基于HPLC指纹图谱和主成分分析考察醒脑静注射液的配伍稳定性

目的:考察醒脑静注射液与9种联用药物配伍的稳定性,为该药物的临床安全应用提供参考。方法:根据临床使用情况,将醒脑静注射液分别与9种联用药物进行配伍并置于室内避光条件下和光照条件下6 h,考察配伍溶液的外观性状变化,并采用相似性评价及主成分分析方法对配伍溶液的HPLC指纹图谱进行分析。结果:醒脑静注射液与吡拉西坦氯化钠注射液等9种药物配伍后外观均未发生明显变化。相似度评价结果显示,醒脑静注射液与吡拉西坦氯化钠注射液等9种药物配伍0 h,放置6 h及光照6 h的指纹图谱相似度均 0. 98。主成分分析结果显示,9组配伍溶液聚为两类;其中与吡拉西坦氯化钠注射液等8种药物的配伍溶液聚为一类,且配伍后醒脑静注射液的特征成分相对峰面积均无明显变化;与丹参川芎嗪注射液的配伍溶液聚为一类,配伍0,6 h后醒脑静注射液的某些特征成分相对峰面积增大,光照6 h后更加明显。结论:醒脑静注射液与吡拉西坦氯化钠注射液等8种药物的配伍稳定性良好,与丹参川芎嗪注射液配伍则存在稳定性问题,提示临床应用时需注意其配伍问题。     

LY294002与Exendin-4体外诱导人胚胎干细胞分化为胰岛素分泌细胞

目的：探讨磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3 -kinase,PI3K）抑制剂LY294002与胰升血糖素样肽-1（glucagon-like peptide-1,GLP-1）拟似物Exendin-4体外诱导人胚胎干细胞（human embryonic stem cells,HESc）分化为成熟胰岛素分泌细胞的影响。方法：利用“五步法”包括：HESc体外培养;拟胚体（embryoid bodies,EBs）形成;筛选巢蛋白阳性细胞;扩增巢蛋白阳性细胞;第5阶段分别加入PI3K抑制剂LY294002为实验组（LY组）和GLP-1拟似物Exendin-4为对照组（Ex组）诱导HESc定向分化。光镜下观察各阶段细胞分化特点,细胞免疫荧光染色鉴定胰岛样细胞特异蛋白表达。结果：C肽、胰高血糖素、生长抑素单染细胞阳性率及胰岛素/生长抑素、胰岛素/C肽双染细胞阳性率Ex组均高于LY组：C肽（85.7±2.1）% vs. （74.5±2.7）%,P=0.005;胰高血糖素（38.1±3.4）% vs.（27.2±2.4）%,P=0.018;生长抑素（75.4±3.7）% vs.（31.3±4.7）%,P=0.000;胰岛素/生长抑素（21.5±2.2）% vs. （3.5±0.9）%,P=0.000;胰岛素/C肽（87.5±2.4）% vs. （76.7±3.1）%,P=0.013。结论：在无血清培养体系下,LY294002较Exendin-4诱导HESc分化的胰岛素分泌细胞更加成熟。     

基于毒理学软件和细菌回复突变试验的大黄素型蒽醌基因突变风险评价

目的 使用毒理学软件和细菌回复突变（Ames）试验评价大黄素型蒽醌类化合物的致突变风险，分析不同取代基及所在位置对大黄素型蒽醌致突变风险的影响。方法 使用Toxtree、Derek Nexus和Sarah Nexus毒性预测软件对大黄素、羟基大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚、大黄酚、大黄酸、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、芦荟大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-1-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷的致突变风险进行预测，并使用鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102、TA1535和TA1537及大肠杆菌WP2 uvrA开展基于6孔板的Ames试验，评价10种大黄素型蒽醌的致突变性。结果 基于蒽醌母核结构，Toxtree、Derek Nexus和Sarah Nexus毒性预测软件提示所有大黄素型蒽醌均存在致突变风险。在非S9代谢活化状态下，芦荟大黄素导致TA98和WP2 uvrA Ames菌落数增加，大黄酚、大黄酸导致WP2 uvrA Ames菌落数增加。在大鼠肝S9代谢活化状态下，大黄素和大黄酸导致TA98和TA1537 Ames菌落数增加，羟基大黄素导致TA97、TA98、TA1537和WP2 uvrA Ames菌落数增加，芦荟大黄素导致TA98、TA1537和WP2 uvrA Ames菌落数增加，大黄素甲醚导致TA1537 Ames菌落数增加，大黄酚导致TA1537和WP2 uvrA回复菌落突变数增加，大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷可引起TA1537回复突变菌落数增加。结论 大黄素型蒽醌类化合物在大黄素母核的基础引入羟基后其诱变能力显著升高，较大葡萄糖苷基团的引入反而使受试物诱变能力降低。     

Gabra3通过AKT/mTOR途径促进膀胱癌T24细胞侵袭和迁移

目的:探究γ-氨基丁酸受体亚基α-3(Gamma-aminobutyric acid receptor subunit alpha-3,Gabra3)基因对膀胱癌T24细胞凋亡、迁移和侵袭的作用及其机制。方法:TCGA数据库分析Gabra3基因在膀胱癌中的表达以及转移和生存的相关性。建立Gabra3过表达和Gabra3突变的T24细胞株,根据转染质粒不同,分为空白T24细胞(Control)、空pDONR223载体转染T24细胞(NC)、野生型Gabra3过表达T24细胞株(wt-Gabra3)、突变型Gabra3 T24细胞株(mut-Gabra3)。在回补实验中,分为转染突变型Gabra3 T24组(mut-Gabra3)、转染空pDONR223载体mut-Gabra3组(mut-Gabra3-NC)、转染野生型Gabra3过表达组(mut-Gabra3+wt-Gabra3)。用TUNEL染色检测T24细胞凋亡,细胞划痕和Transwell分别检测T24细胞迁移和侵袭,Western blot检测AKT/mTOR通路相关分子生物表达水平。结果:Gabra3基因在膀胱癌中显著高表达(...     

关节镜下肩袖修补术后患者康复时机的最佳证据总结

目的 检索、整理和总结关节镜下肩袖修补术后患者康复时机的最佳证据,为临床实践提供参考。方法 系统检索UpToDate、USC、AHQR、Cochrane Library、JBI Library、Embase、PubMed、中国生物医学文献数据库、中国知网、维普、万方、英国国家卫生与临床优化研究所(NICE)等数据库及网站。文献检索类型包括临床决策、临床实践指南、专家共识、最佳证据总结和系统评价/meta分析。检索时间为2013年1月1日至2023年1月1日,收集关节镜下肩袖修补术后患者康复时机的相关文献。由2名研究者独立进行文献筛选与方法学质量评价,提取、总结符合标准的文献资料并形成最佳证据。结果 共纳入11篇文献,包括3篇指南,2篇专家共识,6篇系统评价。通过对证据的总结与提炼,共形成5方面,包括早期/延迟方案的定义、固定时间、康复时机、锻炼方式、功能结果,共25条证据。结论 本研究总结出关节镜下肩袖修补术后康复时机的最佳证据,临床人员可根据最佳证据为患者实施干预,选择最佳时机进行针对性的康复方案,并及时调整康复策略,以提高患者的适应性,促进患者快速康复。     

重组酶聚合酶扩增技术研究进展

新冠疫情的暴发使核酸检测家喻户晓,荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术是此次防疫使用最多的核酸检测方法,但因对操作人员、仪器及场地的要求较高限制了其在某些资源匮乏或者实验室外场景的应用.恒温扩增技术特别是重组酶聚合酶扩增(RPA)技术具有反应条件温和、灵敏度高、特异性好、反应时间短等优点,在多种病原微生物的快速检测中具有...     

药物杂质遗传毒性评价策略与监管研究

伴随大量创新及仿制药面世而来的是对遗传毒性杂质加强监管的迫切需求。一系列与国际接轨的指南性文件的出台,弥补了我国杂质监管的空白,但难点尚存。传统评价方法具有局限性,新方法与传统方法间缺乏一致性比较,药物特定合成路线实际产生的大量含警示结构杂质缺乏毒理学评价数据支持,毒性预测软件的预测效力不足等。本文就国内外杂质遗传毒性杂质监管科学现状、遗传毒性杂质控制策略、杂质遗传毒性评价方法进行论述,并提出充分结合计算机毒理学、毒性评价方法和符合我国国情的监管限度制定三个维度开展杂质监管工作。     

毫火针针刺结筋病灶点联合常规针刺治疗疼痛期肩周炎临床研究

[目的] 观察毫火针针刺结筋病灶点联合常规针刺治疗疼痛期肩周炎患者的临床疗效。[方法] 64例疼痛期肩周炎患者随机分为治疗组和对照组,每组32例。对照组给予常规针刺,治疗组在常规针刺基础上加用毫火针针刺结筋病灶点,两组疗程均为14 d。观察并比较两组治疗前后McGill疼痛问卷（SF-MPQ）量表、Constant-Murley量表以及简明健康状况调查表（SF-36）评分、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）水平变化情况,并评估临床疗效。[结果] 两组患者治疗后SF-MPQ量表评分明显低于治疗前（P<0.05）,Constant-Murley量表评分及SF-36量表评分均明显高于治疗前（P<0.05）,血清TNF-α、IL-6水平均明显低于治疗前（P<0.05）。治疗组对SF-MPQ量表、Constant-Murley量表、SF-36量表评分及TNF-α、IL-6水平的改善均明显优于对照组（P<0.05）。治疗组临床总有效率为93.75%,明显高于对照组75.00%（P<0.05）。[结论] 在常规针刺基础上加用毫火针针刺结筋病灶点治疗疼痛期肩周炎能有效减轻疼痛,改善关节活动功能,提高患者生存质量,降低炎性指标,提高临床疗效。