固定化Pseudomonas putida CGMCC3830转化3-氰基吡啶制备烟酸

采用固定化Pseudomonas putida CGMCC3830转化3-氰基吡啶制备烟酸。选择海藻酸钠作为包埋材料进行固定化,考察固定化细胞的制备条件、转化条件以及批次稳定性。结果表明,优化的固定化条件为:海藻酸钠2 g/dL,氯化钙0.4 g/dL,固化时间6 h;最适转化条件为:温度35℃,pH 7.0,底物浓度100 mmol/L。批次转化实验结果显示,当底物浓度为100 mmol/L时,固定化细胞重复使用10次,酶活仍保留59.1%,产物烟酸的得率为91.8 g/g细胞干重,而游离细胞的使用3次后,酶活下降至45.6%。     

产褐藻胶裂解酶菌株Cobetia sp. WG-007的筛选及发酵优化

以褐藻酸钠为唯一碳源,从腐烂的海带中筛选出一株高效降解褐藻胶的菌株,经形态、生理生化和16S rDNA测序鉴定,将其命名为Cobetia sp.WG-007。采用单因素和正交试验优化,确定该菌株摇瓶发酵最适产酶条件为褐藻酸钠6.0 g/L,蛋白胨5.0 g/L,NaCl 20 g/L、K2HPO40.25 g/L,菌株在25℃条件下发酵培养30 h达到最高酶活,为160.7 U/mL,相比优化前酶活力提高了3.52倍。     

蛋白酶复合水解文蛤肉制备海鲜香料的工艺

以感官评分为指标,比较了不同种类蛋白酶和用酶量对文蛤肉水解液风味的影响,并采用正交实验优化了文蛤肉二段法复合酶解工艺条件:复合蛋白酶75 U/g,中性蛋白酶75 U/g,在45℃、自然pH下水解3 h;然后加入风味蛋白酶50 U/g,在50℃、自然pH下水解1 h。最终获得的水解液色泽为棕黄色,具有咸鲜滋味和明显蛤类特征香气,感官评分为5.5分,味精当量EUC高达53.25 g/L,氨基氮含量为4.16 g/L,水解度为35.3%,水解得率为36.4%,多肽含量为21.8 g/L。     

酶法制备壳寡糖及其抗肿瘤活性评价

为进一步分析壳寡糖抗肿瘤活性及其机制,采用酶法制备工艺获取组分清晰的壳寡糖,优化酶解条件为酶解时间4 h、加酶量120 U/g,结合乙醇沉淀、超滤和纳滤联用的工艺获得聚合度2～4的壳寡糖。比较评价壳寡糖及其与阿霉素联用对3种肿瘤细胞的抑制效果,其中作用最为明显的人乳腺癌MDA-MB-231的细胞生存率降低20%。利用细胞迁移实验和激光共聚焦分析机制,得出壳寡糖可抑制MDA-MB-231细胞迁移并促进阿霉素入核。由此说明,壳寡糖可增强MDA-MB-231细胞对阿霉素的敏感性。     

UPLC法测定桦褐孔菌菌丝体中甾类化合物的质量分数

建立了采用超高效液相色谱法(UPLC)测定桦褐孔菌发酵菌丝体中的白桦脂醇、麦角甾醇、羊毛甾醇、胆甾醇、豆甾醇和谷甾醇的质量分数的方法。色谱条件以shim-packXR-ODSⅢ柱(150mm×2mm,2.2μm)进行分离,流动相为乙腈100%,流速为0.8mL/min,检测波长为202nm,柱温为30℃。结果表明,UPLC法具有很好的重复性和回收率。甾类化合物分析的日内和日间相对标准偏差分别为0.10%~0.33%(n=5)和0.07%~1.66%(n=5)。获得了在0.3~1.6μg范围内很好的线性范围。白桦脂醇、麦角甾醇、羊毛甾醇、胆甾醇、豆甾醇和谷甾醇的回收率分为97.05%,98.74%,95.65%,101.45%,96.62%和96.14%。UPLC法适合用来快速、准确定量测定桦褐孔菌发酵菌丝体中6种甾类化合物。     

Bacillus pumilus WL-11产生木聚糖酶的生物机制

木聚糖酶是木聚糖降解酶系中起主要作用的酶,微生物来源的木聚糖酶多数是诱导产生的。研究了不同底物对Bacillus pumilus WL-11产生木聚糖酶的影响,并对以木糖作唯一碳源培养菌体在衰亡期时发酵液中木聚糖酶酶活的升高现象进行了研究。结果表明,由Bacillus pumilus WL-11 产生的木聚糖酶是诱导产生的,在所试验的碳源中,木聚糖为唯一碳源时产酶最高;木糖在低浓度时对WL-11产酶的诱导作用高于其在高浓度时的诱导作用;在细胞衰亡期细胞破碎其细胞内部的组成型酶释放到发酵液中,导致发酵液中酶活升高。     

L-精氨酸高产菌的诱变育种及其摇瓶产酸条件

以亚硝基胍(NTG)逐级处理钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)JDN28,分别选用D-精氨酸、甲基半胱氨酸为结构类似物进行抗性选育,获得一株L-精氨酸的高产菌株YDM403(His-,SGr,D-Argr,methyl-Cysr).在含葡萄糖120 g/L的优化培养基中,摇瓶发酵96 h,L-精氨酸达28～32 g/L,较出发菌株提高了113％.     

营养化学品的生物制造研究进展

基于绿色生物制造合成营养化学品是实现可持续发展的重要保障,该领域的技术发展和应用有望给食品、医药、化工及农业等行业带来颠覆性的技术变革。作者概述了生物信息学、基因组编辑技术、系统代谢工程策略以及酶工程技术等在营养化学品生物制造领域的应用研究进展;简述了功能糖类、氨基酸类、功能性脂质类、维生素类和黄酮类营养化学品的生物制造方法,展望了营养化学品的生物制造未来及可能存在的挑战,期待为提升绿色生物制造的竞争力提供参考。     

六味地黄汤抑制大鼠生精细胞凋亡及其促进精子发生

用醋酸棉酚建造大鼠生精障碍模型,用六味地黄汤灌胃治疗,以市售六味地黄丸和甲基睾酮分别为对照和阳性对照,TUNEL法检测实验各组大鼠睾丸生精细胞的凋亡情况,计数实验各组大鼠精子数量,考察实验各组大鼠精子的质量.结果表明,六味地黄汤各治疗组、阳性对照组大鼠的精子数量、精子爬高均与模型组有显著性差异(P<0.01),各治疗组大鼠的精子质量(活力)也显著优于模型组;各实验组大鼠睾丸凋亡的生精细胞明显少于模型组.由此显示,六味地黄汤复方可显著抑制大鼠睾丸生精细胞的凋亡,对生精障碍大鼠有显著的促进生精作用,并可显著提高大鼠精子的质量.     

不同供氧水平对L-精氨酸分批发酵过程的影响

以钝齿棒杆菌Corynebacterium crenatum SYPA5-5为研究菌株,通过不同摇瓶装液量试验,考察发酵过程中供氧对L-精氨酸合成的影响。作者分别采用发酵动力学模型和代谢流量分析对实验结果进行分析后发现：在发酵前期,高供氧使HMP途径更加活跃,生成大量NADPH促进菌体生长;高供氧控制同样利于L-精氨酸的合成,一方面是由于菌体的高葡萄糖摄入量,另一方面是由于有更多的流量从α-KG流向Arg的前体物质Glu。