高功率微波辐照对心肌细胞和心脏间质细胞生存能力和细胞活力的影响

目的:研究高功率微波(high power microwave,HPM)对心肌细胞和心脏间质细胞生存能力和细胞活性的影响。 方法:实验选用出生后1～3d的二级Wistar大鼠,体外培养Wistar大鼠乳鼠心肌细胞和心脏间质细胞,于HPM辐照后,用流式细胞仪检测细胞凋亡和坏死;用MTT实验测定细胞活力。 结果:HPM明显影响心肌细胞和间质细胞功能和形态结构,辐照后细胞活力降低,凋亡和坏死。辐照后6h,心肌细胞和间质细胞凋亡率分别为(36.76±5.12)％和(42.38±6.0)％,坏死率分别为(34.14±6.5)％和(22.98±7.4)％,与对照组相比,有显著的统计学意义(P<0.001)。 结论:心脏是微波辐照的靶器官之一,HPM可对心肌细胞和间质细胞功能和形态产生明显影响。结果提示在探讨HPM对心脏损伤时,应同时关注对心脏间质细胞的影响。     

电磁辐射诱导乳鼠大脑皮层神经元凋亡的研究

目的　以体外原代培养的皮层神经元为对象 ,研究电磁脉冲 (场强为 6× 10 4 V m)辐射后早期神经细胞死亡和凋亡的变化情况 ,并探讨电磁脉冲的可能致伤机制。方法　于照射后 1h、6h、12h、2 4h和 48h分别采用MTT比色法和流式细胞术测定细胞活力和凋亡细胞的比例 ,用HE染色及TUNEL检测细胞凋亡并分别用普通光学显微镜和萤光显微镜进行凋亡观察。结果　电磁脉冲辐射后 ,神经细胞不仅发生快速的坏死 ,而且还发生细胞凋亡 ,于辐射作用后 12h达到高峰。结论　电磁脉冲辐射后早期可导致神经细胞凋亡和坏死 ,此改变可能与电磁脉冲致细胞DNA损伤有关。     

微波在病理技术中的应用

微波在病理技术中的应用纪小龙，曹晓哲，邓成焕（解放军总医院病理科北京１００８５３）自Ｍａｙｅｒｓ首次应用微波作为一种组织固定的方法以来［１］，１９７１年Ｓｃｈｍｉｄｔ认为应用微波固定后的组织进行组织化学分析时，所得结果比其它方法更可靠［２］，１９８６...     

非妇科领域应用液基细胞学与传统涂片细胞学参数的比较研究

目的通过液基制片(LBP)方法在非妇科脱落细胞学胸腹水领域中的应用,探讨液基细胞学制片方法在非妇科脱落细胞领域制片的优缺点及其应用前景。方法对本院25例胸腹水,应用液基制片,并同步与传统涂片进行了细胞形态学观察,免疫组化染色和荧光原位杂交(FISH)检测,并应用图像分析系统加以定量对比分析。结果定性观察发现,液基制片的细胞明显比传统涂片的细胞变小,细胞形态也发生了一定的变化;免疫组化LCA、EMA、Vim和PCNA染色与传统涂片染色未见明显不同,FISH检测结果,除酶消化时间较传统涂片延长5 min外,其他未见明显不同;细胞定量结果发现,液基制片的细胞面积比传统制片的细胞面积减少了58.1%(P<0.01),细胞周长减少了42.7%(P<0.01),细胞等效直径缩短了37.5%(P<0.01),细胞长径缩短了37.4%(P<0.01),细胞短径也缩短了37.8%,细胞长短径之比未见明显差异(P>0.05)。液基制片的细胞形状因子减小了18.12%(P<0.01),细胞圆形度增加了13.7%(P<0.01),细胞平均光度增加了57.1%(P<0.01),细胞积分光度减少了41.5%(P<0.01),细胞平均灰度未见明显差异(P>0.05)。结论液基细胞学制片明显缩小了目标细胞,其形态也发生了较明显改变,但不影响测试细胞进一步的免疫组化染色和FISH检测,在非妇科脱落细胞学领域的应用,对诊断医师具有较高适应训练要求,也仍具有进一步改进的空间。     

高功率脉冲微波辐照对大鼠血清激素水平影响的研究

目的：通过对高功率脉冲微波（HPPMW）辐照后Wistar大鼠血清中睾酮（Testo)、雌二醇（E2）、促甲状腺激素（TSH）、游离甲状腺素T4（FT4）、皮质醇（Cort)、醛固酮（Ald)及生长激素（HGH）的动态观察,以探讨HPPMW对内分泌系统的影响。用高功率脉冲微波源,以功率密度为3050W／cm^2脉冲微波（频率为5．4GHz,脉宽为26ns)辐照辐照组动物。于辐照后1h,6h,24h,7d,14d及28d分别采血,用放射免疫法在FT630放免疫定仪上进行统一测定。所有数据经SPSS8．0统计处理。结果：大鼠被辐照后,其血清E2在早期变化不明显,但在14d时明显升高（P＜0．01）;Testo辐照后1h和14d明显下降（P＜0．05）;TSH于辐照后逐渐升高,14d到28d时明显增高（P＜0．05）;FT4辐照后1h明显升高（P＜0．05）;TSH于辐照后逐渐升高,14d到28d时明显增高（P＜0．05）;FT4辐照后1h明显升高（P＜0．05）后逐渐降低,在28d下降到最低点（P＜0．01）;Cort辐照后1h即升高,14d达到峰值（P＜0．05）;Ald于照后6h-14d略低于对照组,28d恢复;HGH辐照后明显低于照前水平,在28d下降到最低点（P＜0．05）。结论LHPPMW可引起大鼠血清激素水平的紊乱。既有早期影响,也表现为一定的持续效应。提示HPPMW可能直接引起大鼠内分泌系统的损伤。     

宫颈癌组织中人乳头瘤病毒16E6基因突变分析

背景与目的：高危型人乳头瘤病毒（humanpa pillomavirus,HPV）以16型最为常见,HPV16E6是宫颈癌主要的致癌基因之一,特定的E6突变是宫颈癌发生的主要因素之一。本研究主要观察兰州地区宫颈癌组织中是否存在E6突变,并探讨了突变与宫颈癌发生的关系。方法：以23例宫颈癌手术切除标本及5例正常宫颈组织的DNA作为模板,PCR扩增HPV-16E6基因201-523位,PCR产物直接测序．分析其HPV16E6基因的突变规律。结果：PCR扩增结果表明5例正常宫颈组织中HPV16E6阳性率为0％（0／5）,宫颈癌组织中HPV16E6阳性率为82．61％（19／23）,对18例样本PCR产物的测序和序列分析结果表明,6例（33．33％）E6基因与原型相同,12例（66．67％）E6基因发生突变,其中11例（61．11％）发生了350G突变。同时,在1例样本（5．56％）发现了249G突变。结论：兰州地区宫颈癌组织中存在着非常高的HPV感染率,且多数HP116E6发生了突变。     

RNA干扰p53对肝细胞癌SK-Hep-1细胞细胞周期的影响

背景与目的: 肝细胞癌是严重威胁人类健康的恶性肿瘤之一, p53又是重要的抑癌基因,而RNA干扰(RNAinterference, RNAi) 不仅是一种经济、快捷、高效的抑制基因表达的技术手段, 而且有可能在肿瘤基因治疗方面提供新的途径。因此, 我们将外源性p53双链小RNA(smalldoublestrandedRNA, dsRNA) 瞬时转染肝癌SK- Hep -1细胞系, 观察其对肝癌细胞P53和P21蛋白表达及细胞周期的影响。方法: 合成的p53dsRNA和EGFPdsRNA, 分别以200ng和400ng的p53dsRNA用脂质体转染法转染SK- Hep- 1细胞, 同时设0. 9%NaCl空白对照和EG- FP及EGFP+EGFPdsRNA阳性对照组, 每组3个复孔, 分别在转染24h和48h时用流式细胞仪进行细胞周期检测, 对转染p53dsRNA48h后应用WesternBlot检测P53和P21蛋白的表达,初步探讨p53的dsRNA干扰对肝癌细胞影响的机制。结果: SK- Hep -1细胞在转染200ngp53dsRNA后G0 -G1 期细胞明显减少, 24h时与空白对照相比减少了52 .53%, 与转染同剂量EG FP+EGFPdsRNA的阳性对照组相比也减少了50 .29% (P<0. 05); S期细胞明显增多, 24h时与空白对照相比增加了146 8%, 与转染同剂量EGFP+EGFPdsRNA的阳性对照组相比增加了128. 62% (P<0 .05); G2-M期细胞也明显增多, 24h时与空白对照相比增加了30. 56% (P<0. 05),     

电磁脉冲辐照对培养大鼠垂体细胞上清中LDH、AST、CHE、K+ 和Na+ 的影响

对Wistar大鼠垂体细胞在6孔板中进行原代培养,在培养第4天时,用高场强EMP模拟源(场强为6×104 V/m,脉冲上升时间为20ns,脉宽为30μs),2min内辐照5次.并于辐照后0(即刻)、1、6、12和24h应用中生公司生化检测试剂盒测定培养上清中LDH、AST、CHE、K+、Na+浓度,探讨电磁脉冲对垂体细胞损伤的机制.结果表明,电磁脉冲辐照后即刻就可引起培养上清LDH和CHE明显升高;辐照后1和6h培养上清中LDH、AST、CHE、和K+明显升高;辐照后12h培养上清中LDH、AST和K+明显升高;辐照后24h所有上述指标基本恢复.结果提示,电磁脉冲辐照后可引起大鼠垂体细胞膜的损伤.     

ras癌基因产物P21蛋白在脑胶质细胞瘤中的表达

本研究采用HL-60白血病细胞系探讨了rhGM-CSF/IL-3融合蛋白对Ara-C介导的HL-60细胞凋亡的影响,结果表明,Ara-C与rhGM-CSF/IL-3联合应用处理HL-60比Ara-C单独作用更能显著提高寡核苷体DNA片段、抑制HL-60集落形成;rhGM-CSF/IL-3对Ara-C介导的HL-60细胞凋亡率的影响比不加rhGM-CSF/IL-3的对照组有明显提高,且比rhGM-CSF与rhIL-3联用作用更明显,但对正常人外周血白细胞作用较弱,提示可能对于rhGM-CSF/IL-3诱导缓解期白血病具有一定作用.     

HBx蛋白羧基端30个氨基酸缺失对肝癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨羧基端缺失了30个氨基酸的乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)突变体ΔHBx和野生型HBx对肝癌细胞Huh7生物学行为的影响。方法:脂质体介导pcDNA3ΔHBx和pcDNA3HBx重组体转染人HBV(-)的肝癌细胞Huh7。PCR扩增Neo基因及Western blot检测转染重组体。运用细胞生长曲线绘制、平板克隆形成、流式细胞仪和裸鼠成瘤实验对转染pcDNA3ΔHBx、pcDNA3HBx和pcDNA3的细胞生物学活性进行检测。结果:pcDNA3ΔHBx组细胞生长速度较pcDNA3HBx组和pcDNA3组减慢,其倍增时间延长;pcDNA3ΔHBx组克隆形成率较pcDNA3HBx组和pcDNA3组下降;细胞周期检测显示pcDNA3ΔHBx表达使Huh7细胞G0/G1期→S期的进程明显减慢。结论:HBx羧基端缺失了30个氨基酸的突变体比野生型HBx具有明显抑制细胞增殖的能力,提示该区域对于HBx功能发挥起着至关重要的作用。