中药独活对AD和VD模型大鼠IL-4、TNF-α调节作用的实验研究

目的:探讨独活对AD和VD模型大鼠免疫炎性损伤的调节作用。方法:采用Aβ1–40蛋白所诱发AD模型、双侧颈总动脉持久结扎塑造VD模型,ELISA法测定血清IL-4、TNF-α含量。结果:独活治疗VD后潜伏期下降(P<0.05),AD和VD模型组IL-4含量下降(P<0.01),TNF-α含量升高(P<0.01),独活可显著改善上述指标的水平(P<0.01)。结论:独活对AD和VD模型大鼠免疫炎性损伤具有调节作用,尤其对VD的治疗作用更明显。     

pSFV1载体系统的改造

目的 获得具有多种稀有酶位点和CMVIE增强子/启动子及SV40晚期poly(A)加尾信号的pSFV1载体系统。方法 首先将含有多种稀有酶位点的人工接头插入到pSFV1的BamHⅠ和SmaⅠ位点（获得的载体称为mpSFV1)。然后在mpSFV1和辅助载体Helper2的SpeⅠ和SphⅠ位点分别插入SV40晚期poly(A)加尾信号和CMVIE增强子/启动子序列,以间接免疫荧光法检测构建的表达载体mpSFV1-A-CMV表达登革2型病毒PrME基因的效率。并用RT-PCR法鉴定辅助载体Helper2-A-CMV包装形成重组病毒的能力。结果 经PCR和酶切鉴定证明,接头,CMVIE增强子/启动子序列和SV40晚期poly(A)加尾信号序列均已导入pSFV1载体系统中;测序结果也与已知序列一致。间接免疫荧光法证明,PrME蛋白在BHK21细胞中获得了表达,同时,改造后的辅助载体也具有包装形成重组病毒的能力。结论 已将以RNA为基础的pSFV1载体系统构建成以DNA为基础的表达载体系统。     

新分离的冠状病毒与严重急性呼吸综合征病原关系的研究

目的　确定新分离的冠状病毒与目前流行的严重急性呼吸综合征的病原关系。方法　以用细胞培养法从严重急性呼吸综合征病例标本中分离出的冠状病毒为抗原 ,通过免疫荧光染色及中和试验测定严重急性呼吸综合征患者血清中抗新分离的冠状病毒的抗体 ,分析确定新冠状病毒与严重急性呼吸综合征的病原关系。结果　在临床确诊的 1 1 3份严重急性呼吸综合征患者血清标本中 ,99份检测出有抗新冠状病毒的抗体。 1 0对双份血清检测结果显示 ,后采集的血清抗体效价均比发病初期采集的明显增高 ,最高的升高 1 2 8倍。中和试验结果证明 ,病人血清抗体能够中和新分离的冠状病毒。结论　新分离的冠状病毒与此次流行的严重急性呼吸综合征密切相关 ,是目前流行的严重急性呼吸综合征的主要病原体     

我国登革2型病毒分离株生物学性质及其基因变化的研究

该项研究对我国不同地区(海南、广西),不同年代(1985—1987),不同分离来源(病人和蚊体)的登革2型病毒分离株的生物学性质如血凝活性、空斑形成、细胞病变及对乳鼠的致病性等方面进行了系统研究,结果表明1985年海南省登革热流行高峰期从病人分离的登革2型病毒04株生物学性质不同于其它分离株,并对乳鼠不致病。为进一步了解这种改变与基因变化的关系,对我国登革2型病毒分离株基因组一级结构从结构蛋白 C     

双极关节腔内脉冲射频联合臭氧注射治疗膝骨性关节炎的临床疗效

目的 观察双极关节腔内脉冲射频(IAPRF)联合臭氧注射治疗膝骨性关节炎(KOA)的临床疗效.方法 140例KOA患者随机分为两组,每组70例.联合组予以双极IAPRF联合臭氧注射治疗,对照组仅予以双极IAPRF治疗.分别于治疗前及治疗后1周、6个月和12个月比较两组患者VAS疼痛评分和骨关节炎指数(WOMAC)评分的...     

实时RT-PCR检测西尼罗病毒

目的建立西尼罗病毒快速、敏感和特异的实时RT-PCR法,用于西尼罗病毒疾病的早期诊断。方法对Vero细胞增殖的西尼罗病毒分别进行常规RT-PCR和实时RT-PCR法扩增,以PFU／ml为参考标准,比较二者的敏感性和特异性。并用实时RT-PCR法检测西尼罗病毒感染的小鼠组织标本。结果采用所建立的实时RT-PCR法和常规RT-PCR法可分别检测到0．02PFU／ml和2PFU／ml的西尼罗病毒RNA,前者的敏感性比后者高100倍。而对其他黄病毒科成员的检测均为阴性,表明该方法是特异的。采用这种实时RT-PCR法可从西尼罗病毒感染小鼠的血液、脾脏、肾脏和脑组织标本中检测出病毒核酸,且在感染后第2天最先自血液和脾脏中检测到病毒,在感染后1周的脑组织中的病毒滴度最高。结论本研究建立的实时RT-PCR法具有很高的敏感性和特异性,因此该方法可用于西尼罗病毒疾病的早期监测和流行病学研究。     

金黄色葡萄球菌核酸酶在大肠杆菌中的表达及其活性分析

目的:构建金黄色葡萄球菌核酸酶(SN)基因的原核表达载体,研究其在大肠杆菌中的表达,并制备兔抗SN抗体。方法:从质粒pPLCSN中扩增SN基因片段,插入表达载体pLEX后转化大肠杆菌GI724,以色氨酸诱导表达。以表达的重组蛋白免疫日本大耳白兔制备抗SN抗体,用Westernblot分析兔抗SN抗体的特异性。结果:重组表达载体pLEXSN在大肠杆菌中获得表达,表达的可溶性蛋白占菌体蛋白总量的37%,具有良好的生物学活性。制备的兔抗SN抗体能够特异识别SN。结论:成功地在大肠杆菌中表达具有生物学活性的SN,并制备了兔抗SN抗体,为进一步探讨其作为抗病毒因子应用于病毒性疾病的治疗奠定了基础。     

SETD2在恶性肿瘤中的表达及致癌机制的研究进展

组蛋白赖氨酸三甲基转移酶(SET domain containing 2,SETD2)基因位于人类第三号染色体短臂的2区1带(3p21.31)位点,长度约为147kb,编码人源含SET结构域蛋白SETD2,能特异性催化组蛋白H3第36位赖氨酸的三甲基化(Trimethylation of lysine 36 of Histone H3,H3K36me3)。SETD2参与DNA转录延伸、损伤修复、可变剪切、基因表达修饰、免疫应答、胚胎发育和血管生成等生物学过程。SETD2在肾细胞癌、胃癌、间皮瘤等多种肿瘤中都发生了突变或失活,主要通过抑制转录延伸、损伤修复、细胞周期进展、凋亡和细胞代谢等过程促进肿瘤的发生发展。SETD2的表达水平与癌症的临床病理参数和患者生存结局也密切相关。在肿瘤治疗上,SETD2的突变或失活可增强G2M细胞周期阻断剂、PI3K(磷脂酰肌醇3-激酶)-AKT(蛋白激酶B)抑制剂和铂类的抑癌效果,西奈芬近衍生物可直接靶向抑制SETD2蛋白,因此SETD2被认为是潜在的表观遗传治疗靶点,在相关癌症的诊疗研究中有较大的研究前景。     

我国登革3型病毒广西株基因组非编码区结构特征的研究

应用cDNA末端快速扩增法（RACE）,获得我国登革3型病毒株基因缓 的包括5‘和3‘端非编码区的扩增片段,经琼脂糖凝胶电泳观察其长度分别为710bp和470bp。序列分析表明,与登革3型病毒菲律宾株（H87株）核苷酸序列同源性＞99％。进化树分析提示,该株病毒属于登革3型病毒Ⅰ亚型。基因组的5‘和3‘端有含有较强的二级结构域。