Combination Adenovirus-Mediated HSV-tk/GCV and Antisense IGF-1 Gene Therapy for Rat Glioma

Ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ ｍｅｄｉａｔｅｄＨＳＶ ｔｋ/ＧＣＶｓｙｓｔｅｍｈａｓｂｅｅｎｅｘｔｅｎｓｉｖｅｌｙａｐｐｌｉｅｄｉｎｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｏｆｇｌｉｏｍａａｎｄｉｔａｌｓｏｈａｓｂｅｅｎｐｕｔｉｎｔｏｔｈｅｃｌｉｎｉｃａｌｐｈａｓｅＩｔｒｅａｔｍｅｎｔ .ＳｅｖｅｒａｌｓｔｕｄｉｅｓｒｅｐｏｒｔｅｄＨＳＶ ｔｋ/ＧＣＶｓｙｓｔｅｍｍａｙｍａｋｅｔｈｅｂｒａｉｎｔｕｍｏｒｓｒｅｇｒｅｓｓｅｄｔｏｔａｌｌｙａｎｄｔｈｅｓｕｒｖｉｖａｌｐｅｒｉｏｄｏｆｔｈｅｔｕｍｏ…     

颅底侧后方外科解剖与经岩骨入路的相关性研究

目的　充分了解颅底侧后方外科解剖结构 ,探明颅骨表面标志与其下方重要结构的对应关系 ,为安全、合理地运用经岩骨入路提供解剖学依据。方法　使用 2 0例颅骨和 17例尸头标本 ,按照手术入路将标本的侧后方颅骨切除 ,暴露横窦、乙状窦、岩上窦、窦硬膜角等结构 ,测量结构间的距离和角度 ,找出它们与颅底表面骨性标志的对应关系。结果　右侧横窦中段和外侧段的平均宽度大于左侧。横窦的走向与颞鳞 /顶乳缝交点和枕外粗隆之间的连线对应 ,乙状窦的走向与颞鳞 /顶乳缝交点和乳突尖的连线对应 ,两线构成的夹角为“窦间角” ,左侧平均为 10 2 0± 17 3度 ,右侧平均为10 0 0± 15 5度。乳突导静脉孔至乙状窦后壁距离左侧 12 0± 2 2mm ,右侧 12 3± 2 5mm。结论　从右侧开颅时必须考虑到左右横窦宽度的差异。可采用新的乙状窦前入路钻孔定位方法 :孔 1位于颞鳞 /顶乳缝交点前上方 ;孔 2位于颞鳞 /顶乳缝交点与枕外粗隆连线下方 ,前缘在乳突体后界 ;孔 3、4位于星点内侧 2～ 3cm ,颞鳞 /顶乳缝交点与枕外粗隆连线两侧 ;孔 5位于颧弓中点的上方。     

皮肤来源的前体细胞培养和向神经元分化的观察

目的　研究皮肤来源的前体细胞 (SKPs)的体外培养方法 ,为神经移植提供一种新的细胞来源。方法　分离培养小鼠皮肤组织的细胞 ,在无血清的培养基中培养 ,用机械方法对细胞进行传代 ,免疫细胞化学方法对细胞进行鉴定。结果　从成年和幼年的小鼠皮肤组织中分离培养出SKPs ,这种细胞在体外可以长期增殖和传代 ,体外培养可超过 8代 ,这种细胞大部分表达纤维粘连蛋白 ,约50 %的细胞表达巢蛋白。在有血清的培养基中培养 ,约 5%的细胞分化为神经元样细胞 ,表达神经元特异性烯醇化酶和神经微丝 ,部分细胞分化为脂肪细胞 ,其余的细胞分化为成纤维细胞样细胞。结论　皮肤组织中存在的前体细胞可在体外稳定增殖 ,能够分化为神经细胞、脂肪细胞和成纤维细胞样细胞。这种前体细胞有潜力成为神经移植的一种细胞来源     

一条脑胶质瘤相关的全长基因的生物信息学分析

目的报道一条脑胶质瘤相关的全长新基因的生物信息学分析及其研究的结果。方法对507E08克隆子进行了测序,生物信息学分析和Northern blot分析。结果507E08基因为全长基因,长度为2002bp,共编码203个氨基酸,命名为人核糖体蛋白L14．22。经Northern blot证实507E08基因在人正常脑组织中低表达,而在人脑胶质瘤中高表达。结论生物信息学是一种有效分析未知基因的工具。507E08基因可能是与人脑胶质瘤形成有关的一条全长新基因。     

人脐血间充质干细胞的分离培养与向神经元样细胞诱导分化的实验研究

目的 探讨来源于人脐血的间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)分化成神经元样细胞的可行性，以及在体外分离、纯化和扩增的条件。方法 无菌条件下收集正常足月剖腹产胎儿的脐带血，经肝素抗凝，用淋巴细胞分离液分离脐血的单个核细胞，以偏酸性的Mesencult^TM作为培养基进行培养和纯化，获得贴壁细胞，取扩增第三代后的MSCs向神经元样细胞诱导分化。用免疫荧光标记方法检测神经元特异性标记物。结果 来源于脐血的单个核细胞种植于特定的培养基中后，可产生贴壁细胞，主要表现为破骨样和间充质样细胞；传3代后，这些细胞可得到纯化、扩增；免疫组化标记显示经诱导后的MSCs表达神经丝蛋白(NF)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)。结论 源于脐血的MSCs在体外可以培养、扩增，并向神经元样细胞分化，可作为神经干细胞的来源而用于实验研究和临床。     

腺病毒载体基因转移系统的建立及其在脑肿瘤中的高效表达

构建了含有CMV启动子调控的HSV－tk基因的重组质粒pAdCMVtk，将其与缺陷型腺病毒Ad5大框架pJM17一起共转染病毒包装细胞293细胞，获得有感染能力但复制缺陷的重组腺病毒AdCMVtk，以其感染大鼠C5脑胶质瘤细胞后用PCR方法证实HSV-tk基因能被腺病毒有效转入靶细胞。用带报告基因LacZ的腺病毒感染大鼠C5脑胶质瘤细胞，经x-gal染色，证明腺病毒载体的基因转移效率可达100％。     

反转录病毒介导基因转移治疗脑肿瘤的安全性研究 Ⅰ.具有复制能力野生型反转录病毒检测

目的：检测反转录病毒介导的脑肿瘤基因治疗过程中具有复制能力野生型反转录病毒（RCR）。方法：RCR检测主要方法有：DNA聚合酶链式反应（PCR），反转录PCR（RT／PCR），Southern杂交以及neo基因和lacZ基因的补救分析。结果：建立了RCR的检测系统，从DNA水平、RNA水平和病毒活体水平对产HSV－TK病毒包装细胞（TK／VPC），C6转TK基因细胞和实验动物血液可能存在的RCR野生型病毒进行检测，结果均没有检测到野生型反转录病毒。结论：采用的反转录病毒基因转移系统没有产生野生型病毒，为临床试验的安全进行提供了保证。     

重型颅脑损伤后下消化道出血的临床分析

我科2002年8月～2004年11月收治重型颅脑损伤(GCS3～8分)375例,其中并发下消化道出血12例,现对其发病因素及防治特点作一回顾性分析.     

急性自发性硬脊膜外血肿的早期诊治

急性自发性硬脊膜外血肿（ＡＳＳＥＨ）是临床上少见的一种神经外科急症。近３年我们共收治６例,现分析总结如下。临床资料１．一般资料：男性４例,女性２例,年龄２０～６１岁。年龄最高者有高血压病史,另有１例女性为妊高征患者。所有患者发病前均无明显诱因,都以突...     

表达胶质细胞源性神经生长因子的骨髓基质干细胞的神经分化潜能

有研究表明，骨髓基质干细胞(BMSC)可以向神经细胞分化，且易于获取，因此被认为是治疗中枢神经系统疾病理想的细胞载体。我们以胶质细胞源性神经生长因子(GDNF)为目的基因，采用阳离子脂质体转染方法，对BMSC的基因工程化和神经分化潜能进行了初步研究。