人趋化因子CCL3L1融合蛋白表达和活性分析

目的人趋化因子CCL3L1进行融合蛋白原核表达和真核表达，纯化后活性分析。方法克隆人类CCL3L1eDNA，构建两种CCL3L1表达载体，获得两个CCL3L1融合蛋白，一个在BL21大肠杆菌表达的GST-CCL3L1融合蛋白，另一个在跎果蝇细胞表达的His-CCL3L1融合蛋白。同时克隆了pcDNA3.1-flag-CCR5表达载体，培养了稳定表达flag-CCR5的细胞株，进行人趋化因子CCL3L1活性分析。结果成功构建人趋化因子CCL3L1融合蛋白原核表达载体pGEX-4T和真核表达载体pMT／BiP／V5-His，免疫沉淀法检测和Westernblot法分析His-CCL3L1蛋白在浓度1nmol／L到50nmol／L存在剂量依赖性，浓度50nmol／L到100nmol／L没有剂量依赖性。纯化的His-CCL3L1蛋白能特异性结合CCR5受体。结论成功表达了融合蛋白GST-CCL3L1和His-CCL3LI，果蝇细胞表达的His-CCL3L1蛋白具有与天然CCL3L1相同的生物学活性，为进一步制备CCL3L1单克隆和多克隆抗体及研究CCL3L1影响HIV-1感染的机制提供基础资料。     

骨科围手术期镇痛的临床效果观察

［摘要］　目的　观察骨科围手术期镇痛的临床效果。方法　回顾性分析2013-03～2013-12骨科围手术期患者96例实施镇痛（术前超前镇痛、术中鸡尾酒疗法局部镇痛、术后镇痛）的临床资料、术后疼痛评分情况、进行功能锻炼时间以及术后住院天数,评估患者围手术期的生活质量。结果　96例患者术后疼痛评分最高4分,最低0分,平均0.76分,术后最长住院天数9 d,最短1 d,平均4.3 d;所有患者术后第2天即可进行不同程度的肢体功能锻炼,且围手术期少有疼痛感,睡眠等生活质量佳。结论　骨科围手术期镇痛,可使患者术后疼痛明显减轻,进行功能锻炼时间早,术后恢复较快,缩短了术后住院天数,提高了患者围手术期生活质量,减轻了医护工作量,值得临床推广应用。     

温州地区500例男性不育症患者染色体核型分析

目的 对临床诊断为男性不育症的患者进行染色体核型分析,探讨不育症与染色体之间的关系.方法 采外周血淋巴细胞常规培养,Giemsa染色,显微镜下观察并分析染色体核型.结果 对500例男性不育症患者进行染色体核型分析,共发现78例异常,检出率15.6%.性染色体异常最多,并以克氏综合征(Klinefelter's syndrome)为主,共34例,占全部病例的6.8%.常染色体异常32例,栓出率6.4%.结论 染色体异常,尤其是性染色体异常是造成男性不育的重要原因.     

应用多重连接依赖式探针扩增技术快速高通量诊断胎儿染色体非整倍体异常

目的 评价多重连接依赖式探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)在染色体非整倍体诊断中的应用价值,为我国羊水染色体诊断提供一种快速、特异、高通量的分子诊断手段.方法 应用MLPA技术检测了500份羊水标本,所有标本均进行荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术检测和常规染色体核型分析,应用RH-MLPA-v511数据分析软件获得MLPA结果,比较MLPA技术与FISH和染色体核型分析结果的准确性,总结MLPA技术临床应用过程中的关键要点.结果 在500份羊水标本中,MLPA检测成功率97%.3个工作日完成结果的为92%,需重复检测的为5%,失败为3%.对染色体非整倍体异常检测敏感性和准确性100%.证实38例非整倍体病例探针信号比值＞正常二倍体4s,2例疑似三体结果＞2s.分析了21号染色体8条探针的杂交效率,21三体患者8条探针中平均4条探针比值＞1.3.结论 MLPA技术具有快速、特异、敏感、高通量、成本低等特点,可用于产前染色体非整倍体数目的快速检测,是传统染色体培养方法的补充,临床应用价值较高.

Abstract：

Objective To assess the diagnostic value of multiplex ligation-dependent probe amplification (MLPA) for detection of common chromosome aneuploidy in amniotic fluid (AF) cells in order to obtain an accurate, rapid, cost-effective and high-throughput method in routine prenatal clinical practice.Methods The MLPA test was performed on 500 AF samples by using kit P095 and the results were obtained by using analysis software RH-MLPA-v511. The results were compared with that from fluorescence in situ hybridization (FISH) and traditional karyotyping (TK). The technical critical issues were analyzed in routine diagnostic application. Results The absolute specificity and sensitivity of the MLPA test to detect the aneuploidy were 100%. For the 500 AF samples, the success rate of the MLPA tests was 97%. Among them 92% were finished within three working days and 5% required more days for repeating. The test failure rate was 3%. The results confirmed that for the 38 detectable aneuploid samples,the probe reliability weighted mean ratio values were more than 4SD compared to normal diploids and the 2 suspected trisomy samples were more than 2SD. In this study, authors analyzed hybridization efficiencies of 8 probes for chromosome 21, and the presence of a trisomy was considered if at least 4 of the 8 probes gave probe ratio of ＞1.3. Conclusion The data suggested that MLPA is a rapid, simple and reliable method for large scale testing for aneuploidy of chromosomes 13, 18, 21, X, or Y in AF. The MLPA technology is complementary to AF culture and valuable for prenatal diagnosis.     

抗HIV药物的新发展

随着高效联合抗逆转录病毒治疗（HAART）的进展，副作用、耐药性等问题日益突出，影响了持续治疗。目前正在研究许多新的药物，它们具有较小的毒副作用、更好的抗病毒及耐药毒株活性、服用方便等优点。本文阐述了正在开发中的核苷类逆转录酶抑制（NRTIs）、非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTIs）、蛋白酶抑制剂（Pis）及HIV病毒进入细胞抑制剂，阐述了它们的作用特点、使用剂量、剂型、抗病毒作用的活性及毒副作用，与其它抗病毒药物相互作用的研究。它们大多将会进入大规模临床研究，并可能获得批准而生产上市。     

高祥福运用葛根芩连汤治疗锁肛痔经验介绍

正高祥福教授长期从事内科工作,在中西医结合治疗内科疾病方面具有丰富的经验。笔者有幸跟随高教授临证,侍诊左右,获益良多,现将高教授运用葛根芩连汤治疗锁肛痔的经验小结如下。锁肛痔是发生于肛门直肠部位的恶性肿瘤,其临床表现为肛门出现坚硬肿块或伴有流脓血臭水,排便次数增多或排便困难,里急后重,粪形变细,脓血便,是肠道常见的肿瘤之一。本病在西医中称之为肛管直肠癌,在大肠癌中约占80%,是指腹膜反折部以下,从肛缘到癌肿的近端7～8 cm的     

陆曙诊治心系疾病学术经验介绍

正文：陆曙,医学博士（博士后）、主任中医师、南京中医药大学兼职教授、博士研究生导师、博士后合作导师,第六批全国老中医药专家学术经验继承工作指导老师,长期从事心血管疾病的基础与临床研究,临证经验丰富,余有幸跟诊于侧,今不揣浅陋,介绍其诊治心系疾病学术经验如下。……     

脐针治疗慢性荨麻疹医案3则

正慢性荨麻疹主要表现为:皮肤反复出现大小不等的风团伴瘙痒,部分患者还会伴有血管性水肿,每天发作或间歇发作,持续6周以上~([1-2])。相当于中医学的瘾疹~([3-4])。现代医学对慢性荨麻疹的发病机制尚无定论,主要可能与自身免疫和慢性感染相关~([5])。中医认为瘾疹发病主要是由于素体禀赋不耐于内,六淫侵袭于外;或饮食不节、肠胃湿热;或素体虚弱气血不足、卫外不固所致~([6])。脐针是齐永教授发明的高效神奇的新型针刺方法,极具临床研究价值,脐针是一种于脐部施针     

郭宏敏从肝论治老年骨质疏松症经验介绍

正郭宏敏教授系南京中医药大学附属医院(江苏省中医院)老年科主任中医师、南京中医药大学博士研究生导师,中华中医药学会老年分会委员,江苏省老年中医学会副主任委员,从事中医老年病临床工作三十余载,在治疗老年性骨质疏松症方面有着独到的见解及丰富的经验,用药颇具特色,现介绍其从肝论治老年骨质疏松症的经验如下。骨质疏松症(OP)是以骨量减少、显微结构退化为特征,骨的脆性增高以及骨折危险性增大的一种全身性骨病。其主要临床表现为疼痛、脊柱变形以及骨折,其中以髋部骨折最