转突变型淀粉样蛋白前体双荧光融合基因阿尔茨海默病小鼠模型的建立及初步鉴定

目的 探索建立转突变型淀粉样蛋白前体(APP)双荧光融合基因(CFP-54 bp-YFP-C99)转基因小鼠模型的可行性和基因整合效率.方法 采用显微注射法,将构建的突变型APP双荧光融合基因注入昆明小白鼠的受精卵,获取子代鼠,通过聚合酶链反应(PCR)方法初步鉴定基因的整合情况,以获得阳性鼠.结果 注射昆明小白鼠受精卵共2202枚,移植1806枚.受体鼠56只,怀孕鼠13只,共生产52只子代鼠,其中存活32只.PCR初步检查整合有突变型APP双荧光融合基因的阳性鼠2只,均为活鼠.移植鼠的总怀孕率为23.2%(13/56),突变型APP双荧光融合基因的整合效率为3.9%(2/52).结论 显微注射法建立转突变型APP双荧光融合基因的阿尔茨海默病小鼠模型是可行的,但转基因效率较低.     

中国急性缺血性卒中诊治指南2010版的制定及解读

自"中国急性缺血性卒中诊治指南2010"(简称新指南)于去年2月在中华神经科杂志发表以来,受到了全国广大医生的关注.在1年的推广使用过程中,我们收集到大量反馈意见,其中多数为积极肯定和有助于改进完善的建设性意见,也有对指南某些内容的提问或不理解的反馈.     

重复经颅磁刺激对丙泊酚所致学习记忆损伤小鼠的影响

目的观察重复经颅磁刺激（repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS）对丙泊酚所致学习记忆损伤小鼠的影响。方法将小鼠分为3组：脂肪乳（10%）组（L组）、丙泊酚（20 ml/kg）组（P组）、丙泊酚（20 ml/kg）＋经颅磁刺激组（T组）,每组10只。训练前30 min给药,T组小鼠给药后10 min接受300次刺激（10 Hz、1.0 Tesla、200μs）。利用避暗实验,记录小鼠训练当日和给药后24 h的潜伏期和错误次数。结果在训练当日,与L组相比,P组和T组潜伏期缩短（P〈0.01）,错误次数增多（P〈0.01）;用药后24 h,与P组相比,T组潜伏期延长（P〈0.01）,错误次数减少（P〈0.01）。结论rTMS能改善丙泊酚引起的学习记忆损害。     

神经营养因子-3基因修饰的嗅鞘细胞移植治疗自身免疫性脑脊髓炎的实验研究

目的 研究神经营养因子-3(NT-3)基因修饰的嗅鞘细胞移植对自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的髓鞘及轴突的修复作用.方法 用逆转录病毒介导神经营养因子-3(NT-3)基因转染嗅鞘细胞(OEC),将其移植入EAE侧脑室,荧光标记后观察其在体内的迁徙、分布特点;运用皮质体感诱发电位监测(CSEP)、超微结构观察、功能评分;RT-PCR方法检测NT-3mRNA转录水平,并与对照组、OEC移植组相比较等方法对髓鞘及轴突修复进行评价.结果 (1)OEC-NT-3在EAE体内存活,可广泛迁徙至病灶远端且至少可以持续存活4周.(2)超微结构发现转基因治疗组4周后,轴索结构完整,周围髓鞘板层结构清楚,明显优于另外二组.(3)4周后,转基因组CSEP潜伏期明显缩短,波幅增加,明显优于其他二组,差异有统计学意义(P<0.05).(4)转基因组NT-3mRNA转录水平为(212.32±16.14)×10-2,明显高于OEC组(1.23±0.13)×10-2及对照组(1.98±0.19)×10-2,差异有统计学意义(P<0.01).结论 NT-3基因修饰的OEC在持续表达神经营养因子,且可促进EAE的神经修复.     

三种无创检查对冠心病的诊断价值

目的 探讨平板运动试验(TET)、动态心电图(Holter)和超声心动图(UCG)检查对冠心病的诊断价值.方法 189例因胸闷、心前区疼痛拟诊冠心病患者,行TET、Holter、UCG检查,并以冠状动脉造影(CAG)检查结果为金标准评价三项无创检查的诊断价值.结果 CAG榆查确诊冠心病108例,TET、Holter和UCG诊断冠心病的敏感性分别为70.4%、57.4%和44.4%,特异性分别为69.1%、60.5%和81.5%;联合两种检查诊断冠心病的敏感性依次为TET+Holter 89.8%、TET+UCG 73.3%和Holter+UCG 71.1%,特异性依次为TET+Hoher 75.8%、TET+UCG 73%和Holter+UCG 69.2%.结论 三种无创检查中,TET诊断冠心病的敏感性最高,UCG特异性最高但敏感性差;联合任何两种无创检查方法均可提高诊断冠心病的符合率.     

VEGF在人胚胎干细胞向神经元分化中作用的研究

目的观察血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在人胚胎干细胞分化为神经元过程中是否发挥作用及相关机制。方法人胚胎干细胞经拟胚体向神经元分化,分为3组：A组为常规诱导组,B组为常规诱导＋VEGF（10ng／mL）作用组,C组为常规诱导＋VEGF（10ng／mL）＋VEGFR2／Fc嵌合体（10ng／mL）作用组;用RT-PCR、免疫荧光法检测各阶段细胞标志物,计算并用流式细胞仪检测各组不同阶段细胞阳性率。结果用RT-PCR分别检测到OCT4、Nestin、MAP2表达;免疫荧光法检测显示B组产生神经干细胞、分化为神经元的阳性率明显高于A、C两组,差异有统计学意义（P〈0．01）,A、C两组之间无显著性差异（P〉0．05）;流式细胞仪检测与免疫荧光法相似。结论人胚胎干细胞体外分化过程中血管内皮生长因子通过血管内皮生长因子受体2来促进神经干细胞增殖及向神经元分化。     

江苏省基层医疗机构医疗废物管理现状调查与分析

目的:了解江苏省基层医疗机构医疗废物管理现状,为政府制定决策提供依据?方法:采用抽样方法,选取苏南?苏中?苏北中的3个市作为实地调研单位,依据国家目前颁布出台的医疗废物相关法律法规,共调研了22家基层医疗机构?结果:基层医疗机构在医疗废物管理中存在一定的不足之处,在利器存放?暂存地建设?医疗废物收集时间频次以及集中处置问题等方面还需进一步优化?结论:政府和行政主管部门在制定具体政策时应考虑基层医疗机构的实际情况,采取切实可行的政策和措施,真正做好医疗废物减量化?无害化和资源化处理?     

“医院感染控制宣传周”对医务人员医院感染认知的影响 FREE

目的了解“医院感染控制宣传周”活动对医务人员相关医院感染知识的认知影响。方法采用问卷调查方法,在“医院感染控制宣传周”活动前后分别对医务人员进行调查。结果医务人员对医院感染知识的得分率在“医院感染控制宣传周”活动后为65.66%,较活动前60.13%明显升高（χ2=91.08,P＜0.01）,其中对“手卫生指征”得分率最高,达98.86%。对“职业暴露预防措施”认知率,活动后为60.29%,明显高于活动前的45.93%（χ2=28.95,P＜0.01）。结论“医院感染控制宣传周”对于提高医务人员医院感染的认知率有积极的促进作用,应予以推广。     

Effect of VEGF on neural differentiation of human embryonic stem cells <Emphasis Type="Italic">in vitro</Emphasis>

The effects of vascular endothelial growth factor （VEGF） on neural differentiation of human embryonic stem cells （hESCs） in vitro and the possible mechanism were observed. The hESCs lines, TJMU1 and TJMU2, were established and stored by our laboratory, hESCs differentiated into neuronal cells through embryonic body formation. In this induction process, hESCs were divided into three groups： group A, routine induction; group B, routine induction＋10 ng/mL VEGF; group C, routine in- duction＋10 ng/mL VEGF＋10 ng/mL VEGFR2/Fc. OCT4, Nestin and GFAP in each group were de- tected by RT-PCR, and the cells expressing Nestin and GFAP were counted by immunofluorescence. The percentage of Nestin positive cells in group B was significantly higher than in groups A and C, while the percentage of GFAP positive cells in group B was significantly lower than in groups A and C （P〈0.01）. There was no significant difference between groups A and C （P〉0.05）. It was concluded that VEGF, via VEGFR2, stimulated the neural differentiation of hESCs in vitro.     

短暂脑缺血再灌流后ATP含量变化与细胞凋亡的关系

目的:探讨短暂脑缺血再灌流后能量的动态变化及其与细胞凋亡之间的关系。方法:采用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,缺血10min后于再灌流后0h、1h、3h、6h、12h、24h和72h应用毛细血管电泳法分别测定额顶叶皮质的ATP含量,同时采用荧光显微镜、流式细胞仪和脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况,分析两者之间的关系。结果:缺血10min后额顶叶皮质ATP的含量急剧下降至对照组的20%。再灌流后ATP的含量逐渐恢复,于再灌流后1h、3h、6h和12h恢复至对照组的70.5%、65.7%、84.8%和86.9%。再灌流后24hATP含量再次下降,再灌流后24h和72hATP含量仅为对照组的50%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01和0.05)。缺血10min再灌流24h额顶叶皮质开始出现细胞凋亡现象,并随着时间延长凋亡细胞数目逐渐增加。结论:短暂脑缺血再灌流后大鼠额顶叶皮质存在细胞能量系统功能恢复滞后的现象和继发性细胞能量系统功能衰竭的现象,其中继发性细胞能量系统功能衰竭现象与细胞凋亡之间可能存在互为因果的关系。