TNF-α、IL-6在6-OHDA诱导帕金森病大鼠脑中的改变

目的 探讨6-羟多巴胺(6-Hydroxydopamine,6-OHDA)诱导帕金森病大鼠模型脑中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平的改变.方法 取SD大鼠80只,随机分成模型组与对照组,每组又分1,7,14,21 d亚...     

构建携带EGFP标志人白细胞介素10基因的重组腺病毒载体

目的 构建携带EGFP标志人白细胞介素10(hIL-10)基因腺病毒载体.方法 以pSNAV2.0-hIL-10重组质粒为模板.PCR扩增hIL-10基因,获得hIL-10 cDNA片段,并酶切连接到带有含强绿色荧光蛋白基因(EGFP)标记的pDC316-IRES-EGFP-lacZalpha载体质粒上,Pmel线性化重组质粒pDC316-hIL-10-IRES-EGFP,与腺病毒包装系统AdMax转染293包装细胞,包装产生复制缺陷型重组腺病毒,经反复感染293细胞扩增病毒后,进行离子交换法纯化病毒,并测定病毒颗粒数、滴度.结果 经PCR鉴定、限制性酶切分析及序列测定,证明已正确构建重组穿梭质粒pDC316-hIL-10-IRES-EGFP和重组腺病毒质粒Ad-hIL-10-IRES-EGFP.扩增纯化后.测得重组腺病毒颗粒数为3.2×1011VP/ml,OD260/OD280值约为2.0,滴度为1.1×1010TCID50/ml.结论 成功构建了重组腺病毒质粒Ad-hIL-10-IRES-EGFP,为进一步研究hIL-10基因奠定实验基础.     

阴道恶性黑色素瘤临床病理分析

女性生殖器官恶性黑色素瘤（以下简称恶黑）发病率较低,其中阴道恶性黑色素瘤占女性阴道恶性肿瘤的3％。为提高对阴道恶黑的认识,本文报告1例阴道恶黑结合文献并进行临床病理分析。     

不同培养代数大鼠骨髓基质细胞向神经元样细胞转分化能力的比较

为确定诱导大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)向神经元样细胞转分化的适宜培养代数,本研究比较了不同培养代数的BMSCs的转分化潜能。首先体外培养大鼠BMSCs并传代,于不同的培养代数利用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、神经生长因子(NGF)、全反式维甲酸(RA)、音猬因子(Shh)诱导分化,随后运用免疫荧光法和免疫印迹法检测诱导细胞中的神经元样细胞。结果显示骨髓基质细胞体外培养1至3代时能够被诱导分化为神经元样细胞,培养至第7代时丧失转分化为神经元样细胞的潜能。上述结果提示:传代次数增多将引起BMSCs自发分化,使其向神经元样细胞转分化的能力下降,因而BMSCs培养至第3代时适宜进行诱导分化。     

异种羊脱细胞真皮基质与自体微粒皮复合移植后创面愈合及COX-2、VEGF的表达研究

目的 制备异种羊脱细胞真皮基质(ADM),观察异种羊ADM与自体微粒皮复合移植的组织学变化,以及免疫组化法检测环氧化酶-2(COX-2)、血管内皮生长因子(VEGF)在复合移植过程中的表达.方法 用0.25%胰蛋白酶和0.5%曲拉通(Tritonx-100)溶液联合脱细胞法制备异种羊ADM.以48只wistar大鼠为动物模型随机分为2组,每组各24只,背部做4 cm×3 cm全层皮肤缺损,分组采用羊ADM+自体微粒皮+异体皮(实验组)及自体微粒皮+异体皮(对照组)覆盖,术后2、4、6周观察植皮区愈合情况,检测创面收缩率;同时,在以上不同时间段处死大鼠做组织病理学观察及免疫组化检查.结果 (1)通过实验可成功制备出合格的异种羊ADM,脱细胞异种皮的镜下观察可见基质中的表皮已经完全除去,胶原纤维粗细均匀,排列规则,没有细胞成份存在.(2)进行移植术后,观察6周,两组皮片创面基本愈合,两组创面收缩率差异具有统计学意义(P<0.05),实验组术区收缩程度低,组织学检查可见成纤维细胞和血管长人,胶原纤维、弹力纤维结构排列规则;对照组创面收缩明显,组织学检查见成纤维细胞和血管无规则生长,胶原纤维、弹力纤维结构排列紊乱.两组大鼠创面COX-2、VEGF表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 异种羊ADM在彻底脱除了基质中有免疫原性的细胞成分的同时,又保留了组织的基本结构,成为极低抗原性的真皮支架,是一种良好的真皮替代物;异种羊ADM与自体微粒皮复合移植后外观和功能优于自体微粒皮移植;COX-2,VEGF可能参与了创面的修复.     

放射性核素^125I与神经生长因子的偶联及条件优化

目的: 探讨放射性核素125I与神经生长因子(nerve growth factor,NGF)偶联的最优反应条件.方法: 采用联结标记法进行125I与神经生长因子偶联反应,在125I投料量固定为37 MBq的条件下,改变NGF的投料量分别为20,50,100,150 μg,同样的条件下反应后以三氯醋酸沉淀法计算产率.将产物保存于4℃,于1,2,3,5,7天,2,3,4周时间点检测产物的放射性化学纯度,评价产物的体外稳定性.结果: 当NGF投料量由20 μg增加到50 μg时,125I-NGF产率由76.6%迅速增加到79.0%,当继续增加NGF投料量至150 μg时,125I-NGF产率仅增加1.2%.经过连续4周观测,本标记方法的产物125I-NGF在体外4℃储存条件下未发现明显脱碘,放射化学纯度始终大于80%.结论: 125I与神经生长因子偶联的理想原料配比为37 MBq 125I与50 μg NGF进行反应,该条件下的产物125I-NGF放射性浓度为97.31 MBq/ml,放射性比活度为584.6 MBq/mg.     

团体心理干预对糖尿病伴抑郁患者的影响

目的探讨应用团体心理干预对2型糖尿病伴抑郁患者糖代谢、心理状况及生活质量的影响。方法采用Zung自评抑郁量表（SDS）对巴南区人民医院就诊的250例2型糖尿病患者进行调查,筛选2型糖尿病伴抑郁者82例,再按抑郁程度分层随机抽样将其分为团体心理干预组（干预组）和对照组。对照组患者采用降血糖、降血脂药物治疗,干预组在此基础上辅以团体心理干预。团体心理干预前后对全部被试者进行空腹血糖、糖化血红蛋白和生活质量测量。结果对照组治疗后的空腹血糖及糖化血红蛋白水平分别为（7.21±0.31）mmol/L和（6.89±0.29）%,而干预组则分别为（5.01±0.29）mmol/L、（5.12±0.32）%,干预组明显低于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）;干预组治疗后的生活质量、生理因素、社会关系及治疗因素等四个维度的分值均明显低于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论团体心理干预可以有效降低2型糖尿病伴抑郁患者的空腹血糖及糖化血红蛋白水平,改善糖尿病患者的生活质量。     

褪黑激素体外定向诱导骨髓间充质干细胞的研究

目的:探讨褪黑激素(melatonin,MT)体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)不同时段向神经细胞分化的情况。方法:采用细胞培养技术分离培养和纯化大鼠MSCs,以MT为诱导剂诱导大鼠MSCs向神经细胞分化。分别在诱导后3,7,10,14 d以免疫荧光法测定神经干细胞特异性标志(nestin)、神经元细胞特异性标志(neurofilament,NF)和星形胶质细胞特异性标志(GFAP)的表达。结果:MT诱导分化3 d,部分细胞胞体收缩成三角形,有些成为简单的双极或多极细胞。诱导3 d细胞开始表达nestin,7~14 d表达nestin和NF,细胞不表达GFAP。结论:MT可诱导大鼠MSCs分化为神经细胞。     

运动神经元病与颈椎病或颈椎间盘突出症并存20例报告

运动神经元病 (MND)常与颈椎病或颈椎间盘突出症合并存在 ,临床有时只诊断其中一种病 ,而对另一种病发生漏诊。本文报告 2 0例两者并存的病例 ,根据各自的临床特点确立其诊断 ,为进一步认识这些疾病并存的可能性 ,减少临床上漏诊 ,特作如下分析。1　临床资料1.1　 MND诊断标准 :隐袭起病 ,呈进行性进展 ;具有上或 /和下运动神经元损害的临床表现 ;无客观感觉障碍、共济失调及括约肌功能障碍 ;肌电图示神经源性损害 ;实验室检查包括脑脊液、 X线摄片、 CT或 MRI等已除外肿瘤、炎症、血管病变等。1.2　颈椎病的诊断标准 :(1)有不同程度颈…