UPLC快速测定可溶性肽或蛋白中谷氨酰胺含量

建立了UPLC测定谷氨酰胺的方法。采用BTI（[bis（trifluoroacetoxy）iodo]benzene,BTI）衍生化肽或蛋白中非氮端的谷氨酰胺（Glutamine,Gln）,衍生产物L-2,4-二氨基丁酸（L-2,4-Diaminobutyric acid,DABA）经2,4-二硝基氟苯（2,4-Dinitrofluorobenzene,DNFB）紫外显色后,用超高效液相色谱仪（UPLC）在355nm下进行检测测定。结果表明,DABA的最低检出限为0.2ng/mL,线性范围为1～10μg/mL。经Ala-Gln、β-乳球蛋白、α-乳清蛋白和溶菌酶四种蛋白标品检验,测得标样中Gln的回收率为93%±2%～98%±3%。所用方法具有检出限低、样品用量少、高效快速等特点。      

大豆皂甙A的分离与ESI/MS分析

大豆胚芽中皂甙的含量是子叶的6～14倍,soyasaponin A仅存在于胚芽中.以硅胶柱色谱和制备高效液相色谱法从大豆胚芽的乙醇提取物中分离出二种A组皂甙,进行定性反应.UV和ESI/MS分析确证其结构为soyasaponin A     

蛋白质和肽中谷氨酰胺的HPLC定量分析

建立了肽及蛋白质中定量Ｇｌｎ 的ＨＰＬＣ 法。Ｇｌｎ 残基与双（１ ,１三氟乙酸基） 碘苯（ＢＴＩ） 反应后酸水解,生成的Ｌ２ ,４二氨基酸（ＤＡＢＡ） 用苯异硫氰酸酯（ＰＩＴＣ） 衍生化后,ＨＰＬＣ分析检测。用已知小肽和蛋白质（Ｇｌｙ ＝ Ｇｌｎ ,溶菌酶） 试验表明,回收率为９３－３ ％ ±５ ．０ ％ ～９６ ．０ ％ ±２ ．０ ％ ,精密度０－１５２８ ,标准偏差３－２２ ％ 。     

乌饭树树叶中黄酮类色素清除活性氧自由基的研究

本文对乌饭树树叶中提取出的色素进行了分离纯化,分离出了四种黄酮类物质。并且对这四种物质清除活性氧自由基的能力进行了研究,发现乌饭树提取物都具有很强的清除自由基能力,清除能力最强的槲皮素和6#提取物的IC50达到了5.9μg/ml左右。     

大豆粕酒精可溶物的成分分离与鉴定

使用氯仿/甲醇(2:1)溶液,石油醚,丙酮,正丁醇及醋酸铅沉淀的方法将大豆粕酒精可溶物分离为B1、B2、B3、B4、B5、B66个组分.初步判定B1为甾甙类物质、B2为中性脂肪类物质.红外光谱(IR)分析确定了B6组分为磷脂,高效液相色谱(HPLC)确定B5为大豆低聚糖,其中蔗糖、棉籽糖和水苏糖的含量分别为32.17%,4.27%,17.54%.液质联用(LC-MS)的方法确定B3组分中4种异黄酮和一种大豆皂甙,即金雀异黄甙(genistin),大豆甙(daidzin),丙二酰金雀异黄甙(6"-O-maloyl-genistin),丙二酰大豆甙(6"-O-malonyldaidzin)和大豆皂甙Bb(soy saponin Bb).     

中间水分食品体系中乳球蛋白糖基化位点的鉴定

在中间水分食品体系中,乳球蛋白很容易与葡萄糖等还原糖发生美拉德反应,使食品的色泽、风味和质构等发生变化。为了深入理解中间水分食品在贮藏过程中蛋白发生的糖基化修饰,电喷雾飞行时间质谱（ESI-TOF/MS）被用来分析蛋白经胰蛋白酶水解后的肽段,以便鉴定乳球蛋白与葡萄糖在45℃下贮藏2d后的糖基化位点。结果显示,乳球蛋白上被糖基化的氨基酸残基有L1、K47、K70、K77、K83、K91、K100和K135。      

超高效液相色谱-质谱联用法快速测定豆酱中PC、LPC和GPC的含量

建立快速、简单、准确测定豆酱中活性成分磷脂酰胆碱（PC）与其降解产物溶血磷脂酰胆碱（LPC）和甘油磷脂酰胆碱（GPC）含量的超高效液相色谱-质谱联用（UPLC-MS）分析方法。将豆酱样品经过预处理后,以乙腈、醋酸铵为流动相,使用Waters ACQUITY UPLC超高效液相色谱仪,经ACQUITY UPLC BEH HILIC色谱柱（2.1×100mm,粒径1.7μm）分离,利用质谱定性定量测定其含量。质谱在电喷雾正离子模式下,对m/z782、m/z520和m/z258进行选择离子监测。该方法下PC、LPC和GPC分别在0.191～1.910μg/mL,0.236～2.360μg/mL和0.016～0.160μg/mL范围内峰面积和浓度呈良好的线性关系,相关系数R2PC=0.9959、R2LPC=0.9986和RG2PC=0.9991;PC、LPC和GPC的最低检测限分别为0.05、0.07、0.005μg/mL,最低定量限分别为0.19、0.24、0.016μg/mL;方法的平均回收率为93.2%～97.8%,相对标准偏差为1.5%～3.5%。此方法准确,灵敏度高,样品处理简单,分析时间短,可快速测定豆酱中PC与其降解产物LPC和GPC含量。      

N-乙酰氨基葡萄糖月桂酸酯的非水相催化合成及其抗菌性的初探

研究了非水相酶催化合成N-乙酰氨基葡萄糖月桂酸酯的反应条件,并对其抑菌性进行了探索。对影响合成N-乙酰氨基葡萄糖月桂酸酯反应的因素（DMF的含量、温度、反应时间、底物摩尔比、加酶量）进行了探讨。结果显示,N-乙酰氨基葡萄糖月桂酸酯合成反应的最佳溶剂为叔丁醇和DMF的混合溶剂,摩尔比为叔丁醇∶DMF=7∶3,在此溶剂条件下,在酸糖摩尔比为3∶1,糖浓度为1mmol/L,反应温度为60℃,反应时间为48h,加酶量为20mg/mL时,产率达到最高。N-乙酰氨基葡萄糖月桂酸酯抑菌性的研究结果显示,该物质对革兰氏阳性菌的抑制性稍强,而对酵母基本无抑制作用。      

大豆胚芽中大豆皂甙B的分离与鉴定

大豆胚芽中皂甙的含量是子叶的6－14倍,soyasaponin A和soyasaponin Ba仅存在于胚芽中,从大豆胚芽的乙醇提取物中提取总糖甙,以硅胶柱层析和反相制备相色谱分离出两种B组皂甙,以UV,IR,ESI／MS和^13C,^1H,DEPT NMR分析确证其结构为soyassaponin Ba和Bb,实验证明大豆皂甙的ESI／MS裂解特征与FD－MS和FAB－MS不同,ESI／MS特别适于皂甙等强极性难挥发的糖甙化合物的结构解析。     

高效液相色谱-电喷雾质谱联用法检测大豆异黄酮和皂苷

应用高效液相色谱 电喷雾质谱联用法 ,直接对大豆胚芽的 70 %乙醇室温提取液进行检测 .根据各色谱峰的质谱特征 ,在室温提取液中鉴定出 9种异黄酮 ,7种A组皂苷 ,4种B组皂苷和2种E组皂苷 .结果证明对于复杂天然产物的定性定量分析 ,高效液相色谱 电喷雾质谱 (HPLC/ESI MS)联用分析法是一种方便快捷有效的方法 .