基于固定化酶的蛋白质磷酸酶抑制率法测定腹泻性贝类毒素

目的 建立和优化用于检测腹泻性贝类毒素(DSP)的固定化蛋白质磷酸酶2A(PP2A)抑制率法。方法 以分离提取的PP2A为材料,根据DSP抑制PP2A酶活性的原理,建立用于检测DSP的固定化PP2A酶抑制率法,并对最佳酶用量和反应体系参数等进行了优化。结果 最佳的固定化PP2A酶蛋白量2μg、固定化配比为琼脂糖与PP2A酶蛋白量为1:1、pH值为8.4;采取4参数Logistic曲线法进行标准曲线拟合,曲线R2值达0.994,检测限为3.45μg/L,实际样品测定时具有良好的准确性和重复性。结论 建立的固定化PP2A酶抑制率法有望作为低成本、操作简单的DSP快速筛检方法推广应用。     

乳酸菌富集钙的研制

利用人体肠道有益菌——乳酸菌发酵不同粒度的超微粉碎贻贝壳粉,通过研究发酵过程中超微粉碎贻贝壳粉中结合钙游离的影响,优选出乳酸菌发酵贻贝壳粉的最佳生产工艺。结果表明,当贻贝壳粉粒度为1000目、接种贻贝壳粉浓度为20%、乳酸菌接种量为3%、蔗糖浓度为5%时,贻贝壳粉结合钙最大游离转化率为29.6%,从而开发出一种新型的生物态补钙制剂。     

风味香糟鱿鱼低盐发酵加工工艺研究

以秘鲁鱿鱼和酒糟为原料,对风味香糟鱿鱼低盐发酵加工工艺进行研究和优化。结果表明,低盐发酵香糟鱿鱼的最佳加工工艺为:腌渍盐浓度6%,腌渍时间4h,干燥温度60℃以及干燥时间10h。研究表明,在最佳真空糟制时间6d下所制产品的风味最佳。在上述优化条件下研制的酒糟鱿鱼风味独特、回味悠长且营养丰富。实验还通过感官评定和理化实验对产品的一系列指标进行了测定,并测得本产品的实际盐浓度约为3.5%,符合低盐标准。     

响应面优化鱿鱼须酶法脱皮工艺及其质构特性

采用不同蛋白酶进行鱿鱼须脱皮实验,以白度值和原料保留率为指标,筛选出最适蛋白酶。在单因素试验基础上,采用Box-Behnken试验设计优化秘鲁鱿鱼须酶法脱皮工艺参数,并通过挥发性盐基氮（total volatile basicnitrogen,TVB-N）含量、质构与显微组织分析样品的新鲜度及质构特性。结果表明,回归模型能较好反映因素水平与响应值的关系,并确定最适酶法脱皮工艺为胰酶添加量0.25%、料液比17∶20（g/mL）、酶解时间20 min,在此条件下,样品的白度值为63.95±0.31,原料保留率为（81.22±0.28）%,TVB-N含量为（27.60±0.34） mg/100 g,且质构特性与肌纤维组织均无显著变化。脱皮后的秘鲁鱿鱼须TVB-N含量符合GB 2733-2005《鲜、冻动物性水产品卫生标准》规定,色泽鲜亮、肉质有弹性、原料保留率高,该工艺适合生产实际需求。     

壳聚糖酶高产菌株的冷源等离子体诱变及发酵条件的优化

为获得高产壳聚糖酶的菌株,以实验室分离纯化的鹿皮曲霉(Aspergillus cervinus)ZJOU-AC1为原料,对其进行冷源等离子体诱变和筛选,并设计单因素试验和L_9(3~4)正交试验对诱变菌株进行发酵条件优化。通过实验,确定最佳诱变时间为90 s,获得了1株稳定遗传的突变菌株鹿皮曲霉(Aspergillus cervinus)ZJOU-AC2,其壳聚糖酶活力比原始菌株提高了50.7%,优化后最佳发酵条件为发酵温度为30℃,初始pH 6.0,发酵时间为80h,接种量为3%,此时发酵液中的壳聚糖酶活力比优化前提高了15.07%。     

不同贮藏温度条件下鲐鱼货架期预测模型的构建

为了探索海上移动运输船上东海鲐鱼新鲜度随温度变化规律及其动力学特性,将鲐鱼贮藏在0、5、10、15 ℃条件下,测定K值、挥发性盐基氮（total volatile base nitrogen,TVB-N）值与菌落总数（total viable count,TVC）,并进行感官评分,研究其货架期预测模型。结果显示,随贮藏时间的延长,鲐鱼的感官品质指标逐渐下降,K值、TVB-N值和TVC均逐渐上升。实验用Arrhenius方程构建了贮藏温度、贮藏时间与K值、TVB-N值和TVC之间的动力学模型,其中,K值变化的活化能（Ea）及速率常数（k0）分别为30.54 kJ/mol和1.54×104;TVB-N变化的Ea及k0分别为41.21 kJ/mol和4.40×105;TVC变化的Ea及k0分别为46.78 kJ/mol 和2.93×106。建立的动力学模型可以在0～15 ℃范围内对鲐鱼的货架期进行准确预测。     

海鲜风味调味料的制备及其氨基酸组成分析

以远东拟沙丁鱼酶解液为原料,采用美拉德反应制备具有海鲜风味的调味料.根据褐变程度及感官评分值,优化了美拉德反应条件,并分析了产物的氨基酸组成.结果表明,当还原糖添加量2.5％、反应时间60min、反应温度115℃时,远东拟沙丁鱼酶解液美拉德反应产物鱼香味和鲜味较为浓郁.产物中必需氨基酸和鲜味氨基酸分别占总氨基酸含量的3...     

响应面法优化复合酶水解细点圆趾蟹下脚料工艺

为了提高蟹类资源利用率,研究胰蛋白酶和风味蛋白酶水解细点圆趾蟹下脚料的工艺条件。在单因素试验基础上,选用温度、pH、加酶量、时间4个反应因素,以蛋白质的水解度为指标,通过4因素3水平Box-Behnken响应面分析法优化其水解条件。实验表明,最适水解条件为:温度50℃,pH值为7.5,加酶量为1200U/g,时间为3.5h(先添加胰蛋白酶,1.2h后加风味酶),酶的复合比为2:1,液料比为3:1,在此条件下,水解度可达到26.22%。验证实验水解度为26.01%,表明实验结果与软件优化结果相符。     

凹凸棒土负载壳聚糖去除鱼油重金属的实验研究

以凹凸棒土和壳聚糖为原料,制成凹凸棒土负载壳聚糖新型吸附剂,脱除鱼油中重金属。实验探析了壳聚糖的不同脱乙酰度和凹凸棒土的壳聚糖负载量对重金属脱除率的影响;同时考察了pH值、吸附时间、吸附温度对鱼油重金属脱除率的影响。结果表明,凹凸棒土负载壳聚糖吸附剂吸附能力随着壳聚糖脱乙酰度增加而增强;壳聚糖负载率为10%时,吸附能力最强。吸附剂对汞(Ⅱ)、铅(Ⅱ)、镉(Ⅱ)、砷(Ⅲ)最佳吸附条件为:在pH=10、吸附温度为35℃时,对铅(Ⅱ)、镉(Ⅱ)、砷(Ⅲ)的吸附平衡时间为60 min,而汞(Ⅱ)的吸附时间应延长至80 min。     

固定化Bacillus thuringiensis ZJOU-010壳聚糖酶的研究

采用吸附交联技术,以DEAE-22 纤维素为载体、戊二醛为交联剂,固定Bacillus thuringiensis ZJOU-010壳聚糖酶,考察固定化酶的制备条件,并研究固定化酶的性质。结果表明B.thuringiensis ZJOU-010 壳聚糖酶的最佳固定化条件为：戊二醛体积分数3.0%、加酶量20mg、固定化时间10h;在此条件下制备的固定化壳聚糖酶的最适pH 值和温度分别为4.83 和50℃;与游离酶相比,该固定化酶的热稳定性较好,在40℃和50℃条件下的半衰期(t1/2)分别为36.3h 和6.2h,动力学常数Km 值为9.19g/L;该固定化酶重复使用10 批后活力仍可保持初始活力的88.32%。