刺尾鱼毒素对NG108细胞的毒性效应

目的：研究刺尾鱼毒紊(maitotoxin，MTX)对神经胶质瘤细胞(NG108)毒性作用机制，为探讨可能的防治途径提供理论依据。方法：采用噻唑蓝(MTF)比色法检测MTX对细胞的毒性。结果：NG108细胞对MTX的作用比较敏感。MIX作用4h内细胞存活率明显呈剂量、时间依赖性下降；毒素作用1h的LD50值为0．53ng／ml。MTX的细胞毒性与胞外Ca^2 浓度关系密切，随着胞外Ca^2 的升高，MTX的毒性增大，胞外无Ca^2 时，观察不到MTX对NG108细胞的毒性作用。硝苯地平可以明显抑制MTX的细胞毒性。结论：MTX是一种作用强烈的生物毒素，它对NG108细胞的毒性效应与胞内Ca^2 超载有关，Ca^2 通道阻断剂硝苯地平可在一定程度上抑制MTX的毒性效应。     

棉籽总黄酮在大鼠慢性应激模型中的抗抑郁活性及其对海马神经营养通路的影响

目的探讨棉籽总黄酮(代号CTN-T)的抗抑郁作用及其可能机理。方法连续15d以每日1次的频率给予大鼠一系列不可预知的应激刺激以建立慢性复合应激模型,每次应激刺激前给予CTN-T(50或100mg.kg-1,ig)或地昔帕明(10mg.kg-1,ip)。采用Videomex-V运动图像分析系统观察大鼠敞箱自发活动行为,ELISA法检测血清皮质酮含量,Western印迹法检测海马脑源性神经营养因子(BDNF)、磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(pCREB)、磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK1/2)蛋白表达水平的变化。结果慢性复合应激15d后,大鼠自发活动显著减少,血清皮质酮含量显著升高。海马BDNF,pCREB和pERK1/2蛋白表达显著下调。每次应激刺激前给予CTN-T或地昔帕明可逆转上述变化。结论CTN-T在大鼠慢性应激模型上具有抗抑郁作用,其作用机制可能与上调海马BDNF相关的信号传导通路活性,改善神经营养和神经可塑性有关。     

羟考酮精神依赖的形成与纹状体多巴胺释放的关系

目的考察羟考酮致精神依赖的潜能及其与纹状体多巴胺释放的关系。方法采用条件性位置偏爱实验观察大鼠精神依赖潜能;采用清醒动物脑微透析技术结合高效液相电化学检测纹状体透析液中多巴胺及其代谢产物3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)的含量。结果羟考酮(2.5,5.0mg·kg-1,sc,每日1次,连续8d)能使大鼠建立稳定的条件性位置偏爱;羟考酮(2.5mg·kg-1,sc)使大鼠纹状体细胞外液中多巴胺含量增加,同时其代谢产物DOPAC和HVA的含量也明显增加。结论羟考酮具有明显的精神依赖潜能,其精神依赖的形成可能与纹状体多巴胺的释放增加有关。     

μ阿片受体C末端相互作用蛋白筛选及功能研究

目的：MOR细胞内的磷酸化位点主要位于C-末端，本研究筛选细胞内与MOR的C末端有直接相互作用的蛋白，以研究其对MOR磷酸化、内吞、脱敏及复敏等过程的影响。方法：BaeterioMateh 细菌双杂交，为新发展起来研究蛋白与蛋白之间相互作用有效方法。PCR法扩增目的片断，双酶切后与载体连接。Western Blot验证蛋白表达。结果：以大鼠MOR（rMOR）cDNA为模板，PCR扩增C末端（末端340—398氨基酸）作为诱饵融合于pBT载体的入阻遏蛋白（λcI）上，命名pBT—C。Western Blot证明该诱饵蛋白表达正确。大鼠脑cDNA文库融合到pTRG载体的RNA多聚酶的α亚单位的N末端。两种重组质粒共同转入Screening Reporter报告菌后接种于选择性筛选培养基。共筛选得到154个克隆，通过双选筛选平板进一步确证为124个克隆。将双选得到的克隆与诱饵质粒分离，诱饵与阳性克隆两两共转在选择性培养基上再筛选以验证此克隆确实依赖于蛋白间的相互作用，排除自身激活作用。二次筛选确证19个阳性克隆，部分测序结果显示阳性克隆包括代谢相关氧化还原酶、肌动微管微丝形成相关蛋白、参与蛋白磷酸化的蛋白、热休克蛋白以及保守的跨膜受体等。结论：MOR的C-末端除了与蛋白激酶相互作用外，还与细胞内其他蛋白有相互作用。这就提示依赖与耐受的形成过程中可能有其他蛋白参与。     

β-内酰胺类抗生素对吗啡耐受及依赖作用

为了研究头孢曲松及其类似物是否具有对抗吗啡耐受及依赖作用和头孢曲松对抗吗啡耐受的量效关系，本文采用小鼠热板舔足模型及纳洛酮戒断模型对头孢曲松、头孢拉定和头孢替安等6种β-内酰胺类抗生素进行观察，并与生理盐水对照组比较。100 mg·mL^{-1头孢曲松和头孢噻肟在吗啡形成耐受模型后第10天可能最大镇痛百分率(PMAP)分别为74.95%和65.94%，与生理盐水组(22.99%)比较具有显著性。100和50 mg·kg-1头孢曲松对戒断实验小鼠30 min内平均跳跃次数为3.8和3.6，与对照组(20.9)比较具有显著性。结果表明，100 mg·kg-1头孢曲松和头孢噻肟对吗啡诱导的耐受和躯体依赖具有显著的抑制作用。头孢曲松具有剂量依赖性的抗吗啡耐受作用。}     

不同的阿片受体激动剂对环腺苷—磷酸第二信使系统的作用

目的研究吗啡（Ｍｏｒ）,美沙酮（Ｍｅｔ）,丁丙诺啡（Ｂｕｐ）二氢埃托啡（ＤＨＥ）和埃托啡（Ｅｔｏ）躯体依赖性差别的机制。方法 用ＮＧ１０８－１５细胞模型。观察不同的阿片受体激动剂对ｃＡＭＰ第二信使系统的作用。结果;细胞分别暴露于Ｍｏｒ,Ｍｅｔ,Ｂｕｐ各１０μｍｏｌ．Ｌ＾－１和ＤＨＥ,Ｅｔｏ各１０ｎｍｏｌ．Ｌ＾－１２４ｈ或７２ｈ后,用纳洛酮１０μｍｏｌ．Ｌ＾－１催促,Ｍｏｒ组ｃＡＭＰ水平明显反跳性或     

不同的阿片受体激动剂对环腺苷—磷酸第二信使系统的作用(英文)

目的:研究吗啡(Mor)、美沙酮(Met)、丁丙诺啡(Bup)、二氢埃托啡(DHE)和埃托啡(Eto)躯体依赖性差别的机制,方法:用NG108-15细胞模型,观察不同的阿片受体激动剂对cAMP第二信使系统的作用,结果:细胞分别暴露于Mor,Met,Bup各10 μmol·L~(-1)和DHE,Eto各10 nmol·L~(-1),24 h或72 h后,用纳洛酮10 μmol·L_(-1)催促,Mor组cAMP水平明显反跳性升高,其他各组cAMP反跳水平虽有一定程度的升高,但幅度较Mor组低得多.用Met,Bup,DHE和Eto替代处理Mor预处理48 h的NG108-15细胞,可使Nal催促的cAMP反跳水平明显降低,结论:Mor,Met,Bup,DHE和Eto对cAMP第二信使系统的作用明显不同,这与它们的躯体依赖性有关。     

L-四氢巴马汀对羟考酮依赖大鼠不同脑区单胺递质水平的影响

目的：观察L-四氢巴马汀（L-THP）对羟考酮依赖大鼠不同脑区单胺递质含量的影响，探讨L—THP对抗羟考酮依赖的机制。方法：以连续递增给药建立羟考酮依赖大鼠模型，L—THP伴随给药，采用HPLC—ECD法测定大鼠前皮层、海马、纹状体和伏隔核内多巴胺（DA）和5-羟色胺（5-HT）含量的变化。结果：与空白对照组相比，羟考酮依赖的大鼠纳络酮催促戒断后前皮层内DA、高香草酸（HVA）和5-HT含量明显降低，伏隔核内DA、3，4-二羟基苯醋酸（DOPAC）、HVA和5-HT含量明显降低，海马内DA、DOPAC、5-HT含量没有明显变化，而5-吲哚乙酸（5-HIAA）明显升高，纹状体内DA及其代谢产物DOPAC、HVA以及5-HT、5-HIAA含量明显降低；L—THP（10，20，30mg·kg^-1，ig）伴随给药，能不同程度抑制上述变化。结论：L—THP可抑制羟考酮依赖引起的不同脑区内单胺类递质含量的变化，提示LTHP对抗羟考酮依赖可能与调节多巴胺和5-HT系统相关。     

内皮素系统与心肌肥厚

心肌肥厚是心脏对神经介质和压力超负荷等应激反应的一种代偿性机制。内皮素(ET)作为一种具有强大血管收缩作用的活性多肽,在心血管系统,特别是血管内皮细胞、平滑肌细胞和心肌细胞,ET对正常功能的调节起着重要的生理作用。局部心肌组织中ET过度生成与心肌肥厚的发生密切相关,心肌组织中的ET-1通过与特异性的受体结合,并与局部组织中其它相关的血管活性物质相互作用,介导了心肌肥厚的发生和发展过程。内皮素通过ETA受体诱导心肌细胞的肥厚和心肌成纤维细胞的增生,ETB受体则在心肌肥厚的发生和发展中均起作用。内皮素受体作为新的药物靶点,已经成为人们研究的热点,相应的受体拮抗剂的研究也取得了很大的进展。     

抗高血压药药理应用的分析模型

随机临床试验已证实抗高血压药对降低心血管发病率和死亡率的重要作用。用抗高血压药治疗的每日用量和持续用药是恰当的 ,能获得降低或正常化血压水平的效果。但新近及早期报告表明 ,用抗高血压药治疗获得血压的有效控制者仅为相当少数病人 ,多数发生停药现象。现通过含有所有药物处方的有效数据库 ,提供总人群中抗高血压药药理应用的信息。本研究目的是提供一种模型 ,用于通过测定购于药房的药物来评估用药 ,有助于确定个人抗高血压治疗的适应证和确定续用、停用、改用抗高血压药治疗的费用。病人和方法　首次接受氨氯地平、阿替洛尔、福辛…