印迹基因H19对人绒毛膜上皮癌细胞JEG-3侵袭能力的影响

目的探讨印迹基因H19对滋养细胞侵袭能力的影响,以期从分子遗传学角度来阐明滋养细胞侵袭行为的调控机制。方法含人全长H19 cDNA重组真核表达质粒pRc/CMV经测序鉴定正确后,转染滋养细胞株JEG-3,观察其H19 mRNA表达和细胞侵袭力的变化。结果质粒转染JEG-3细胞的转染效率〉50%,转染目的基因H19后mRNA表达较对照组显著升高;转染目的基因后JEG-3细胞穿膜细胞数明显少于未转染组和空载体转染组。结论H19基因过表达可抑制JEG-3的侵袭能力,为H19调控滋养细胞侵袭行为提供了直接的实验证据。     

c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞生物学行为的影响

目的研究原癌基因c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞活力、肌成纤维细胞分化、Ⅰ型胶原分泌等生物学行为的影响。方法免疫组化检测皮肤成纤维细胞内c-Ski蛋白的表达，并在转染c-ski基因后，利用MTT法检测皮肤成纤维细胞增殖活力、免疫组化和RT-PCR检测Ⅰ型胶原分泌、α-SMA细胞免疫组化检测肌成纤维细胞分化的改变。结果大鼠皮肤成纤维细胞内有c-Ski蛋白的表达，且主要表达在细胞核内，c-ski可以以剂量依赖的方式增加皮肤成纤维细胞的增殖活力，并可降低Ⅰ型胶原蛋白和mRNA的水平，但不改变皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化过程。结论c-ski促进细胞增殖但降低胶原分泌的作用可能对促进创伤愈合、降低瘢痕形成有着重要的意义。     

ELITE ESP型流式细胞仪堵塞现象的快速排除

流式细胞仪所检测的细胞要求排列成单列且单个细胞直径 <1 0 0 μｍ。因此 ,制备细胞悬液十分重要 ,否则容易堵塞管道 ,给检测带来困难[1,2 ] 。过去一旦有堵塞现象发生就必须立即关闭仪器 ,卸下流动室的Ｆｌｏｗｃｅｌｌ把它浸泡入Ｃｏｕｌｔｅｒｃｌｅｎｚ液中过夜 ,然后用蒸馏水冲洗后安装。开机调节光斑位置 ,调节入射光、反射光位置、安装透镜 ;在Ａｃｐｕｉｓｉｔｉｏｎ状态下选择Ｆｌｏｗｃｈｅｃｋｐｒｏｔｏｃｏｌ方案 ,进行光路的反复调节 ,而光路的调节是ＥＳＰ流式细胞仪工作的一个难点 ,在多数状态下都要求专门的工程师上门服…     

RGS4在HUEVCs凋亡中的作用及地塞米松对其的影响

目的研究RGS4对常氧和低氧培养条件下HUEVC细胞凋亡的影响及地塞米松在其中的作用,以探讨RGS4在HUEVC细胞凋亡中的作用及地塞米松处理对其的影响。方法采用O2／N2／CO2三气培养箱模拟常氧和低氧条件培养HUEVC细胞,RGS4真核表达载体转染HUEVC细胞后采用流式细胞仪（Annexin-V-FITC-PI法）检测细胞凋亡。结果常氧条件下RGS4转染细胞和地塞米松处理对细胞凋亡无明显影响,低氧培养条件下细胞凋亡增加（P〈0．01）,RGS4转染后可使HUEVC细胞凋亡显著减少（P〈0．01）,地塞米松和RGS4同时处理后HUEVC细胞的凋亡与单纯RGS4转染无显著差别。结论RGS4不影响常氧条件下的HUEVC细胞凋亡,但可明显抑制低氧条件下的HUEVC细胞凋亡,地塞米松抑制细胞凋亡的作用可能与RGS4有关或者通过相同的细胞信号通路抑制低氧条件下的细胞凋亡。     

用科学的理念和方法带教医学实验技术专业实习学生

随着教育改革的发展和不断深化,本科生综合素质的培养日益受到高等院校和社会的关注[1].医学科学作为一门建立在理论假设和科学实验验证基础上的实验科学[2],对实验技术专业学生综合能力和整体素质的要求也越来越高.我们所在的分子生物学中心是国家重点实验室,承担了实验技术本科生的实习带教任务.     

腺苷A_(2A)受体在中枢神经系统损伤中的相关研究进展

中枢神经系统损伤以其高发生率和高死残率,已经成为紧迫的世界性公众健康问题,但目前还缺乏公认安全有效的疗法。腺苷A_(2A)受体(A_(2A)R)作为神经精神活动及中枢神经系统损伤的重要调控因子,引起了普遍的关注。目前,研究发现在中枢神经系统损伤中,激活A_(2A)R有加重神经损伤与神经保护的复杂作用。本文即对A_(2A)R在中枢神经损伤中的作用与机制进行探讨。     

原代成纤维细胞和纤维肉瘤细胞自分泌转化生长因子β1浓度检测及对转化生长因子β1增殖的调节

背景：体外实验常采用外源性转化生长因子β1刺激来观察细胞增殖变化,易忽略细胞本身自分泌转化生长因子β1的影响。目的：检测原代成纤维细胞和纤维肉瘤细胞(L929)自分泌转化生长因子β1的浓度和细胞增殖的变化。方法： Elisa试剂盒检测原代成纤维细胞和纤维肉瘤细胞各时相点细胞内和培养上清中生长转化因子β1水平。结果与结论：纤维肉瘤细胞内转化生长因子β1浓度随培养时间延长而升高,原代成纤维细胞内转化生长因子β1浓度随培养时间延长而降低;两种细胞培养上清转化生长因子β1浓度均随时间而上升,但纤维肉瘤细胞显著高于原代成纤维细胞 (P < 0.01),峰值时达到原代成纤维细胞的20倍;两种细胞增殖曲线在72 h内均随时间而显著增高(P < 0.01),同一时间点比较,纤维肉瘤细胞明显高于原代成纤维细胞。提示自分泌转化生长因子β1具有促进细胞增殖的作用,不同的自分泌水平可能是影响原代成纤维细胞这种正常细胞和纤维肉瘤细胞肿瘤细胞对于外源转化生长因子β1反应不同的重要原因。     

冲突与灾害知识（一）——灾后的公共卫生问题

灾难发生后，公共卫生机构必须详细地分析内乱、武装冲突、人口迁徙、经济崩溃和饥荒所产生的影响。在现代战争中，平民常常被当作攻击的目标，他们即使没有背井离乡，也会面临严重的公共卫生问题，其健康水平、医疗设施、供水系统、居住条件和农业生产等遭受严重的破坏，将导致营养不良性疾病和传染性疾病的急速增加。但是，只要提供充足的饮用水和卫生设施，及时接种麻疹疫苗，对腹泻脱水患者进行简单的治疗，为营养不良的人补充足够的营养和微量元素，并建立一套完善的保健监护系统，就可以极大地减少难民营中与严峻环境相关的疾病危险因素。