PCV2-ORF2 去信号肽基因的克隆与原核表达及对小鼠免疫效力的评价

 目的 通过基因工程的方法表达猪圆环病毒 2 型的 ORF2 蛋白,并对表达蛋白进行小鼠免疫效力评价,为猪圆环病毒病疫苗的研制提供技术支持。 方法 根据 GenBank 中猪圆环病毒 2 型（PCV-2) ORF2 基因序列,设计了 1 对引物。从疑似断奶仔猪多系统衰竭综合症（PMWS）的死亡仔猪病料中提取基因组 DNA,用 PCR 方法扩增出 ORF2 去信号肽基因,将该基因克隆至原核表达载体 pET32a,获得重组质粒,经 PCR﹑酶切以及序列分析鉴定,表明插入的片段为目的基因,插入的位置、大小和阅读框均正确,成功构建了重组质粒 pet32a-ORF2,阳性重组质粒转化大肠杆菌 Blgold（DE3）,用 IPTG 诱导表达并确定表达的最佳条件,表达产物经纯化后,以每只小鼠 0.2 mg 免疫 5 周龄的雌性小鼠,然后用 ELISA 检测免疫小鼠血清中抗体的产生情况。 结果 纯化的重组蛋白能使小鼠产生了抗猪圆环病毒的特异性抗体,从第 7 d 开始产生抗体,第 28 d 抗体水平达到最高,抗体可维持 7 周以上,并具有良好的安全性。 结论 表达目的蛋白能在小鼠体内产生特异性抗体,为进一步研究猪圆环病毒亚单位疫苗奠定了基础。     

一针法颈丛阻滞用于甲状腺手术160例临床观察

目的观察一针法颈丛阻滞在甲状腺手术中的临床效果。方法先做好麻醉术前的各项准备,入室后垫肩摆好体住让头尽量后仰,充分暴露阻滞所需解剖位置,包块大的一例先阻滞颈深丛4ml,浅丛6ml,观察5-10min后行另一侧阻滞;另一侧只阻滞颈浅丛,给局麻药6ml。手术时,视睛况给予镇静、降压药。结果有146倒血压升高,有12例出现喉返神经阻滞后的声嘶,5例出现气憋,3例出现霍奈氏综合征,无局麻药毒性反应及全脊麻发生。结论一针法颈丛阻滞与以往的三针法颈丛阻滞相比,对患者损伤小,阻滞效果亦能满足手术需要,并发症少,且定位方法简单易懂。     

原发性高血压患者血清HCY及NT-Pro BNP的水平变化及临床意义

目的探讨原发性高血压患者血清HCY与NT-Pro BNP水平的变化情况。方法选取2017年1月—2018年3月在我院进行就诊的原发性高血压患者100例作为实验组;选取同期健康体检人员100例作为对照组。两组患者均实施血清指标检测,对血清HCY、NT-Pro BNP指标进行测定,分析各指标水平。结果实验组血清HCY、NTPro BNP指标水平均高于对照组患者,两组数据对比,差异具有统计意义(P0.05)。结论原发性高血压患者血清HCY与NT-Pro BNP水平高于健康人员,且与高血压病症严重程度呈现出正相关,两种指标联合检测是原发性高血压病症发展评估指标。     

穴位埋藏麝香治疗卵巢癌健存八年1例

<正> 张某,女,47岁,教师。患者于1974年4月25日做刮宫术,术后感染,经用抗生素治疗月余出院。同年7月腹胀、恶心、乏力、消瘦,同时发现腹水,经某医院诊断为结核性腹膜炎(伴腹水),给于抗结核治疗而无效,且腹水增长很快,每月抽腹水一次,约2,000毫升。至1975年9月30日,因恶心呕吐、腹痛便闭、不排气而诊断为肠梗阻,转手术治疗。打开腹腔后,即有大量棕黄色腹水溢出,约15,000毫升。探查腹腔见肠壁上有许多灰白色颗粒,大如花生米,小如绿豆大,两侧卵巢呈莱花状,占满盆腔,天法切除,仅将肠梗阻解除后关     

食品用快餐盒中二氟二氯甲烷残留量测定

我们对快餐盒中二氟二氯甲烷(F—12)残留量进行了测定,我们于3个月内分别从工厂车间采回3批样品,每批样品均分成2组,1组敞开存放,另1组密封存放即按工厂办法保存。观察7周,每周测定1次,用顶空气相色谱法进行测定。结果:两种存放条件均有自然降低的规律,20000ppm以上,经7周后下降为2000ppm,几乎降低     

临床病理讨论 第84例——咳嗽、气急、呼吸困难

病历摘要患者女性 ,3 9岁 ,“因反复干咳、气急 5年余 ,近来病情加重”于 2 0 0 1年 12月 2 1日入院。患者 5年来反复出现干咳、气急 ,多于“感冒”后加重 ,痰少 ,多为白色泡沫状。但无咯血史。气急严重时不能平卧 ,吸气困难 ,尤其是平卧时出现吸气困难而被迫坐起后才逐渐缓解。每次发作时患者自服消炎、感冒等药对症治疗后好转。平时活动后亦有气急症状。当地就诊曾诊断为“哮喘” ,予以支气管解痉剂 ,但用后未能得到完全缓解。半个月前因感冒再次出现“哮喘”发作 ,当地予以青霉素、激素但无明显好转。 2 0 0 0年 3月 8日胸片示 :“左上肺…     

慢性前列腺炎182例临床治疗对比分析

慢性前列腺炎的治疗方法和药物选择很多，但疗效均不甚理想，复发率较高，故必须采取综合治疗。我院1998年3月～2004年10月选取泌尿外科门诊慢性前列腺患者182例，随机分为3组，其中中西医结合治疗组取得了较高的有效率和较低的复发率，现报告如下。     

后尿道狭窄病人的腔内治疗体会

后尿道狭窄或闭锁是泌尿外科常见病之一，多由外伤引起（骨盆骨折），部分为医源性损伤。传统的开放手术治疗损伤重，并发症多，随着科技发展，运用腔内技术治疗后尿道狭窄显示出极大优势。我院自2000～2005年共收治各类原因导致后尿道狭窄病例50例，采用窥镜直视下机械扩张，冷刀、电切单独或联用治疗，效果满意。现报告如下。     

30例前列腺增生临床分析

<正> 笔者对30例前列腺增生不愿意或不适宜手术治疗,且排除合并泌尿系结石的患者,通过中医辨证治疗,取得比较满意的疗效,现介绍如下。一临床资料诊断标准:1.夜尿在3次以上,伴有不同程度的排尿困难;2.直肠指检有前列腺增大、或膀胱残留尿超过75ml;3.B 超证实前列腺增大。30例中,年龄最小49岁,最大84岁,其中49～59岁4例,60～72岁22例,73～84岁4     

腺苷脱氨酶对良恶性胸液的鉴别诊断价值（摘要）

本收集了一组1994年7月至1994年12月因胸腔积液入院鉴别诊断患，最后确诊为肺癌胸膜腔转移(称癌性胸液)14例，结核性胸液10例，共24例。确诊前胸液均常规作腺苷脱氨酶(ADA)检查，现将结果分析如下：