ErbB4基因miRNA干扰质粒的构建和有效性鉴定

目的构建ErbB4基因特异性miRNA表达载体并检测其有效性。方法设计合成大鼠ErbB4基因特异性miRNA前体寡核苷酸,构建ErbB4基因特异性的重组miRNA干扰质粒。从大鼠脑分离提取总RNA,经RT-PCR构建靶序列质粒,并将其与miRNA干扰质粒共转染HEK293T细胞,经实时定量RT-PCR技术鉴定其干扰有效性。结果与结论针对ErbB4基因的miRNA干扰质粒构建成功,并能够有效抑制其靶基因的表达。该质粒为后续ErbB4基因特异性miRNA慢病毒表达载体的构建及ErbB4的相关功能研究奠定了基础。     

抑郁症的发生和抗抑郁剂治疗与微管稳定性的关系研究

目的：大鼠海马微量注射秋水仙碱（微管特异性的解聚剂），干扰海马细胞微管的稳定性，探讨抑郁症的发生和抗抑郁剂治疗与微管稳定性的关系。方法：成年wistar雄性大鼠，双侧海马齿状回微量注射秋水仙碱（0．7μg/μL，2μL／侧）或者溶剂对照。术后9天，大鼠急性给予去甲丙咪嗪（DIM，30mg／kg，i．p．），通过强迫游泳实验观察微管稳定性与抗抑郁剂急性效应的影响；术后10天，     

防阿片复吸先导化合物和新药的发现

根据国内外现有的研究结果,防海洛因复吸药物的研究主要集中在两个方面。其一是以阿片受体为靶标的防复吸药物研究,其二是以非阿片受体作用系统为靶标的防复吸药物研究。后者将成为防海洛因复吸药物的研究重点。     

NMDA受体数量在吗啡增敏、耐受和依赖形成过程中的重要性

阿片受体激动剂可使阿片受体下调,而其拮抗剂则可使阿片受体上调,此上调与阿片药物作用增敏有关,因此阿片受体拮抗剂可用于防治阿片类药物所致耐受。近年来还发现NMDA受体拮抗剂可减轻或逆转耐受及依赖程度;相反,预先用NMDA受体拮抗剂则可加重耐受,表明NMDA受体在阿片类药物耐受形成过程中有作用。本文旨在研究纳曲酮和NMDA受体拮抗剂地佐环平(dizocilpine,MK801)在吗啡所致耐受和依赖过程中的作用以及对脑NMDA受体动力学(Kd,Bmax)的影响。方法　将大鼠随机分为6组:盐水-盐水组、盐水-吗啡组、纳曲酮-盐水组、纳曲酮-吗啡组、地佐…     

阿片和非阿片镇痛药在慢性疼痛中的药理作用

慢性疼痛是一种混合的病理生理学机制,是自发和诱发疼痛的复杂状态,对镇痛药的反应差别很大.尽管没有系统的实验依据,但阿片类镇痛药始终是治疗严重慢性疼痛的首选药物.环氧合酶抑制剂是治疗中的首选辅助药物,对急性疼痛几乎无效的抗抑郁药、抗癫痫药和静注局麻药,在一些慢性疼痛病例中显示出明显的长期疗效.NMDA受体拮抗剂盐酸氯胺酮和α2受体激动剂可乐定对急性和慢性疼痛都有效,并可减少阿片类药物的用量,但常伴有严重的副作用.辣椒素等局部用药和阿片类等鞘内给药对某些病人也有效.模拟人类慢性疼痛状态建立了一些实验动物模型,但至今这些模型的药理学特点还没有很好地确定.     

噻诺啡抑制羟考酮依赖的小鼠和大鼠戒断症状的实验研究

目的 观察噻诺啡时羟考酮依赖的小鼠和大鼠纳络酮催促后戒断症状的影响.方法 以5 d连续递增给药的方式建立羟考酮依赖的小鼠和大鼠模型,末次给药后采用纳络酮催促戒断,观测小鼠和大鼠戒断症状的发生.同时,噻诺啡伴随羟考酮给药,考查噻诺啡对羟考酮依赖的小鼠和大鼠纳络酮催促后戒断症状的影响.结果 噻诺啡(0.062 5,0.25,1.0 mg·kg-1)能显著抑制羟考酮依赖的小鼠戒断时跳跃反应和体重的降低;噻诺啡(0.25,1.0 mg·kg-1)能显著降低羟考酮依赖大鼠的戒断症状评分和体重的降低.在这两种动物模型上,噻诺啡抗羟考酮依赖作用强度均有剂量相关性.结论 噻诺啡可抑制羟考酮引起的小鼠、大鼠躯体依赖.     

R-苯异丙基腺苷介导的心肌延迟预适应与核因子-κB的关系

目的:进一步验证腺苷A₁受体激动剂R-苯异丙基腺苷(R-PIA)能否使大鼠心脏产生延迟药理性预适应,以及核因子-kappaB和Mn-SOD在其发生机制中的作用。方法:雄性Wistar大鼠,随机分为3组(n=12):生理盐水组、R-PIA组、R-PIA+DPCPX(特异性腺苷A₁受体阻滞剂)组。各组4只大鼠在用药24h,杀鼠获取左室心肌样品,待测心肌NF-κB结合活性(EMSA法)及Mn-SOD含量(ELISA法)。其余8只大鼠在给药24h,开胸结扎左冠状动脉前降支30min、再灌注120min,摘取心脏,用于梗塞范围测定(TTC染色法)。结果:R-PIA组心肌梗塞范围显著小于生理盐水组(P＜0.01),而R-PIA+DPCPX组与生理盐水组比较无显著性差异(P＞0.05)。R-PIA组心肌NF-κB结合活性与生理盐水组比较明显增强,其Mn-SOD的含量也显著高于生理盐水组(P＜0.01)。R-PIA+DPCPX组心肌NF-κB结合活性和Mn-SOD含量与生理盐水组比较无显著差异(P＞0.05)。结论:本研究提示R-PIA药理性延迟预适应与心肌NF-κB激活、Mn-SOD表达增加之间具有一定的关联性。     

阿片类物质对平滑肌的作用

阿片肽及其受体在中枢神经系统(脑、脊髓)分布广泛,这与阿片类药物的镇痛、依赖、耐受是密切相关的.由于其强大的中枢作用,人们很少注意和研究其外周作用.阿片肽及受体在外周组织也有广泛的分布.如豚鼠回肠是公认的μ、κ受体分布组织,是常用的利用外周神经研究中枢神经系统阿片类物质作用的工具.小鼠输精管上分布的是μ、δ、κ受体.兔输精管及叙利亚金仓鼠输精管上分别为δ、κ受体,它们可以作为研究阿片类物质的受体模型.在支气管上,不同动物受体亚型分布有所不同,牛支气管上以μ受体为主,κ受体为次;豚鼠气管上以κ受体为主;大鼠气管上主要分布的是阿片样受体孤儿受体(ORL1-R);人气管上主要分布的是μ受体.大鼠大动脉上广泛分布μ、δ、κ受体,而肠系膜动脉以μ受体为主.大鼠子宫平滑肌上分布μ、δ受体,以前者为主,输尿管以μ受体为主,可能存在κ受体.阿片肽及受体的外周分布与其外周作用密切相关.阿片类药物临床应用过程中,其治疗作用以外的副作用,如便秘、呕吐、胆绞痛、产程延长等,是由于其外周作用引起的.     

6β-纳曲醇与纳曲酮拮抗吗啡镇痛作用的比较6β-纳曲醇与纳曲酮拮抗吗啡镇痛作用的比较

目的比较6β-纳曲醇(6β-naltrexol,6β-NOL)与纳曲酮(naltrexone,NTX)拮抗吗啡的镇痛作用。方法用小鼠热板法和小鼠热辐射甩尾法,sc和ig两种途径研究6β-NOL和NTX拮抗吗啡镇痛作用的强度和有效时间。用放射配体结合实验研究6β-NOL和NTX对阿片受体的亲和力。结果小鼠热板法和甩尾法显示,6β-NOL的抗吗啡镇痛作用强度和有效时间分别约为NTX的(6.1±1.7)%和3～4倍;po拮抗吗啡镇痛作用强度约为sc的30%,与NTX相近。在受体水平,6β-NOL对阿片-mu受体的亲和力约为NTX的12.5%,这与它们在整体水平拮抗吗啡镇痛作用的强度相近。结论6β-NOL抗吗啡镇痛作用比NTX弱,但作用时间长。