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71.
背景:胰腺干细胞在常规培养条件下易于分化,难以获得足够数量的种子细胞。
目的:探讨体外培养条件下小鼠胰腺内、外分泌部的巢蛋白阳性细胞的分化情况。
设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2006-08/2007-08在广西医科大学基础医学院中心实验室完成。
材料:SPF级新生昆明系小鼠25只,由广西医科大学实验动物中心提供。
方法:以Ⅳ型胶原酶消化小鼠胰腺组织,采用Percoll不连续密度梯度法分离单个细胞混悬液,分别从第1界面(磷酸盐缓冲液/1.068 g/L Percoll液)、第2界面(1.068 g/L Percoll液/1.096 g/L Percoll液)、第3界面(1.096 g/L Percoll液/ 1.118 g/L PercolI液)收集细胞,添加角质细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子的低糖DMEM培养基进行体外连续培养。
主要观察指标:双硫腙染色判断各界面细胞的来源,免疫组织化学检测各界面细胞巢蛋白、胰十二指肠同源盒基因蛋白1、角蛋白19的表达。
结果:从第1,2界面收集到的细胞80%~90%双硫腙染色后胞质呈铁红色,表明主要来源于胰腺的内分泌部;从第3界面收集到的细胞双硫腙染色后胞质不染色,表明来源于胰腺的外分泌部。从胰腺的内、外分泌部均可分离出大、圆、单个核的细胞,巢蛋白染色呈阳性表达。随着体外培养时间的延长,来源于胰腺内分泌部的巢蛋白阳性细胞形态保持不变,呈集落样生长,表达胰十二指肠同源盒基因蛋白1,有向胰腺内分泌部β-细胞分化的趋势;来源于胰腺外分泌部的巢蛋白阳性细胞呈铺路石样形态,表达细胞角蛋白19,出现向导管上皮细胞分化的趋势。
结论:新生昆明小鼠胰腺的内分泌部和外分泌部均存在巢蛋白阳性的细胞,前者具有分化为β-细胞的能力,后者具有分化为导管上皮细胞的能力。 相似文献
72.
目的 :探讨 2型糖尿病发病的机制 ,并了解 APP- 17肽、APP- 11肽、胰岛素对胰岛 β细胞凋亡率及功能的影响。方法 :将30只 2型糖尿病小鼠随机分为 4组 ,其中 3组被分别注射 APP- 17肽、APP- 11肽和胰岛素 ,另 1组未用药 ,并设 6只非糖尿病KKAY小鼠为正常对照组。 6个月后 ,用原位末端转移法 (TUNEL)对各组胰岛 β细胞进行观察 ,计算凋亡胰岛 β细胞的阳性率 ;并用放射免疫法检测胰岛素的水平。结果 :2型糖尿病小鼠未用药组胰岛 β细胞凋亡率 (5 6 .2 4± 2 .38) %显著高于正常对照组 (47.38± 3.6 5 ) % (P <0 .0 5 ) ,APP- 17肽、APP- 11肽组胰岛 β细胞的凋亡率分别为 (49.96± 2 .6 9) % ,(5 1.2 0± 2 .2 7) % ,显著低于 2型糖尿病小鼠未用药组 (P均≤ 0 .0 5 ) ;胰岛素组胰岛 β细胞的凋亡率为 (5 2 .84± 4 .5 6 ) % ,绝对值低于 2型糖尿病小鼠未用药组 ,但无统计学差异 (P >0 .0 5 )。胰岛 β细胞凋亡率在 (47.38± 3.6 5 ) %~ (5 6 .5 4± 2 .38) %时 ,所检测的胰岛素水平无显著性差异。结论 :胰岛 β细胞凋亡是 2型糖尿病的发病机制 ,APP- 17肽、APP- 11肽、胰岛素可减少胰岛 β细胞的凋亡 相似文献
73.
74.
报告一对胸腹联体合并脐疝的女婴,胎龄为35周,出生时因窒息时间过长而死亡.两婴合重5400克,面相对,貌相似,从剑突至脐连成一皮桥,同一脐疝,脐疝囊壁透明光滑.脐带单条,其根部连于疝囊上. 解剖所见:胸部剑突处以软骨相连,两胸膜腔在底部相通,各自有心、肺.乙婴右肺上叶有一囊泡,透亮约1.2cm×1.4cm大小.腹部为统一的腹膜腔,顶部有共同的横膈,腹前壁薄弱,缺腹直肌,横膈下为共同的肝脏,呈马蹄形跨越两胎体之间,共一镰状韧 相似文献
75.
VARIAN直线加速器是90年代末的产品,其控制电路较为复杂,对维修人员检修设备带来一定的困难,由于直线加速器的枪灯丝控制电路上附加高压,所以电路板容易损坏。向VARIAN公司订购每块电路板需15万元,一年下来要用去几十万元的维修费。为了节省开支,笔者针对枪灯丝控制电源板(HOTDECKFILAMENTPOWERSUPPLY、GUNDRIVERPULSER)出现的故障解决方法如下。 故障现象:当电源开关和高压开关闭合,高压升至固定值后,在主监视器上会出现“GFIL”连锁闪烁,加速器不能正常工作。 分析与检修… 相似文献
76.
随着21世纪的即将到来,高等院校作为培养高级人才的重要基地,面临着比以往任何时候都艰巨的任务,几十年来沿用的一套教学模式再也不能适应新形势的发展,教育改革势在必行。而在改革的方方面面中,教学内容及教学方法的改革极其重要,作为医学基础课的教师,我们深感... 相似文献
77.
小鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及形态学观察 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立一种简单实用的小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离培养方法,通过了解其细胞生物学特性,为MSCs的应用提供实验依据。方法采用差速贴壁法体外分离、扩增MSCs,倒置显微镜观察原代及传代细胞的形态及生长过程。结果在小鼠骨髓间充质干细胞的培养过程中,血液系细胞在换液过程被去除,成纤维细胞污染经差速贴壁法也可去除。获得的骨髓间充质细胞形态较均一,生长状态良好。结论采用差速贴壁培养法可获得一定纯度的MSCs,此法简单、实用,并且获得的细胞生长状态良好,增殖能力强. 相似文献
78.
肿瘤抑制基因 Pten/ MMAC1/ Tep1于 1997年由美国 3个科研小组分别克隆 ,定位于染色体 10 q2 3.3,编码的蛋白质由 40 3个氨基酸组成 ,为一种酪氨酸磷酸酶。现除了在 Cowden病——一种常染色体显性遗传性错构瘤综合症中发现了该基因的胚系突变外 ,在许多肿瘤如胶质瘤、乳腺癌、肾癌、前列腺癌和黑色素瘤等发现了各种类型的体细胞性突变。目前有关 Pten/ MMAL 1/ Tep1的研究多集中于基因的突变和缺失 ,对基因蛋白表达的研究较少。本研究应用免疫组化 ABC法观察 2 0例人脑胶质母细胞瘤 (GBM)中Pten/ MMAC1/ Tep1基因蛋白的表达。结果… 相似文献
79.
评估在护理程序中的作用 总被引:3,自引:0,他引:3
在临床护理工作中应用程序所展开的一系列有目的、有计划的步骤和行动称为护理程序。护理程序分为评估、诊断、计划、实施、评价五个步骤,是一个持续循环的过程。护理程序的每个步骤是相互关连的,是一环扣一环的,都源于前一步的正确性。为保证护理程序的正确性,在实际运作过程中评估应贯穿于护理程序的始终,即对护理程序中的每个步骤都应给予充分的“评估”,这样才能确保护理程序的顺利实施。现将评估在护理程序各个步骤中的作用分述如下。1 评估 评估是护理程序的第一步,包括收集资料、记录资料、分析整理资料及做出推论。护士通过观察… 相似文献
80.
此系统是基于微软的Visual Foxpro6.0开发的数据库管理应用软件,数据库表中的字段有编号、部门、设备名称、型号规格、制造厂家、出厂编号、出厂日期、分类、检定时间、检定结论、下次检定时间、备注等。程序主菜单中设数据维护、数据查询、打印、统计、帮助、系统退出菜单。数据维护主菜单下设添加/删除数据、数据库管理子菜单;数据查询主菜单下设分类查询、分部查询、组合查询、打印主菜单下设分类打印、分部打印,报表打印。选定菜单即可完成对应的操作。 相似文献