新型低基础表达Tet-on基因表达系统的构建与鉴定

目的:构建一种新型的具有更低基础表达的Tet-on调控系统,以用于毒性蛋白及 RNA病毒的真核细胞调控合成.方法:对目前常用的Tet-on系统中的四环素调控蛋白(rtTA、tTS)的表达途径进行改进,使得在非诱导条件下调控蛋白的基础诱导活性进一步降低.结果:相比原有的Tet-on系统,新构建的Tet-on系统非诱导状态下的基础表达值下降了一半以上.结论:成功构建基础表达值更低的Tet-on调控系统,为真核调控表达毒性蛋白或合成 RNA病毒打下了基础.     

椎弓根钉内固定结合椎间融合或后外侧融合治疗腰椎疾患疗效比较

目的 比较观察椎弓根钉内固定结合椎间融合或后外侧融合治疗腰椎疾患疗效.方法 选取我院2008年1月至2011年1月收治的68例腰椎疾患患者,随机分为A组(椎弓根钉辅组椎间融合)和B组(椎弓根钉辅助后外侧融合)各34例,均行后路椎板减压术,短节段经椎弓根钉系统进行复位和固定,观察比较两组治疗效果.结果 A组患者的平均手术时间为(217.8±3.5)min,平均出血量为(749±11)mL;B组平均手术时间为(152.3±2.8)min,平均出血量为(446±9)mL,两组平均手术时间、平均出血量比较,差异具有统计学意义(P<0.05).A组植骨融合率为97.1%(33/34),B组植骨融合率为82.4%(28/34),两组术后矫正率比较,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 后外侧融合手术时间短、出血少、创伤小、疗效确切,术前可依据患者的病情合理选择手术方法,以获取最佳的疗效.     

应用空心拉力螺钉张力带钢丝固定治疗髌骨骨折体会

目的 探讨空心拉力螺钉张力带钢丝固定治疗髌骨骨折的疗效. 方法 自2003年1月起采用空心拉力螺钉张力带钢丝固定治疗40例髌骨骨折,均为闭合性骨折.6例老年患者有明显的骨质疏松. 结果术后随访4～12个月全部患者均获得临床愈合,平均临床愈合时间为8～10周.根据Bostman评分均达优良. 结论应用空心拉力螺钉张力带钢丝固定治疗髌骨骨折,临床效果满意,提高了固定的牢固性和稳定性,避免了传统张力带固定的并发症.     

下调miR-155通过抑制HIF-1α/VEGF通路增强人结直肠癌细胞的放射敏感性

目的:探讨miR-155对结直肠癌细胞SW620放射敏感性的影响及其特异性的作用机制.方法:将anti-miRNA-155和anti-miRNA-155 NC转染至结直肠癌细胞SW620,分别标记为anti-miR-155组和NC组;利用qRT-PCR检测细胞转染效率;对转染后的细胞进行电离辐射;经过电离辐射后采用克隆...     

基于网络药理学探讨独活-桑寄生治疗骨质疏松症的活性成分及生物学基础

目的运用网络药理学探究独活-桑寄生治疗骨质疏松症的活性成分,并通过筛选分析阐述独活-桑寄生治疗骨质疏松症的生物学基础。方法中药独活、桑寄生的活性成分及靶标通过中药数据库TCMSP、BATMAN检索出,骨质疏松症的预测靶点通过疾病靶点数据库Gene Cards检索出,将药物和疾病靶点进行映射,利用网络可视化软件Cytoscape3.6.0整理并筛选出核心成分及有效靶点,再将有效靶点通过Omic Share云平台进行GO富集分析、David6.8数据库进行KEGG通路富集分析。结果独活和桑寄生活性成分根据筛选条件得到核心成分共3个,分别为槲皮素、蛇床子素和补骨脂素;核心靶点24个,包括PTGS2、PTGS1、ESR1、ADRB2等;获得2 509条GO生物过程,包括对含氧化合物的反应、对有机物的反应、细胞对化学刺激的反应等; 193条分子功能,包括对酶结合、同一蛋白结合、信号受体结合等; 113条细胞组成,包括膜筏、膜微区、膜区等;获得KEGG信号通路12条,肿瘤坏死因子信号通路、低氧诱导因子-1信号通路、PI3K-Akt信号通路等为治疗骨质疏松症关键通路。结论独活和桑寄生配伍的多成分、多靶点、多通路通过抗炎和抗氧化的作用,从而治疗骨质疏松症,为中药复方治疗疾病的作用机制提供科学依据。     

内皮抑素对结肠癌肝转移的干预作用

目的研究血管生成抑制因子——内皮抑素（endostatin）对结肠癌肝转移的影响。方法32只裸鼠用脾脏切除法建立人结肠癌裸鼠肝转移模型,然后分为4组,每组8只。分别自腹腔注射生理盐水（对照组）、5-氟脲嘧啶(5-Fu)（治疗Ⅰ组）、endostatin（治疗Ⅱ组）以及5-Fu与endostatin二药联合（治疗Ⅲ组）,比较各组肝转移率。结果对照组、治疗Ⅰ组、治疗Ⅱ组和治疗Ⅲ组肿瘤肝转移率分别为100%、75%、25%和25%。治疗Ⅱ组和治疗Ⅲ组肝转移率低于对照组及治疗Ⅰ组,差异有显著性意义（与对照组比较P＜0.01;与治疗Ⅰ组比较P＜0.05）。endostatin及endostatin与5-Fu联合应用使肿瘤肝转移率明显降低,平均肝转移瘤数下降,动物的生存期延长。结论endostatin可有效地干预结肠癌肝转移的形成,较5-Fu有更大的临床潜在应用价值。     

用Red系统敲除大肠杆菌O157:H7的ecs4553以及ecs4563基因

目的:用Red系统快速敲除肠出血性大肠杆菌O157:H7中的分子伴侣基因,构建EHEC O157:H7的突变体.方法:本研究首先合成一对引物(每一条的5'端与ecs4553或者ecs4563基因同源,3'端与卡那霉素抗性基因同源),用pKD4为模板扩增出带有卡那霉素抗性基因的PCR产物,然后电击转化至大肠杆菌中,在λRed重组系统的帮助下,通过卡那霉素抗性基因两侧的ecs4553或者ecs4563基因序列在体内与ecs4553或者ecs4563基因发生同源重组,置换掉基因组中的ecs4553或者ecs4563基因,最后利用卡那霉素抗性基因两端的FRT位点,通过FLP位点专一性重组将卡那霉素抗性基因剔除.结果:获得了ecs4553或者ecs4563基因被精确敲除且不带卡那霉素抗性基因的EHEC O157:H7突变菌株.结论:为进一步研究EHEC O157:H7的致病机制奠定了基础.     

腺病毒介导内皮抑素基因预防大肠癌术后复发的研究

目的：研究腺病毒介导的内皮抑素对大肠癌术后复发的抑制作用。方法：构建内皮抑素的重组体腺病毒，观察转导表达后的生物学活性。建立人结肠癌术后局部复发裸鼠动物模型，分析基因转导后动物外周血内皮抑素水平、局部复发能力以及复发瘤的凋亡。结果：感染上清处理HUVEC细胞后，细胞增殖受到明显抑制。重组腺病毒注射后，动物外周血中内皮抑素水平显著增高，局部复发减少、瘤细胞凋亡增加。结论：内皮抑素重组体腺病毒的静脉注射，产生了内皮抑素基因在体内的长期高水平分泌表达，实现了大肠癌术后局部复发的有效预防。     

中医小夹板在桡骨远端骨折治疗中的应用进展

桡骨远端骨折是骨科临床常见的骨折类型。此类骨折损伤的严重程度主要与骨密度和暴力伤害的程度有关,其发病率随着人口老龄化逐年升高。治疗方法主要分为手术治疗和保守治疗2种形式。目前采用手术疗法治疗的较多,但术后常会出现并发症,影响腕部功能。中医小夹板疗法作为经典的保守疗法,在骨科临床治疗中发挥着重要作用。现归纳和总结手法复位配合传统、改良夹板联合中药内服、中药外用、针刺等其他疗法在此类骨折治疗中的应用,旨在挖掘中医小夹板疗法的特色与优势。