种子粉基体黄瓜绿斑驳花叶病毒标准样品研制及应用

基于国内黄瓜绿斑驳花叶病毒(cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV)标准样品缺失的问题，以自然感染CGMMV的西葫芦种子批为原料，经特异性鉴定确认后，制备了西葫芦种子粉基体CGMMV标准样品，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法和实时荧光定量RT-PCR法对其进行确证。结果表明所制备的标准样品性能稳定，经国内8家实验室对样品进行协同定值后，再经Shapiro-Wilk检验均符合正态分布。此外，采用Grubb’s法检验进一步证实该种子粉基体标准样品中含有CGMMV。以上结果表明，该基体标准样品达到了国家标准样品的技术要求，或可用于实验室质量控制及能力验证、检测方法验证等活动。     

基于榛子过敏原2S albumin基因的实时荧光聚合酶链式反应检测方法开发

目的 开发一种基于2S albumin基因的实时荧光聚合酶链式反应检测方法(real-time fluorescent polymerase chain reaction，qPCR)用于检测食品中的榛子成分。方法 采用qPCR技术，对建立的方法的特异性、扩增效率、检出限和稳健性进行验证。结果 本方法对检测目标呈现出高特异性，与其余12种非目标样品无交叉反应。扩增效率为99.42%，相关系数r2为0.9941，两者均符合实时荧光PCR方法验证指南要求。该方法检出限（limit of detection，LOD6）为每个反应5拷贝（2.5 copies/μL），可检测出食品中含有的微量榛子成分。使用正交实验设计评估该方法具有很好的稳健性（P=0.07），可转移到其他实验室及常规分析中使用。结论 基于2S albumin基因组分的qPCR检测方法可用于识别食品中潜在的榛子成分，对于预防榛子过敏及开发减敏脱敏榛子食品研究具有很好的技术支撑。