云南普米、傈僳、纳西、怒四个少数民族补体C4遗传多态性的检测

为了解人类补体成份Ｃ４遗传多态性，用神经氨酸酶和羧肽酶Ｂ处理ＥＤＴＡ抗凝血浆，继以琼脂糖高压电泳、免疫固定及薄层激光密度扫描等技术对云南普米、傈僳、纳西和怒４个少数民族进行补体Ｃ４遗传多态性的检测，并与湖北汉族进行对比。结果显示：５个民族的Ｃ４Ａ／Ｃ４Ｂ表型分布不完全相同。在基因频率方面：Ｃ４Ａ除普米族以Ｃ４Ｑ０最高外，其余均以Ｃ４Ａ３为高；Ｃ４Ｂ在５个民族中都以Ｃ４Ｂ１最高，其余参差不等。湖北汉族与４个少数民族之间的差异主要表现在Ｃ４Ａ２，Ｃ４Ａ３，Ｃ４Ａ５和Ｃ４Ｂ２２；４个少数民族之间同样存在较大差异，普米族与其他３个少数民族的差异最为显著，其次是傈僳族，纳西族和怒族之间的差异不显著。     

在大鼠脑发育过程中Cdk5激活剂(p39)mRNA的表达

【目的】探讨Cdk5的2种激活剂p35和p39在脑发育过程中的不同表达。【方法】用Northern blot法和原位杂交法检测p39在50只大鼠脑发育过程的表达。【结果】Northern blot显示,在15天胚胎和新生大鼠脑中,p39表达较低,出生后1～3周表达最显著,到成年大鼠脑,表达降低到与新生大鼠脑相同的水平。原位杂交法显示,p39的mRNA在新生大鼠脑的所有区域神经元中的表达很弱,而在3周龄大鼠脑的所有区域转录水平最高,到成年大鼠脑,在大多数神经元中表达都降低,除小脑浦肯野细胞和颗粒细胞还保持着高水平的表达。【结论】结果表明,在大鼠脑发育的不同阶段,p39与以往发表的p35表达结果在空间上和时间上有不同的表达,它们可能在不同的脑区域中起着不同的作用。     

湖北汉族人群对乙肝疫苗免疫应答的水平与HLA-I类分子多态性的相关研究

目的：探讨人群对乙肝疫苗免疫应答与ＨＬＡ遗传多态性的相关性。方法：对５２名湖北汉族健康自愿者进行ＨＢＶ血源疫苗标准全程接种,共３次（第０、１、６月）,末次接种后８ｗ用酶免疫法（ＥＩＡ）检测血清抗ＨＢｓ抗体水平：Ｓ／Ｎ≥２１为应答者;Ｓ／Ｎ＜２１为无应答者。同时对受试者进行ＨＬＡＩ类抗原多态性检测。结果：应答者４２人（８１０％）,无应答者１０人（１９０％）;无应答者与ＨＬＡＢ３９具有显著相关性,ＲＲ＝１７５,χ２＝５２２,Ｐ＜００５,而与ＨＬＡＢ６２呈负相关,χ２＝６４１,Ｐ＜００５。结论：在湖北汉族人群中,ＨＬＡＢ３９表型阳性个体对乙肝疫苗免疫应答水平明显低于其他个体,而ＨＬＡＢ６２表型阳性个体明显高于其他个体。     

脑源性神经营养因子与中枢神经修复再生

神经营养因子在保护神经元存活并促进其突起生长发育过程中,常出现基因表达的时相变异,对不同种类的神经元有明显的作用选择性.脑源性神经营养因子(BDNF)作为神经营养因子家族中的一员,广泛分布于大脑中,是一类可促进运动神经元、感觉神经元、基底节前脑胆碱能神经元、皮层神经元、海马神经元、多巴胺能神经元等的存活和生长发育并能防止它们受损死亡,改善神经元病理状态、促进受损伤神经元再生及分化成熟等生物效应的多肽或蛋白质,在中枢神经系统(CNS)的损伤修复中具有重要的作用.本文就其理化性质、生物学特性及在中枢神经修复与再生中的作用等进行综述.     

同种异体骨髓间充质干细胞移植治疗创伤性脑损伤的遗传安全性评估

目的初步探讨同种异体骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗创伤性脑损伤(TBI)的遗传安全性。方法 (1)体内实验:分离提取并传代培养雄性SD大鼠的BMSCs。将微量药物注射套管植入并固定于12只雌性SD大鼠左侧侧脑室3 d后, 用气压精密打击器对大鼠右侧大脑皮层进行打击以制备成中度TBI模型。分别于造模后4 h、3 d、6 d、9 d、12 d时经套管对TBI大鼠进行单次/多次BMSCs输注(2.5×105个/次, 总体积10 μL), 并分别取造模后48 h、72 h、10 d和14 d时TBI大鼠(每时间点3只)的脑组织制备成石蜡标本, 应用免疫荧光染色检测小胶质细胞激活情况, 应用RNAscope?技术检测星形胶质细胞、神经元、小胶质细胞与移植的BMSCs的共定位情况, 以观察同种异体BMSCs移植至TBI宿主体内后是否与宿主脑内细胞发生整合现象。(2)体外实验:先将冻存复苏的小胶质细胞株BV2用绿色荧光蛋白(GFP)阳性慢病毒颗粒转染, 再将pHrodo RED探针预标记的BMSCs与经脂多糖预处理的BV2细胞分别按一定比例(BV2∶BMSCs=1∶1、1∶2、2∶1)进行共...     

慢病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因修饰人骨髓基质细胞***☆

背景：原代细胞的转染效率低下一直是制约其发展的主要因素之一,慢病毒转染以其独特的优势成为各种干细胞基因修饰良好的转染方法。 目的：验证慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白基因修饰人骨髓基质细胞的可行性。 方法：将携带增强型绿色荧光蛋白基因的慢病毒在含血清或无血清条件下按不同的MOI值分别转染人骨髓基质细胞,长期观察荧光蛋白表达情况。将经修饰的细胞通过立体定向移植入大鼠纹状体内,观察移植细胞的存活及目的基因的表达情况。 结果与结论：基因转染48 h后,可见人骨髓基质细胞成功表达绿色荧光蛋白,无血清条件下的转染效率高于含血清条件下的转染效率,转染成功的细胞在体外持续培养2个月以上未见明显的荧光消减。转染后的细胞可在大鼠纹状体存活并持续表达绿色荧光蛋白2个月以上。提示慢病毒是一种高效的转染人骨髓基质细胞的载体,慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白基因转染可以作为人骨髓基质细胞的示踪标志用于体内移植研究。     

内镜下颅底重建的动物实验研究

目的 研究鼻中隔带蒂黏膜瓣修复颅底缺损及放疗对愈后的影响。方法 对10例新鲜白兔尸体的鼻中隔黏膜血供行解剖学研究。将20只健康新西兰大白兔作为实验动物,建立颅底缺损-脑脊液鼻漏模型并利用鼻中隔带蒂黏膜瓣修复颅底缺损,术后7、10d在鼻内镜下观察切口愈合及脑脊液鼻漏情况,术后21d随机抽出10只接受手术治疗的兔子作为实验组行颅脑放疗,其余10只作为对照组,放疗后1、14d实验组和对照组分别于鼻内镜下观察修复区域。 结果7例鼻中隔黏膜瓣血供由鼻中隔后下端进入,2例血供由近鼻中隔后端约1cm处进入,1例未见明显血管分布,成功构建了颅底缺损-脑脊液鼻漏模型并成功实施鼻中隔带蒂黏膜瓣修复颅底缺损手术20例,均全部存活,切口愈合良好,无脑脊液鼻漏,无组织膨出及神经功能缺失等并发症;10只接受术后放疗的兔子及对照组的10只兔子均全部存活,放疗组兔子切口愈合较慢。结论 鼻中隔带蒂黏膜瓣修复颅底缺损的动物实验模型设计可行,放疗对带蒂鼻中隔黏膜瓣有延迟愈合的影响。     

RAN干扰抑制AQP1表达对Hep-2细胞迁移能力影响的实验

目的通过RNA干扰（RNA interference,RNAi）抑制Hep-2细胞中水通道蛋白-1（aquaporin-1,AQP1）的表达,探讨AQP1对喉癌细胞黏附、运动及侵袭能力的影响。方法构建AQPl特异性的siRNA重组质粒,免疫组化检测RNAi抑制AQP1表达的效果;分别用细胞基质黏附实验、Transwell小室和Matrigel基质侵袭实验检测细胞黏附、运动和侵袭能力。结果AQP1-siRNA重组质粒有效的抑制了Hep-2细胞中AQP1的表达。细胞基质黏附实验结果显示：Hep-2细胞与细胞外基质的黏附率,AQP1-siRNA实验组为（41．6±4．2）％与阴性对照组（43．6±3．9）％和空白对照组（45．2±4．0）％无明显差异（尸均〉0．05）;体外细胞运动和侵袭实验结果显示：Hep-2的穿膜细胞数,实验组分别为（36±3）和（23±4）个／高倍镜,显著低于空白对照组的（70±5）和（65±4）个,高倍镜以及阴性对照组的（72±4）和（69±4）个／高倍镜（P均〈0．01）,而后两组细胞间运动和侵袭能力方面差异均无显著性（P〉0．05）。结论AQP1 RNAi重组质粒能够阻断AQP1的表达,对Hep-2细胞的黏附力没有影响,但能够抑制喉癌细胞的运动和侵袭能力,与喉癌的转移机制密切相关。     

内镜下治疗鼻内翻性乳头状瘤89例临床分析

目的 探讨内镜下治疗鼻内翻性乳头状瘤(nasal inverted papilloma,NIP)的疗效.方法 回顾性分析2003年5月至2008年5月接受鼻内镜手术的89例NIP患者的临床资料.根据鼻内镜与CT和(或)MRI检查,明确病变范围,按Han(2001)的NIP临床分级标准,进行临床分级,并进行随访.结果 对89例NIP患者随访1～5年,其中鼻内镜手术72例,复发率为12.5%(9/72);鼻内镜联合改良柯-陆术式17例,复发率为11.8%(2/17).不同手术方式患者的复发率差异无统计学意义(X~2=0.007,P>0.05).89例NIP患者中Ⅰ级55例,复发率为9.1%(5/55);Ⅱ级29例,复发率为17.2%(5/29);Ⅲ级5例,复发率为20%(1/5),不同临床分级患者的复发率差异无统计学意义(P>0.05).89例NIP患者中首次手术67例,复发率为7.5%(5/67),二次手术22例,复发率为27.3%(6/22),差异有统计学意义(X~2=4.311,P<0.05).89例NIP患者中术后病理证实肿瘤切缘阴性70例,复发率8.6%(6/70),切缘阳性19例,复发率26.3%(5/19),两组差异无统计学意义(X~2=2.860,P=0.09).结论 鼻内镜下行NIP切除术是一种切实可行的方法 ,手术创伤小,可基本完整保留鼻腔、鼻窦正常的解剖结构,但仍有一定的复发率.手术切缘黏膜组织病理学检查可在一定程度上判断肿瘤的预后.