红细胞电镜冷冻蚀刻技术的图像识别及真空喷镀

红细胞具有取材方便 ,病人痛苦少 ,重复性高等优点在某些科研或疾病诊断中受到关注 [1 ] 。国内外应用电镜冷冻蚀刻技术对红细胞进行观察研究的报道 ,多为红细胞膜蛋白颗粒数量或分布变化的研究 [2～ 6 ] ,我室曾对肌营养不良症及其基因携带者的红细胞膜蛋白颗粒进行研究 [4 ,5] 。由于红细胞与其他组织或单细胞相比具有某些特殊性 ,本文对其电镜图像识别及真空喷镀技术要点予以介绍。1　材料与方法取静脉血 2 ml,经肝素抗凝、离心 (2 30 0 r/ min,10 min)后吸去上清液及白细胞层 ,沿试管壁加入 3%戊二醛固定过夜 ,挑取上层红细胞团块切成长…     

鹿石合剂对缺氧缺血脑损伤新生大鼠海马神经元超微结构的影响

目的 探讨中药鹿石合剂对缺氧缺血脑损伤新生大鼠海马CA1区神经元超微结构的影响.方法 结扎右侧颈总动脉及缺氧2 h,建立缺氧缺血新生大鼠模型,以西药"洛斯宝"为阳性对照,鹿石合剂灌胃,分别以透射电镜和光镜尼氏染色观察海马CA1区神经元超微结构及尼氏小体的变化.结果 大鼠海马CA1区神经元核膜不清晰,染色质边集,大部分线粒体膜损伤,线粒体肿胀、空泡变性,线粒体嵴断裂、模糊或消失,粗面内质网数量减少、排列紊乱;鹿石合剂高剂量组粗面内质网丰富,细胞器结构接近假手术组,尼氏小体呈块状或颗粒状,染色比假手术组浓密.鹿石合剂高剂量组疗效优于"洛斯宝"组.结论 鹿石合剂可改善缺氧缺血脑损伤大鼠海马CA1区神经元超微结构的变化.     

骨髓活检标本的透射电镜样品制备

在骨髓活检标本的透射电镜样品制备中,对固定与脱钙问题进行了实验研究,结果表明,标本先经固定、再同时固定并脱钙所制备的样品,超薄切片顺利,细胞微细结构优良。     

血管性痴呆大鼠海马超微结构的变化及药物干预

目的：探讨血管性痴呆病理机制及黄精口服液的作用机制。方法：结扎双侧颈总动脉建立血管性痴呆模型,黄精口服液灌胃,应用透射电镜观测神经细胞、胶质细胞、微血管病理变化和突触结构参数的变化。结果：血管性痴呆大鼠海马CAI区神经组织线粒体肿胀、嵴断裂、模糊或消失,微管断裂、排列紊乱,神经毡中突起肿胀、变性,突触结构参数明显改变;毛细血管内皮细胞局部基膜和星形胶质细胞也有病理改变。黄精口服液干预的大鼠海马组织病理变化明显减轻;海马CAI突触界面曲率增大、突触后致密物增厚、突触活性区增长。结论：(1)突触结构变化是血管性痴呆的病理机制之一;(2)黄精口服液促进突触重建、改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力。     

毛滴虫和溶组织内阿米巴的细胞器及其代谢的研究

本文应用超微结构细胞化学技术研究结果表明:阴道毛滴虫、人毛滴虫和溶组织内阿米巴均有溶酶体和内质网。二种毛滴虫都有副基体,而溶组织内阿米巴缺乏此细胞器。二种毛滴虫都有厌氧代谢产能的氢化酶体,而溶组织内阿米巴具有有氧代谢的呼吸细胞器微体。三种原虫都没有线粒体。     

血管性痴呆大鼠海马突触结构参数的变化

目的观察血管性痴呆大鼠海马突触结构特点,探讨血管性痴呆学习记忆障碍的神经病理机制. 方法采用永久性结扎双侧颈总动脉的方法建立血管性痴呆动物模型,利用 Morris水迷宫和 Y型电迷宫检验大鼠的学习记忆能力,应用透射电镜和形态计量法分析血管性痴呆大鼠海马 Gray Ⅰ型突触结构参数的变化. 结果血管性痴呆大鼠海马 CA1区 Gray Ι型突触的体积密度、面积密度、比表面、面数密度、突触界面曲率、突触间隙宽度和突触后致密物厚度分别为 [0.051± 0.016,(0.298± 0.130) μ m2/m3,(5.884± 1.203) μ m2/m3,(3.285± 1.113)个 /85.05 μ m2,1.048± 0.060,(13.97± 0.386) nm和 (33.33± 0.86) nm],比假手术对照组 [分别为 0.088± 0.019,(0.712± 0.815) μ m2/m3,(9.020± 1.915) μ m2/m3,(6.330± 1.258) 个 /85.05 μ m2,1.103± 0.268,(25.40± 0.92) nm和 (47.73± 1.15) nm]减小,血管性痴呆大鼠与假手术对照组突触平均面积分别为 (1.573± 0.343) m2和 (1.202± 0.145) m2. 结论永久性结扎双侧颈总动脉使大鼠海马 CA1区 GrayΙ型突触数量减少和形态结构发生显著变化,导致学习记忆障碍.     

不同时段缺血对大鼠血管组织超微结构的影响

目的：探讨不同时段缺血对血管组织超微结构的影响。方法：以15％DMSO为低温保护剂，采用两步冷冻法，对SD大鼠血管进行冷藏缺血和常温缺血实验，时间为1、2、3、4、5、6和8h。动脉标本冷冻维持温度为-55℃，静脉为-60℃，-196℃液氮保存1W。复温后标本透射电镜观察。结果：缺血8h，冷藏组血管组织的内皮细胞轻度肿胀，胞浆内线粒体嵴稀疏或破坏。常温组血管组织的内皮细胞坏死增多，胞膜、核膜破裂，细胞核破坏，残留胞膜，内弹性膜区域性裸露等。结论：冷藏缺血，血管组织的超微结构损伤轻微，表明冷藏能明显延长血管组织的缺血耐受时间。     

Duchenne型肌营养不良患者及其基因携带者红细胞膜冷冻断裂电镜研究

细胞膜缺陷在Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型肌营养不良 (ＤＭＤ)发病机制中占有重要地位 ,对其红细胞膜内蛋白颗粒的定量研究 ,文献报道尚少。因此 ,我们采用冷冻断裂电镜技术对ＤＭＤ患者及其基因携带者的红细胞膜蛋白颗粒进行定量分析 ,报道如下。资料和方法 :(1 )研究对象 :ＤＭＤ患者组 5例 ,均为男性 ,经基因检测确诊 ;ＤＭＤ基因携带者组 5例 ,均为女性 ,经基因检测确诊 ;运动神经元病 (ＭＮＤ)组 4例 ;正常对照组 4名。(2 )实验方法 :采用冷冻断裂法把固定好的红细胞块制成复型膜样品 ,在电镜下观察拍照 ,计算红细胞膜ＥＦ面和ＰＦ面单位面积内…     

阴道毛滴虫粘附与吞噬男性泌尿生殖道上皮细胞的电镜观察

目的 :观察阴道毛滴虫对男性泌尿生殖道上皮细胞的粘附与吞噬 ,探讨男性滴虫病的致病机制。　方法 :培养的虫体与男性泌尿生殖道上皮细胞孵育 ,透射电镜观察超微结构。　结果 :虫体呈阿米巴样粘附上皮细胞 ;虫体靠伪足及体表凹陷 ,来包绕、蚕食上皮细胞局部。　结论 :阴道毛滴虫对男性泌尿生殖道上皮细胞具有粘附性与吞噬性。虫体的吞噬作用等可直接损伤泌尿生殖道上皮细胞     

实验性矽肺研究的透射电镜样品制备

本文介绍实验性矽肺研究的透射电镜制样方法。标本采用戊二醛-多聚甲醛混合固定液固定,在负压中进一步固定;延长脱水与浸透时间,并辅以机械振荡;选用大角度玻璃刀及较慢速度切片等措施,获得较为满意的结果。