游离空肠复合镍钛合金网重建犬气管的实验研究

目的:探讨游离空肠复合镍钛合金网进行气管重建的可行性.方法:选健康杂种犬10只,对照组1只,实验组9只.两组均切除5 cm长颈段气管,采用吻合血管的游离空肠替代缺损气管段,空肠内置入T形硅腔管作临时内支架,实验组空肠浆膜面外套镍钛合金网作为外支架,对照组未采用镍钛记忆合金网作为外支架.术后1 mo拔除T形硅胶管,行纤维内窥镜、CT检查,3,6 mo处死动物,行大体标本观察、光镜组织学检查.结果:对照组拔除T形管后行纤维支气管镜检查可见肠蠕动,且管腔塌陷,拔管后出现明显呼吸困难,当即死于窒息.实验组有1只死于术后24 h内,2只拔除T形管后,行纤维支气管镜检查见移植空肠全部坏死,镍钛合金网暴露于气道中,2只拔除T形管后,行纤维支气管检查见移植空肠大部存活,仅上下吻合口处部分肠壁坏死,余下4只拔除T形管后,行纤维支气管检查见移植空肠全部存活,吻合口无明显肉芽形成,未见明显肠蠕动,CT显示新气管管腔通畅.全部实验犬术后1～2 mo内有不同程度的咳嗽,未发现因肠液分泌过量所致肺部感染致死者.结论:采用游离空肠复合镍钛合金网重建长段气管,为解决重建气管的血运和管腔通畅,达到重建气道提供了一种方法,但应用于临床仍需慎重,还应作进一步的研究.     

异种骨载体复合骨形态发生蛋白修复兔甲状软骨缺损的实验

目的:观察应用重组合骨修复兔甲状软骨缺损的效果,探讨其作为喉气管修复材料的可行性。方法:实验于2003-10/2004-11在第四军医大学唐都医院耳鼻咽喉科教研室实验室完成。取新西兰大白兔32只,随机分成空白对照组、单纯异种骨组、经脱脂、脱钙处理的异种骨作为载体复合骨形态生成蛋白(1∶20)的重组合骨组。制造兔甲状软骨缺损模型,于缺损处分别植入肌肉、单纯异种骨及重组合骨。分别于术后4,8,16周以及12个月观察局部及应用CT检查和造模处局部组织切片苏木精-伊红染色了解成骨和修复情况。结果:①局部观察:空白对照组缺损部位由瘢痕组织修复,在各时间点未见新骨形成。单纯异种骨组可见植入物被软组织包膜包裹,并逐渐被吸收,至16周基本完全吸收。重组合骨组可观察到植入物被吸收的同时有新骨诱导形成,16周局部有松质骨样组织形成,质地较硬,12个月后无明显变化。②组织学观察:见空白对照组无新骨形成,局部为新生瘢痕组织替代。单纯异种骨对照组可见局部有炎细胞浸润,植入物孔洞内有细胞长入,8周时植入物部分吸收,16周及12个月后缺损处异种骨基本完全吸收,为纤维组织替代修复,无明显新骨形成。重组合骨组4周可见植入处大量软骨组织诱导分化,在植入物松质骨空洞内可见组织细胞长入,周边有纤维组织包膜,以及炎细胞浸润,8周可见新骨形成,16周原植入物吸收,有大量骨基质形成并为纤维组织包绕。12个月后无明显变化。③CT检查:单纯异种骨与对照组8周左右大部分植入物被吸收,16周组织局部无骨组织显影。重组合骨组16周及12个月后局部有新骨形成,且气道形态维持良好,呼吸道通畅。结论:重组合骨具备支架的骨引导作用,其诱导成骨效果良好,是理想的喉气管修复材料。     

人骨髓间充质干细胞体外培养及生物特性的观察

目的：观察人骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs)在体外培养的生物学特性和作为组织工程的种子细胞的可能性。方法：将人骨髓MSCs自骨髓中分离、纯化和培养，观察原代和传代培养的增殖及生长特征。结果：原代培养及传代培养显示，在体外培养条件下人骨髓MSCS有活跃的增殖能力。结论：体外获得的人骨髓MSCs的生物年龄较为年轻，可以为组织工程的进一步研究提供种子细胞。     

气管成形术后再狭窄的原因及处理

目的：探讨气管成形术后再狭窄的原因及处理。方法：回顾分析我科20年来收治的气管成形术后发生再狭窄的15例病例，分析了发生的原因及其中13例2—5次手术的治疗经验。结果：15例中13例经再次手术治疗，1：2例已拔管痊愈，1例尚在继续治疗中，2例采用非手术治疗。结论：气管软骨支架缺损及气管内长肉芽是引起气管成形术后再狭窄的主要原因。     

25080只眼连续褥式埋线法重睑术

本文采用连续褥式埋线法重睑术２５０８０只眼临床证实不仅可以美容，还可以广泛应用于临床治疗眼睑下垂、倒睫等。它操作简便，破坏组织结构少，重睑形态自然流畅。同时，介绍了术前设计、手术方法，并就间断缝合埋线法等有关问题进行了对比及讨论。     

瞬态诱发耳声发射在新生儿听力筛查中的临床应用

目的:分析新生儿听力筛查结果,为先天性听力损失患儿早期诊断和干预提供依据.方法:采用瞬态诱发性耳声发射对正常新生儿5218例(正常组)和因各种疾病转入新生儿科治疗者632例(高危组)进行听力筛查,初筛未通过者,生后42天复筛,复筛未通过者,3个月左右行听性脑干反应(ABR)诊断性检查.结果:接受初次筛查的新生儿中,5746例通过筛查,通过率为98.23％;初筛未通过的420例新生儿全部进行复筛,复筛通过者359例,通过率为85.47％;总通过率为98.75％,男女性别间差异无统计学意义(P＞0.05);正常产儿初筛通过率为96.44％,高危儿初筛通过率为78.56％,差异有统计学意义(P＜0.01).三个月接受ABR检查56例,确诊听力障碍25例.高危组听力损失检出率9.49‰(6/632),正常组听力损失检出率3.83‰(2/5218),高危儿听力损伤的检出率远高于正常新生儿.结论:应用瞬态诱发耳声发射技术对新生儿进行听力筛查,及早发现新生儿听力缺陷并进行早期干预,可促进语言发育.     

获得性气管食管瘘的病因及防治

气管食管瘘是临床上少见而难治之症,文献报道较少,常见原因是创伤、甲状腺和食管的恶性肿瘤或原因不明[1～3],其次是医源性损伤.我科自1995年8月～2006年7月共收治气管食管瘘患者12例,取得了良好的治疗效果,现报告如下.     

低剂量水杨酸钠大鼠耳鸣模型的建立

目的探讨低剂量水杨酸钠诱导耳鸣动物模型。方法 SD大鼠14只,随机分为实验组(条件反射消退期连续2 d腹腔注射120 mg/kg水杨酸钠)和对照组(注射相同剂量生理盐水)。在大鼠形成"声音出现-饮水开始,声音消失-饮水停止"的条件反射后,在条件反射消退期比较实验组和对照组大鼠的饮水抑制率(R)值、饮水量和注射水杨酸钠前后实验组大鼠听性脑干反应(ABR)Ⅲ波的阈值。结果消退期前3 d实验组大鼠R值均较对照组大鼠增高并有显著性差异(F=32.48,P<0.05:F=1 00.6,P<0.05:F=16.06,P<0.05);两组大鼠的饮水量却无统计学差异(P>0.05);实验组大鼠注射水杨酸钠前后ABRⅢ波的阈值并未改变。结论剂量为120 mg/kg的水杨酸钠可以诱导大鼠产生持续3 d的耳鸣。     

儿童喉乳头状瘤细胞的原代培养及生物学特性研究

目的　探讨人乳头状瘤病毒 (humanpapillomavirus,HPV)感染阳性患儿喉乳头状瘤细胞在体外培养的生物学特性。方法　 2 0 0 0年 3月～ 2 0 0 1年 4月采用组织块培养法培养 10例 12例次喉乳头状瘤患儿手术的标本———HPV感染阳性患儿喉乳头状瘤细胞 ,观察其生长情况 ,计数法绘制细胞生长曲线 ,运用共同引物聚合酶链反应 (polymerasechainreaction ,PCR)法及核酸分子斑点杂交方法对喉乳头状瘤细胞在培养前后的HPVDNA进行检测。结果　HPV感染阳性的喉乳头状瘤细胞在体外生长时间可长达 6周 ,培养前后细胞内均含有HPV的DNA。细胞生长分为 3期 ,延缓期、生长期及停滞期。培养前 1～ 4d细胞从组织块中大量游出 ,5～ 7d为延缓期 ,此期间细胞渐渐开始贴壁 ,8～ 18d为生长期 ,细胞数目迅速增多 ,生长速度很快 ,继而进入停滞期 ,细胞数目增长缓慢 ,细胞空泡化明显 ,渐渐走向死亡。结论　HPV感染阳性的喉乳头状瘤细胞在体外生长情况良好 ,但要建立HPV感染阳性的喉乳头状瘤细胞的动物模型尚需进一步研究     

血管内皮生长因子反义RNA抑制人喉鳞癌的生长

目的　观察血管内皮生长因子1 6 5反义 RNA对人喉鳞癌细胞 Hep- 2的作用 ,探讨其治疗喉癌的可行性 .方法　采用亚克隆技术 ,构建并鉴定反义 VEGF1 6 5真核表达载体 ;重组质粒转染人喉鳞癌细胞 Hep- 2后 ,将其接种于裸鼠皮下 ,利用原位杂交、EL ISA、激光共聚焦、图像分析及微血管计数等方法 ,观察转染前后 Hep- 2细胞的生物学性状和致瘤性的改变 .结果　构建的 VEGF1 6 5反义真核表达载体在 Hep- 2细胞中获得表达 ,转染后的细胞 VEGF1 6 5的表达下降 70 % ,其生物学性状不受外源基因表达的影响 ,但其在裸鼠皮下的致瘤性和血管生成能力明显下降 ,实验组、空载体组和对照组肿瘤体积分别为 (736± 2 6 2 ) ,(74 4 0± 335 )和 (772 0± 35 0 ) mm3(P<0 .0 1) ,微血管密度分别为 (9.6± 5 .4 ) ,(45 .5± 8.4 )和 (48.4± 7.6 ) mm- 2 (P<0 .0 1) .结论　 VEGF1 6 5反义 RNA能够显著减少喉癌细胞内 VEGF1 6 5的表达 ,具有抑制肿瘤生长和血管生成的作用 ,有望成为抗喉癌的新基因治疗手段 .