诱导型一氧化氮合酶及缺氧诱导因子-1α在人脑胶质瘤的表达意义与肿瘤血管生成关系的研究

目的探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在人脑胶质瘤标本表达特点及相关性,探讨HIF-1α和iNOS与肿瘤血管形成的相关性。方法收集86例人脑胶质瘤(低度恶性组42例,高度恶性组44例)和新鲜脑组织10例(对照组),应用免疫组化SP法测定HIF-1αi、NOS和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达水平并分析其相关性。结果免疫组化结果显示,iNOS在对照组细胞中不表达,低度恶性组胞浆中呈阳性表达,而高度恶性组呈强阳性表达,2组之间表达强度差异具有统计学意义(P<0.05);HIF-1α和VEGF在正常脑组织组和胶质瘤细胞中均有表达,其中正常脑组织均弱阳性表达,低度恶性组均呈阳性表达,而高度恶性组均呈强阳性表达,HIF-1α和VEGF在3组之间表达强度差异均具有统计学意义(P<0.05)。根据免疫组化结果进行各种抗原表达相关性分析,HIF-1αi、NOS和VEGF在低度恶性组和高度恶性组中表达均具有相关性。结论 HIF-1αi、NOS和VEGF共同参与胶质瘤细胞发生发展过程,三种基因表达强度均与胶质瘤细胞恶性度相关,恶性度越高,表达量越多;HIF-1αi、NOS和VEGF三者可能存在相互协调关系,共同促进胶质瘤生长增殖和转移过程。     

ARHI基因mRNA和蛋白表达水平与胶质瘤恶性度相关性探讨

目的：探讨ARHI基因表达水平与人脑胶质瘤恶性度的相关性。方法采用RT-PCR和Western blot法检测10例正常脑组织、59例胶质瘤组织、4种胶质瘤细胞系（U251,SHG44,BT325,U87）中 ARHI基因mRNA和蛋白的表达强度,结合临床病理资料统计分析。结果胶质瘤组织、细胞系中ARHI基因的表达水平显著低于正常脑组织,胶质瘤组织中ARHI的表达水平随肿瘤恶性程度增加而明显降低（P＜0．01）。结论ARHI基因mRNA和蛋白在胶质瘤中低表达,且表达水平与胶质瘤恶性程度负相关,提示ARHI基因低表达对胶质瘤的形成和恶性演变具有重要作用。     

姜黄素对脊髓缺血损伤后脂质过氧化诱发细胞凋亡的影响

目的探讨姜黄素对脊髓缺血损伤后脂质过氧化诱发细胞凋亡的影响。方法建立新西兰大白兔脊髓缺血模型,分为缺血对照组、姜黄素给药组及假手术组。采用神经功能评分评价脊髓缺血兔后肢运动功能。采用硫代巴比妥酸(TBA)比色法、黄嘌呤氧化酶法、硝酸还原酶法、RT-PCR和流式细胞仪等技术检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达水平和细胞凋亡率。结果与缺血对照组比较,姜黄素可降低MDA含量、NO含量和Caspase-3表达量,提高SOD活性,降低细胞凋亡率,差别有统计学意义。神经功能评分结果显示姜黄素给药组评分显著高于缺血对照组。结论姜黄素对兔脊髓缺血损伤具有保护作用,此作用与抑制脂质过氧化、从而减少缺血细胞凋亡有关。     

榄香烯抑制人脑胶质瘤U251细胞增殖和PCNA基因表达的研究

目的研究榄香烯(elemene)抑制人脑胶质瘤U251细胞增殖和抑制增殖细胞核抗原(PCNA)基因表达作用。方法应用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定不同浓度榄香烯对人脑胶质瘤U251细胞的抑制作用,同时观察时间—效应关系,并求出半数致死浓度(IC50);免疫组化法检测IC50浓度榄香烯作用0、24和48h的U251细胞中PCNA蛋白表达差异;RT-PCR检测不同浓度或不同作用时间的榄香烯抑制PCNA基因的表达。结果榄香烯对U251细胞株增殖具有抑制作用,呈剂量和作用时间的依赖性,IC50为0.062g·L-1。榄香烯对U251细胞内PCNA蛋白表达有明显的抑制作用;RT-PCR分别证实榄香烯抑制PCNA基因的表达,其PCNA基因mRNA表达值随药物浓度增加或作用时间延长增加而不断下降,呈剂量和作用时间的依赖性。结论榄香烯能有效下调PCNA基因表达,从而抑制人脑胶质瘤U251细胞增殖,对抗人脑胶质瘤具有广阔的前景。     

降钙素基因相关肽体外转染对大鼠同种异体肺移植物缺血再灌注损伤的影响

目的 观察和探讨腺病毒介导降钙素基因相关肽(CGRP)体外转染对大鼠同种异体肺移植物缺血再灌注损伤(IRI)的影响.方法 SD大鼠建立同种异体左肺移植模型.设立假手术对照组(A组)、空白对照组(B组)、空载体对照组(C组)和基因转染组(D组).D组供肺体外转染增强型绿色荧光蛋白标记降钙素基因相关肽重组腺病毒载体(Ad5-CGRP-EGFP),颗粒滴度为3.2×109vp/ml.供肺保存6 h行左肺原位移植.4 h后检测动脉血气分析和气道内压(AWP);荧光显微镜下观察移植肺组织绿色荧光变化;放射免疫法测定移植肺组织CGRP含量;检测移植肺湿-干重比率(W/D)比率、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性;光镜观察移植肺病理组织学变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定移植肺肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-10表达水平.结果 B、C、D组出现明显IRI反应.但D组IRI反应明显减轻.荧光显微镜下C组和D组标本呈强绿色荧光反应.放射免疫法测定D组肺组织CGRP含量明显升高,AWP下降,PaO2上升、PaCO2下降、W/D比率下降,SOD活性增高,MDA含量和MPO活性下降;D组病理组织学检查示肺组织炎细胞浸润、水肿和渗出改变明显减轻;TNF-α表达水平下调、IL-10表达水平增强.结论 CGRP体外转染可明显减轻IRI对供肺的损害,对大鼠肺移植的供肺起保护作用.     

应用高密度寡核苷酸(Oligo)基因芯片筛选胶质瘤相关基因

目的应用高密度寡核苷酸（Oligo）基因芯片技术筛选胶质瘤相关基因。方法抽提5例胶质瘤和10例正常脑组织的总RNA并逆转录为cDNA，其中Cy5、Cy3的dNTP分别掺人胶质瘤和正常脑组织的cDNA，混合后杂交含22000个人类基因人类高密度Oligo基因芯片，经过洗片和扫描，获得荧光信号图像并用计算机分析，随机抽取3种差异表达基因用PCR验证它们胶质瘤和正常脑组织中的差异表达。结果从22000条基因中筛选出差异表达基因242条，其中123条表达上调，119条表达下调，包括细胞周期蛋白、细胞凋亡、细胞骨架和运动蛋白等相关基因。结论基因芯片技术的胶质瘤基因表达谱分析能够高通量筛选胶质瘤相关基因，并高效对基因功能进行研究，有助于认识肿瘤发病机制。     

动态增强磁共振定量参数诊断肝脏占位性病变良恶性效能分析

目的 探讨应用动态增强磁共振(DCE-MRI)扫描定量参数诊断肝脏占位性病变良恶性的效能。方法 2019年2月～2022年2月我院经手术或穿刺活检组织病理学检查证实的88例肝脏良恶性病变患者,其中肝脏良性病变组47例和恶性病变组41例。所有患者均接受DCE-MRI检查,测量病变的平均强化时间(MET)、正性增强积分(PEI)、最大上升斜率(MSI)和最大下降斜率(MSD)。采用荧光定量PCR法检测组织衍生生长因子-1(Cripto-1)、Kruppel样因子(KLF4)、同源盒蛋白A9(HOXA9)和跨膜蛋白3(IFITM3)mRNA水平。绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析MR检查测量的MET、PEI、MSI和MSD诊断肝脏占位性病变性质的效能。结果 恶性病变组MET、PEI和MSI分别为(516.5±40.2)s、(32.4±6.3)和(99.6±17.8),显著低于肝脏良性病变组【分别为(574.3±50.9)s、(256.7±22.7)和(271.6±25.3),P<0.05】,而MSD为(114.6±14.2),显著高于肝脏良性病变组【(85.4±10.9),P<...     

早产儿口腔喂养器的设计及应用

目的 设计一种早产儿口腔喂养器,探讨其用于早产儿经口喂养的效果。方法 口腔喂养器采用空心杆的无菌海绵棒制作,以胃管连接空心杆和注射器乳头,在胃管外安装流速调节器调节奶液流速,以奶液从海绵头部点滴滴出为宜,然后将海绵棒头部放入早产儿口腔中进行喂养。将62例早产儿用随机数字表分为2组,试验组用口腔喂养器进行经口喂养,对照组予以管饲喂养联合口腔运动干预,记录两组开始经口喂养和完全经口喂养时的胎龄,并观察完全经口喂养时的喂养效率,每天记录早产儿的体重,计算体重增长速度。结果 最终试验组28例、对照组29例完成研究,试验组开始经口喂养和完全经口喂养时的纠正胎龄小于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。试验组的住院时间低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。两组出院体重、体重增长速度、喂养效率等方面差异无统计学意义（P>0.05）。结论 口腔喂养器能够促进早产儿早期经口喂养,有助于早产儿早期经口喂养状况的改善。     

经颅电刺激运动诱发电位术中监测预防脊髓缺血性损伤的实验研究

目的探讨术中经颅电刺激运动诱发电位(TceMEP)监测在脊髓髓内肿瘤切除术中对脊髓缺血性损伤的保护作用。方法将16只实验兔随机分为4组,4只/组;对照组用来确定TceMEP的最佳刺激强度,术前连续记录3h(30min/次),并于术中、术后不同时间点记录以排除麻醉、手术对诱发电位的影响;另3组分别结扎3、4、5根腰动脉,血管结扎后5min内记录TceMEP,并行运动功能评分,2d后取标本行苏木精-伊红染色。结果TceMEP波幅对缺血性脊髓损伤敏感;血管结扎后,可见波幅先降低后逐渐恢复,5min内均趋于稳定。TceMEP波幅变化与麻醉清醒后运动功能、结扎2d后运动功能和病理损伤程度均呈正相关,r分别为0.977、0.933、0.971,差异均有统计学意义(P0.01)。结论术中TceMEP可敏感地反映缺血性脊髓损伤,可在脊髓缺血可逆期内发现缺血性损伤,有助于及时采取措施,预防不可逆性脊髓损伤的发生。     

一氧化氮合酶、p38MAPK、Caspase-3介导缺氧神经细胞凋亡机制的研究

目的探讨缺氧引起PC12细胞凋亡和NOS、p38MAPK和(Caspase-3在缺氧后神经细胞凋亡中的共同作用机制。方法应用噻唑蓝(MTT)法测定缺氧对PC12细胞的生长抑制率,荧光显微镜观察缺氧对PC12细胞损伤,比色法测定PC12细胞在缺氧环境下乳酸脱氢酶(LDH)活性,流式细胞术(FCM)检测缺氧PC12细胞NT阳性细胞百分比,以及细胞周期改变和细胞凋亡率, RT-PCR半定量分析nNOS、iNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA的表达。结果MTT法测定缺氧抑制PC12细胞生长趋势;AO荧光染色缺氧24 h时PC12细胞可见凋亡小体;缺氧时间延长,LDH渗出量增多,NT阳性细胞百分比增大,S期细胞增多,细胞凋亡率升高,缺氧24 h调亡率达到45.67%;PCR结果分析显示nNOS mRNA在缺氧早期表达,iNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA主要在缺氧晚期表达。结论缺氧能够引起PC12细胞凋亡现象,nNOS、iNOS分别在缺氧早期和晚期发挥神经毒性作用,NOS,p38MAPK和Caspase-3三种基因共同介导缺氧后PC12细胞凋亡。