双靶点伽玛刀治疗原发性三叉神经痛

1 对象与方法 2006年3月～2007年2月．我们治疗了48例原发性三叉神经痛病人，其中男28例。女20例；年龄25～79岁，平均59．6岁；病程0．3～25年，平均7．8年。疼痛分布：右侧26例，左侧22例；第1支2例，第Ⅲ支10例，Ⅰ＋Ⅱ支7例。Ⅱ＋Ⅲ支18例，Ⅰ＋Ⅱ＋Ⅲ支11例。均为长期服用卡马西平和反复多次封闭治疗无效者。其中1例行微血管减压术失败，1例行三叉神经感觉根切断术失败。行伽玛刀治疗前均经MRI检查，排除继发性三叉神经痛。[第一段]     

少突胶质细胞祖细胞高效分离培养及EGFP基因转染

目的：建立高效分离少突胶质细胞祖细胞（oligodendrocyte precursor cells，OPCs）的方法，并转染增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein，EGFP）基因。方法：采用2次接种培养和差速振荡分离，结合使用神经营养因子（bFGF、PDGF-AA），体外分离纯化和扩增培养OPCs，用抗A285、GFAP、CNPase免疫荧光抗体鉴定细胞类型。采用脂质体介导EGFP基因转染OPCs，筛选获得稳定表达EGFP的OPCs细胞。结果：分离培养的OPCs细胞呈A2B5阳性，纯度达到99％，具有增殖和双向分化的潜能（GFAP阳性的2型星形胶质细胞和CNPase阳性的少突胶质细胞），传代培养1个月仍具有增殖能力。EGFP基因转染后OPCS细胞能发出绿色荧光，并继续保持增殖分化特性。结论：二次接种培养和差速振荡分离法可获得高纯度OPCs细胞；EGFP基因转染可作为示踪OPCs迁移的有效方法。     

突变型早老素-1致维甲酸诱导PC12细胞ERp29表达增强及其意义

目的 探讨突变型早老素-1(PS-1)对维甲酸(RA)诱导PC12细胞基因表达的影响,寻找与阿尔茨海默病发病机制相关的基因.方法 分别建立表达突变型和野生型PS-1的经RA诱导的基因工程化PC12细胞,应用银染mRNA差异显示技术研究突变型PS-1对RA诱导的PC12细胞基因差异表达的影响.结果 成功建立了表达突变型和野生型PS-1的经RA诱导的基因工程化PC12细胞后,应用银染mRNA差异显示技术发现29型内质网蛋白(ERp29)在表达突变型PS-1的基因工程化PC12细胞中高表达,并与细胞凋亡密切相关.结论 突变型PS-1致细胞内ERp29的表达增强可能是内质网应激的结果,ERp29表达增强与阿尔茨海默病的发生与发展可能存在着密切关系.     

反义nov基因对培养神经元神经递质分泌的影响

目的：研究nov基因在神经元功能分化和神经递质分泌中的作用。方法：利用反义核酸技术构建成反义nov基因真核表达载体pBK-nov。采用脂质体转染技术，交坂义表达载体导入培养的大鼠大脑皮质神经元和纹状体神经元，经G418筛选出被转染的神经元继续培养，RT－PCR检测围染后nov mRNA的表达量。采用高效氨基酸分析仪和高效液相色说 ，检测抑制表达后氨基酸类递质和多巴胺类递质的变化。结果：谷氨酸和肾上腺素的分泌量明显下降，γ－氨基酸上升，而对多巴胺的分泌没有显著的影响。结论以上结果提示，nov基因在中枢神经系统神经递质的生成释放和代谢中起作用，可能籍此调节神经系统的功能。     

翼点入路颅咽管瘤切除术后视觉障碍临床分析

颅咽管瘤是位于鞍区及周围的上皮性肿瘤,本文总结了新桥医院神经外科2003年至2007年经翼点入路手术切除的31例颅咽管瘤病例的资料,旨在探讨经翼点入路颅咽管瘤切除术后并发视觉障碍的原因和预防处理措施。     

LeksellC型伽玛刀治疗三叉神经痛126例疗效观察

目的评价LeksellC型伽玛刀治疗三叉神经痛的疗效及相关因素。方法应用美国GE1．5TMRI定位,1．4mm无间距扫描,LeksellC型伽玛刀治疗三叉神经痛126例。治疗靶点为三叉神经半月节近感觉神经根入脑干段,采用4mm准直器,沿三又神经设置2个靶点。中心剂量为85~90Gy,以70％等剂量曲线覆盖靶点,脑干边缘剂量为15～16Gy。结果随访时间6～30个月,平均14个月。治愈95例,疗效显著19例,显效7例,无效5例,总有效率（治愈＋疗效显著＋显效）为96％。出现面部感觉异常等并发症9例。结论LeksellC型伽玛刀治疗三叉神经痛安全有效,但存在面部感觉异常等并发症,远期疗效有待评价。     

恶性胶质瘤细胞株U251中肿瘤干细胞放射敏感性的体外研究

目的 应用⁶⁰Co γ射线研究不同生存条件下恶性胶质瘤细胞株U251中肿瘤干细胞的放射敏感性。方法 ⁶⁰Co γ射线分别照射U251中的肿瘤干细胞及从U251中分离、培养的肿瘤干细胞后,采用TUNEL、Annexin-FITC等方法检测细胞凋亡,行裸鼠皮下移植以及应用流式细胞仪检测这两种不同生存条件下的细胞周期进程情况。结果 体外单独体外存活的肿瘤干细胞处于活跃的细胞周期进程中,对射线敏感,经⁶⁰Co γ射线照射后凋亡细胞明显增多,裸鼠皮下移植后不再成瘤。而在U251细胞中存活的肿瘤干细胞处于G₀-G₁期,对射线抗拒,裸鼠皮下移植后继续分化成为亲本肿瘤的胶质瘤类型。结论 恶性胶质瘤细胞株中的肿瘤干细胞因对射线抗拒而有可能成为胶质瘤经过放射治疗后原位复发的原因。     

中间丝蛋白vimentin在非洲爪蛙嗅球发育过程中的表达及意义

中间丝蛋白vimentin在嗅球发育中作用还没有被阐明,本研究目的是探讨vimentin在嗅球发育中时空模式及其意义。选择23～63期幼年和成年非洲爪蛙,做包含嗅神经和嗅球的连续冰冻切片,切片厚20μm,然后进行vimentin和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色,荧光显微镜观察。结果显示,vimentin在发育早期开始表达,一直维持整个变形期及成年。在49期以前,脑室前脚附近的放射性胶质细胞可见呈直的平行状的免疫反应。在变形前期和变形期,嗅球的每一层均可见到vimentin免疫反应,在嗅小球及僧帽细胞层vimentin阳性的放射胶质突起形态上呈丛状。在成年脑室附近的颗粒细胞层vimentin染色强度占优势,这反映了其在不同发育期的功能。结果提示,vimentin阳性的放射性胶质细胞,在早期及变形期可能为嗅神经元轴突的进入和嗅小球的形成提供适应的环境。而在成年,这种激活的胶质细胞可能与嗅球保持很强的再生能力有关。     

银染mRNA差异显示方法的改进与优化

目的 对银染mRNA差异显示方法进行改进与优化,建立具有良好重复性和稳定性的银染mRNA差异显示新方法.方法 通过对银染mRNA差异显示方法中的PCR参数进行优化以及凝胶电泳和加样方式进行改进.结果 经改进与优化的银染mRNA差异显示方法具有良好的重复性、稳定性,差异条带清晰易辨.结论 经改进和优化的银染mRNA差异显示方法具有良好的重复性、稳定性,可以代替传统的放射性同位素方法,应用于基因差异表达的研究.     

变形期非洲爪蛙嗅觉系统胶质原纤维酸性蛋白和波形蛋白的时空表达

目的研究非洲爪蛙(Xenopus laevis)在变形期(48—63期)嗅觉系统中胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)和波形蛋白(vimentin)的时空表达与特点。方法取发育48期(stage)到63期不同阶段幼蛙及成年蛙嗅觉系统组织,常规制成冰冻切片,选每张切片上同时包含鼻、嗅神经、嗅球的切片进行GFAP、波形蛋白等抗体的免疫荧光化学染色,用荧光显微镜观察、记录结果。结果非洲爪蛙进入变形期(48期)后,嗅神经呈GFAP-IR强阳性反应,但在嗅球,仅嗅神经层为GFAP-IR阳性反应,嗅小球(glomemli)呈GFAP-IR阴性反应;而波形蛋白-IR阳性细胞的分布与GFAP-IR阳性细胞相反,在嗅小球可见典型的波形蛋白-IR阳性的放射状胶质细胞,而嗅神经却是波形蛋白阴性。结论发育过程中GFAP与波形蛋白免疫反应阳性细胞呈互补的方式分布在蛙嗅觉系统中,即GFAP-IR阳性细胞主要分布在嗅觉系统的周围部分,而波形蛋白-IR阳性细胞则主要分布在嗅觉系统的中央部分。