标准株和 120 株分枝杆菌临床分离株（非结核分枝杆菌 40 株、结核分枝杆菌复合群 80 株）进行扩增，扩增产物分别与玻璃芯片进行杂交检测，尼龙膜显色，以显现蓝黑色斑点作为阳性信号，并根据其在芯片方阵中的位置判断分枝杆菌种类。根据芯片杂交结果，选取部分经显色法芯片技术检测的临床分离株进行 DNA 测序。 结果 16 种分枝杆菌标准株和 120 株分枝杆菌临床分离株经 PCR 扩增均各产生 2 条 DNA 片段，其中 1 条长度为 272 ~ 280 bp，1 条长度为 183 ~ 192 bp。16 种分枝杆菌标准株均与芯片上特异性探针杂交，应用显色法芯片技术分析 16 种分枝杆菌标准株和 5 种非分枝杆菌标准株的特异性为 100%。120 株分枝杆菌临床分离株均与分枝杆菌属探针 a 杂交，其中 79 株确定为结核分枝杆菌复合群，38 株确定为非结核分枝杆菌（不产色分枝杆菌 17 株，胞内分枝杆菌 8 株，猿猴分支杆菌 6 株，瘰疬分枝杆菌 5 株，偶然分支杆菌 2 株），另 3 株只与分枝杆菌属探针 a 杂交，没有鉴定到种。选取的 26 株分枝杆菌临床分离株（结核分枝杆菌复合群 8 株，不产色分枝杆菌 5 株，胞内分枝杆菌、猿猴分枝杆菌、未鉴定到种的分枝杆菌各 3 株，瘰疬分枝杆菌、偶然分枝杆菌各 2 株）DNA 测序显示，未鉴定到种的 3 株分枝杆菌中，1 株为结核分枝杆菌突变株，1 株为 Mycobacterium lentiflavum，1 株为 Mycobacterium arupense，芯片上无后 2 种菌株的特异性探针；其余 23 株菌株测序结果与芯片检测结果一致。 结论 显色法芯片技术能简便、快速、灵敏、特异地将大多数分枝杆菌鉴定到种，具有一定的临床推广应用价值。     

张天文主任辨治小儿抽动症经验举隅

张天文主任认为小儿抽动症主要病因病机为肝脾肾三脏功能失调,风火痰湿夹杂而为病,与先天禀赋不足、情志因素、外感六淫及饮食因素均有密切关系,治疗以健脾化痰为主,兼以平肝熄风、补肾滋阴为治则。常用方剂二陈汤、天麻钩藤饮、大定风珠汤、四君子汤等,同时注重饮食及心理调护,临床取得了良好的疗效。     

构建医院内中药饮片质量控制体系的必要性与探索研究

中药饮片是中医临床防治疾病的处方药,医院作为应用中药饮片的主体之一,医院内中药饮片质量的优劣直接影响着中药临床疗效,关系到患者切身健康。但是目前中药饮片市场较为混乱,中药材种植或养殖、生产加工、贮藏管理、流通经营等方面均有不规范的问题出现。同时,中药饮片供应方式隔绝了医院对所用中药饮片来源和生产过程的知情权,医院受制于中药饮片供应企业,被动接受供应企业提供的中药饮片产品,这对医院购进的中药饮片质量的可控形成了很大障碍。为解决以上问题,应从中药饮片进入医院的源头和医院的质量管理两方面出发,探索构建以中药饮片采购管理、入库验收、储存养护、人员能力提升等措施为内容的中药饮片质量控制体系。同时,应积极发挥中药临方炮制的重要作用、中药产品全过程追溯体系与中药材市场监管体系的保障作用,加强医院在中药饮片质量控制体系中的主导地位。     

分枝杆菌噬菌体D29气溶胶特性的研究

目的 为了研究噬菌体D29气溶胶吸入治疗结核分枝杆菌的可行性,测试了噬菌体D29耐雾化能力、喷雾量、气溶胶粒径等气溶胶特性参数.方法 负压实验室气雾柜内发生噬菌体D29气溶胶,TSI3321气溶胶粒径分析仪测试了气溶胶空气动力学直径.Anderson六级空气微生物采样器测试了生物粒子气溶胶中值直径.据雾化前后噬菌体D29的浓度变化及体积变化得到噬菌体D29的雾化时间存活率和雾化量.结果 噬菌体D29气溶胶空气动力学直径为0.872 μm,生物粒子气溶胶中值直径为2.21 μm.噬菌体D29在雾化5、15、30、45、60 min后的存活率分别为89.78%、77.19%、48.86%、33.99%、30.12%.气溶胶的雾化量为232 μl/min.结论 噬菌体D29气溶胶粒径、耐雾化能力及喷雾量等气溶胶参数可以进一步进行动物气溶胶吸入治疗结核分枝杆菌感染方面的研究.     

混合型多发性大动脉炎的超声特征

用三种不同频率的彩色多谱勒超声探头对 10例混合型多发性大动脉炎进行检查 ,探讨其超声特征和诊断价值。资料与方法10例混合型多发性大动脉炎患者 ,女 7例 ,男 3例。年龄18～ 33岁 ,平均 2 5岁 ,10例中有 8例高血压 ,另 2例 ,1例右上肢血压正常 ,左上肢测不到血压为无脉症 ,另一例血压在正常范围。采用Ａｐｏｇｅｅ 40 0型彩色多普勒超声诊断仪 ,分别用三种宽频带探头 :7～ 11.0ＭＨｚ高频线阵探头对外周动脉血管进行检查 ;2 5～ 5 .0ＭＨｚ凸阵探头对腹部脏器进行检查 ,重点是双侧肾脏情况 ;2 5～ 6 .0ＭＨｚ环阵探头对心脏进行检查。患…     

一种敞开式两种功能座厕架的应用

我们设计一种敞开式两种功能座厕架。 2 0 0 1年 4月 19日已被国家授予专利权 ,专利证书号第4 94 6 17号。现介绍如下。1　材料敞开式两种功能座厕架由坐垫、支架及支脚构成。坐垫由硬塑料复合板制成。支架与支脚均由不锈钢制成。坐垫的后部通过固定片连接有活动支架 ,活动支架的另一端设有可以固定在墙上的活动铰链或弹簧片。座垫的下端设有多边形固定架 ,固定架的前部接有挂环 ,两侧端部通过活动铰链与活动支脚构成连接 ,支脚下方套上胶套 (详见图 1)。图 1　座厕架应用图2　应用方法此种座厕架是采取在普通的蹲厕的基础上 ,在其上部设置…     

宁夏地区汉族代谢综合征患者脂联素基因多态性与冠心病的相关性研究

目的 探讨宁夏地区汉族代谢综合征(MS)患者脂联素(APN)水平及其单核苷酸基因多态性(SNP)+45T/G和+276G/T两个位点与冠心病(CHD)的关系.方法 302例研究对象分为正常对照组、代谢综合征(MS)组、代谢综合征合并冠心病(M+C)组,采用实验-对照研究方法,应用酶联免疫吸附法(ELISA)及聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,对血浆APN水平及APN两个位点基因多态性进行检测.结果 与对照组相比,MS组及M+C组血浆APN水平降低(P<0.05);与对照组及MS组相比,M+C组SNP+45TG+GG基因型及G等位基因的分布频率明显降低(P<0.05).多因素逐步Logistic回归分析显示,SNP+276基因多态性为MS危险因素,SNP+45G等位基因为CHD的保护因素.结论 MS患者APN水平降低,携带SNP+276T等位基因者患MS的风险增加,携带SNP+45G等位基因的MS患者发生CHD的危险性减小.     

新生儿窒息合并暂时性心肌缺血临床分析

目的:分析新生儿窒息合并暂时性心肌缺血的疗效及预后。方法:对2010年1月—2010年12月间收治的新生儿窒息合并暂时性心肌缺血的70例患儿的病例资料进行临床分析。结果:治疗前后血清心肌酶谱及肌钙蛋白测定均明显下降,差异有统计学意义P<0.05。结论:新生儿窒息合并暂时性心肌缺血经7～10d治疗,疗效显著,预后良好。     

腹腔镜手术气腹条件下pet（CO2）和pa（CO2）变化及相关性

目的:观察腹腔镜手术时CO2气腹条件下,不同时点pet(CO2)(终末潮气CO2分压)和pa(CO2)(CO2分压)的差值pa-et(CO2)及pet(CO2)和pa(CO2)的相关性。方法:选取我院2009年6月-2010年12月择期行腹腔手术患者共46例,测定麻醉诱导平稳后5 min气腹前(T0)、气腹后30 min(T1)、气腹后1 h(T2)、气腹后1.5 h(T3)、气腹后2 h(T4)及术毕解除气腹后10 min(T5)时的pa(CO2),同时记录上述各时点的pet(CO2)计算各时点的pa-et(CO2),及pet(CO2)和pa(CO2)相关系数(r)。结果:气腹后pet(CO2)和pa(CO2)均增加,需增大Vt和RR,以维持pa(CO2)在正常范围,且两者有很好的相关性,pa-et(CO2)气腹后明显增大,尤其是气腹超过2 h后,增大更加明显。结论:腹腔镜手术气腹条件下,pet(CO2)和pa(CO2)仍具有良好的相关性,但应注意随着气腹时间的增加,虽然两者仍呈高度正相关,但pa-et(CO2)逐渐增大,pet(CO2)已不能较好的反映pa(CO2),此时须行动脉穿刺血气分析。