人Hexastatin基因的优化、蛋白的表达纯化及初步应用

目的 优化人Hexastatin基因,并进行表达、纯化及体外的活性实验,为人Hexastatin进一步深入研究提供理论依据.方法 优化并合成人Hexastatin基因,然后与pET28a表达载体连接,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并优化诱导表达的条件.在超声破碎细菌和包涵体后,用Ni-NTA层析柱纯化蛋白,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)和Western Blot分析,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法分析肿瘤的抑制作用.结果 得到pET28a-Hexastatin表达质粒,在BL21菌体中高效表达,表达的可溶性Hexastatin蛋白占总蛋白量的45.1％,纯化后的人Hexastatin蛋白的纯度可达90％,质量浓度为80 μg/ml;Western Blot分析证实表达蛋白为目的蛋白;人Hexastatin蛋白对肿瘤细胞C6、人乳腺腺瘤细胞(MCF-7)以及人血管内皮细胞(HMEC)的生长有明显的抑制作用,抑制率分别为72.9％±3.6％、48.8％±2.9％、52.7％±2.5％.结论 成功地表达了优化的人Hexastatin蛋白,证实人Hexastatin蛋白对肿瘤细胞的抑制作用,为肿瘤的抗血管疗法提供了新途径.     

成人乙型肝炎疫苗免疫失败的治疗对策

目的 为探讨成人乙肝疫苗接种后无免疫应答的免疫对策.对40例肝功能正常且乙肝病毒标志5项检测(ELISA)全部阴性者按0、1、3月,20vgx3方案,重复接种乙肝疫苗两个免疫程序,于30天后抽血化验抗HBs,结果仍为阴性者,给予卡介菌素注射液1.0mg,隔日肌注,连注15次后,再次按O、1、3月免疫接种程序给予注射20vg的重组乙肝疫苗.结果 显示,40例免疫失败者加用免疫佐剂和乙肝疫苗后.其抗HBs阳性率迭95%(38/40).结论 :成人乙肝疫苗接种失败后,可通过加用免疫佐剂提高抗HBs阳转率.     

E838联合环磷酰胺抗白血病L1210细胞的作用

目的 观察E838及其与化疗药物环磷酰胺(CTX)联合应用对白血病L1210细胞荷瘤小鼠的肿瘤抑制及生命延长作用。方法 以L1210荷瘤IRM-2小鼠为模型,实验分对照组、CTX组、E838组、E838+CTX组,分别检测肿瘤抑制率、骨髓有核细胞数、胸腺与脾指数、生命延长率等指标,比较各组间的差别。结果 E838治疗组瘤重明显小于对照组,联合用药组对荷瘤小鼠白血病L1210有较强抑制作用。生命延长也有提高作用。结论 E838对白血病L1210有抑制作用,与化疗药物CTX合用时,能提高疗效及机体免疫功能。     

外伤性颅内血肿病人的观察及护理

我院2007年3月～2009年3月对52外伤性颅内血肿患者进行手术治疗,并在专科ICU病房采用多参数监护仪,现将该组病例的术前临床观察及护理报告如下.1临床资料:本组52例中,男42例,女12例,年龄6～80岁,平均39岁.     

心肌挫伤的观察及护理

通过对12例胸外伤伴心肌挫伤病人的早期观察,进行详细询问病史,严密观察病情变化,持续低流量吸氧,保护心肌,提高了治愈率。     

辐射对小鼠免疫系统损伤远期影响的研究

目的:探讨4Gy 137Csγ射线一次性全身照射小鼠免疫细胞对LPS刺激反应性的远期影响.方法:将C57BL/6实验小鼠分为假照射组和照射组,照射组给予4 Gy照射.照射10周后小鼠按组别分别提前24 h和1h腹腔注射LPS( 20mg/kg),对照组注射生理盐水.取外周血进行白细胞计数及CD4、CD8、B220细胞比例检测,脾脏与胸腺称重,计算脏器指数.冲洗单侧股骨进行有核细胞计数.结果:与假照射对照组小鼠比较,照射对照组小鼠的CD4,CD8细胞比例和脾脏、胸腺指数显著升高,B细胞比例显著下降,差异有统计学意义(P＜0.05).LPS刺激1h后,照射组小鼠的CD4细胞较假照射组小鼠显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05).LPS24 h后,与假照射组小鼠相比,照射组小鼠CD8细胞比例显著降低,胸腺指数显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:小鼠4 Gy照射10周后,免疫系统尚未完全恢复;在接受LPS刺激后,两组小鼠反应也有差异.辐射对小鼠免疫系统损伤的远期影响有待进一步研究.     

电离辐射对小鼠脾脏B淋巴细胞损伤的研究

目的 探讨电离辐射对小鼠脾细胞活性的影响,阻断p38-MAPK通路对小鼠脾细胞的防护作用。方法 从体内、体外实验研究不同剂量电离辐射对小鼠脾细胞活性的影响,分别在照射前、后给与p38 MAPK通路阻断剂SB203580,观察对辐射损伤的防护和治疗作用。结果 在体外实验中,辐射对小鼠脾细胞活性的破坏作用与剂量正相关;体内实验表明低剂量的辐射可以提高脾细胞的活性,高剂量辐射能破坏其活性;在亚致死剂量的辐射下,照射后用SB203580对小鼠脾细胞活性的治疗作用不明显,照射前用SB203580对小鼠脾细胞活性具有较好的保护作用。结论 阻断p38-MAPK通路可以有效预防辐射对小鼠脾细胞的损伤,无明显的治疗作用。     

E838对辐射所致小鼠淋巴细胞DNA双链断裂的防护作用

目的：探讨E838对辐射导致小鼠淋巴细胞DNA双链断裂的防护作用。方法：小鼠照射前给予E838,观察其存活率和动物平均存活时间;用中性单细胞凝胶电泳技术,检测1 Gyγ射线照射后小鼠淋巴细胞DNA双链断裂,并与给予同类药物小鼠进行比较,用CASP软件分析彗星图像,SPSS12．0进行数据的统计学分析。结果：E838预防用药能够明显提高损伤动物的30天存活率,E838低、中、高剂量组存活率分别比对照组提高55%、85%、75%,平均生存天数与对照组比较,差异有统计学意义（P<0.001）,保护指数分别为1.99、2.56、2.46。E838与炔雌醇比较,中、高剂量组的动物平均生存天数明显延长,差异有统计学意义（P<0.001）。E838能明显减轻淋巴细胞DNA双链断裂损伤,E838低、中、高组,TDNA百分比（11.68、6.24、9.05）、TL（18.53、10.09、16.02）、TM（2.13、0.64、1.21） 和OTM（2.52、0.99、1.59 ）残余损伤逐渐减少,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.001)。E838与炔雌醇、尼尔雌醇比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论：E838对辐射损伤具有明显的保护作用。     

鹧鸪禽流感病毒和人流感病毒唾液酸受体分布特征

目的 探讨鹧鸪禽流感病毒和人流感病毒唾液酸受体分布特点及其作用。方法 用亲和组化法检测鹧鸪呼吸道与消化道流感病毒唾液酸受体的分布,荧光素Alexa488标记禽流感病毒H9N1和人流感病毒H1N1,分别与鹧鸪呼吸道、消化道各解剖部位组织细胞结合。结果 鹧鸪呼吸道同时表达SAα-2,3Gal和SAα-2,6Gal两种受体,但其消化道仅表达SAα-2,3Gal受体。SAα-2,3Gal受体在鹧鸪呼吸道各部位和消化道结肠上皮细胞呈强阳性弥漫分布;SAα-2,6Gal受体在呼吸道气管、支气管和次级支气管呈强阳性弥漫分布,而副支气管、消化道结肠均为缺乏或仅表达极少量。H9N1禽流感病毒与鹧鸪呼吸道各部位和消化道结肠均结合;人流感病毒H1N1与鹧鸪的气管、支气管、次级支气管结合,但未见与副支气管和结肠结合,此结果与鹧鸪呼吸道和消化道SAα-2,3Gal和SAα-2,6Gal受体分布总体一致。结论 鹧鸪同时表达SAα-2,3Gal和SAα-2,6Gal受体,能与禽流感病毒和人流感病毒结合,有助于禽流感病毒与人流感病毒基因重配,提示其可充当流感病毒潜在的中间宿主。     

基层医院急性心肌梗死不依从溶栓原因分析

随着人们生活水平提高,生活节奏加快,急性心肌梗死（AMI）发病率逐年上升。基层医院对AMI患者,在不能短时间内转入有条件做经皮冠脉介入术（PCI）医院的条件下,进行静脉溶栓,是及时开通阻塞血管,挽救生命,降低死亡率,提高生存质量的一种有效方法。2001年7月-2008年10月,通过对未能实施溶栓救治原因的分析,以求进～步提高溶栓率,改善AMI患者的生活质量,报告如下。