苦豆子生物碱单体的分离纯化工艺研究

在对苦豆子的酸水浸提液进行了超滤和脱色预分离的基础上,采用不同的有机溶剂萃取和硅胶柱层析对其中主要的生物碱进行分离纯化及条件优化.结果表明合适的生物碱萃取富集条件是用氯仿为溶剂,Ph=10.5.该氯仿萃取液用硅胶柱层析分离,洗脱剂为氯仿-甲醇-氨水(5:0.4:0.01,V/V/V),洗脱速度1柱床体积·h-1,得到峰1～峰3.峰1和峰2中的化合物经丙酮结晶和重结晶分别得到纯度99%以上的氧化槐果碱和氧化苦参碱;峰3对应的组分再经硅胶柱层析,洗脱剂为丙酮-甲醇(10:1,V/V),洗脱速度1柱床体积·h-1,得到峰4～峰6,峰4中的化合物经石油醚结晶和重结晶,可以得到纯度95.8%的槐定碱.采用了HPLC-MS,IR,熔点测定和薄层色谱等方法进行上述生物碱单体的定性定量及分子结构确定. 本研究为深度开发苦豆子生物碱资源和为制备医药工业所需的高纯度生物碱原料提供了依据.     

大豆皂甙A的分离与ESI／MS分析

大豆胚芽中皂甙的含量是子叶的6－14倍,soyasaponin A仅存在于胚芽中,以硅胶柱色谱和制备高效液相色谱法从大豆胚芽的乙醇提取物中分离出二种A组皂甙,进行定性反应。UV和ESI／MS分析确证其结构为soyasaponin A1和soyusaponin A4。实验证明大豆皂甙的ESI／MS裂解特征与FD－MS和FAB－MS不同,特别适于皂甙等强极性难挥发的糖甙化合物的结构解析。     

液质联用方法测定微量银杏内酯

用液质联用方法测定了微量银杏内酯的含量,分析柱为Lichrospher C-18柱,流动相为甲醇-水,采用梯度洗脱,质谱作为检测器,选择离子采集方式.本方法测定银杏内酯的线性范围为0.12～68.0 μg/mL,相关系数为0.998 4～0.999 4,相对标准偏差为0.38%～0.44%.     

橄榄酚类提取物的抗氧化性能

为进一步开发利用橄榄中的酚类物质,文中通过测定橄榄酚类提取物的铁离子还原能力、亚铁离子螯合能力,及对2,2'-氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)自由基(ABTS+.)、1,1-二苯-2-苦基苯肼自由基(DPPH.)、羟基自由基(.OH)和超氧阴离子自由基(O2-.)的清除能力,以考察橄榄酚类提取物的体外抗氧化性能,并与食品抗氧化剂丁基羟基茴香醚(BHA)和Vc进行对比。结果表明:橄榄酚类提取物具有较好的体外抗氧化性能,其ABTS+.、DPPH.清除率分别高达99%和95%以上,.OH、O2-.清除率可达50%左右,铁离子还原力约1 700μmol/L Trolox,亚铁离子螯合率最高为14.9%。且提取物ABTS+.、DPPH.和.OH清除能力及铁离子还原能力均强于BHA和Vc,而O2-.清除能力强于BHA但弱于Vc。另外,橄榄酚类粗提物和纯化物相同浓度下的ABTS+.、DPPH.、.OH清除能力和铁离子还原能力相当(P>0.05),而其O2-.清除能力和亚铁离子螯合能力表现有所差异。     

液质联用法同时测定黄酒中糖精钠和甜蜜素

采用液质联用同时测定黄酒中的糖精钠和甜蜜素,该方法排除了液相色谱检测时糖精钠的假阳性。分析柱为LichrospherC-18柱2.1×250m m,流动相为甲醇-乙酸铵水溶液,质谱作为检测器,选择离子采集方式。糖精钠在0.0196～0.392μg范围内线性相关系数为0.9995,相对标准偏差为1.62%,回收率在97.1%～101.2%之间;甜蜜素在0.0139～0.973μg范围内线性相关系数为0.9996,相对标准偏差为1.41%,回收率在98.6%～101.6%之间。本方法简便、快速、准确。     

UPLC快速测定可溶性肽或蛋白中谷氨酰胺含量

建立了UPLC测定谷氨酰胺的方法。采用BTI([bis(trifluoroacetoxy)iodo]benzene,BTI)衍生化肽或蛋白中非氮端的谷氨酰胺(Glutamine,Gln),衍生产物L-2,4-二氨基丁酸(L-2,4-Diaminobutyric acid,DABA)经2,4-二硝基氟苯(2,4-Dinitrofluorobenzene,DNFB)紫外显色后,用超高效液相色谱仪(UPLC)在355nm下进行检测测定。结果表明,DABA的最低检出限为0.2ng/mL,线性范围为1～10μg/mL。经Ala-Gln、β-乳球蛋白、α-乳清蛋白和溶菌酶四种蛋白标品检验,测得标样中Gln的回收率为93%±2%～98%±3%。所用方法具有检出限低、样品用量少、高效快速等特点。     

抗氧化性样品的剖析

从一份抗氧化性样品中分离出三个组分（Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ）。组分Ⅰ经元素分析和ＩＲ光谱鉴定证明是双苯胺棉酚，这个鉴定结果和先前的＾１ＨＮＭＲ鉴定结果是一致的。     

RP-HPLC法测定酒花中的黄腐酚

建立了反相高效液相色谱法(RP-HPLC)检测酒花中黄腐酚含量的方法.选用色谱柱Zorbax Eclipse XDB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇和0.2%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱.枉温25℃,流速0.5mL/min,检测波长370nm.在此条件下,黄腐酚得到很好分离,在1.13～113mg/L范围内线性关系良好,R2=0.9992,外加标回收率在95.05%～104.03%之间,RSD=2.71%.该方法可以简便、准确地测定酒花中黄腐酚的含量.     

癞葡萄皂苷的分离、纯化及其结构鉴定

分别使用AB-8大孔树脂、C18填料柱,从癞葡萄醇提取物中分离纯化癞葡萄皂苷,并用高效液相色谱法测定所得化合物的相对含量,最后使用质谱、核磁共振的方法对其分子结构进行了鉴定.结果成功分离纯化出一种皂苷,经测定,该皂苷的纯度为95.70%,结构鉴定为葫芦烷-5-烯-3β,22,23,24,25-四羟基-3-O-3-β-D-吡喃葡萄糖(1→6)-D-吡喃葡萄糖苷.     

高效液相色谱—电喷雾质谱联用法检测大豆异黄酮和皂苷

应用高效液相色谱－电喷雾质谱联用法，直接对大豆胚芽的70％乙醇室温提取液进行检测，根据各色谱峰的质谱特征，在室温提取液中鉴定出9种异黄酮，7种A组皂苷，4种B组皂苷和2种E组皂苷，结果证明对于复杂天然产物的定性定量分析，高效液相色谱－电喷雾质谱（HPLC／ESI－MS）联用分析法是一种方便快速有效的方法。