不同剂量N-亚硝基双-2-氧丙基诱导仓鼠胰腺癌的成模效果及对相关基因表达的影响

目的 探讨不同时间、不同剂量N-亚硝基双-2-氧丙基（N-nitrosobis-2-oxopropylamin,BOP）诱导仓鼠胰腺癌的成模效果及仓鼠胰腺癌组织COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ等基因表达的变化.方法 72只仓鼠按完全随机法分为3组,每组24只.A组采用小剂量BOP长周期皮下注射诱导造模（10 mg/kg体质量,每周1次,连续8周）;B组采用大剂量BOP短周期皮下注射诱导造模（首次剂量70 mg/kg体质量,后3周每周20 mg/kg体质量）;C组为未注射BOP的对照组.成模后取胰腺组织及肝脏组织行病理组织学检查.采用实时PCR法及蛋白质印迹法检测仓鼠胰腺癌组织COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ等基因的表达.结果 A组仓鼠中19只成功诱导胰腺癌模型;B组均未见胰腺肿瘤形成,而18只仓鼠成功诱导肝内胆管细胞癌;C组胰腺及肝脏均未见异常.仓鼠胰腺癌组织COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ mRNA的表达量分别为对照组的1.93、2.03、1.57、5.55和3.54倍,差异有统计学意义（P值均＜0.05）;COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ蛋白的表达量分别为2.47 ±0.22、0.56 ±0.05、1.23 ±0.05、1.55 ±0.13、2.02 ±0.01,而对照组仓鼠正常胰腺组织的蛋白表达量分别为0.80±0.08、0.39 ±0.01、0.60 ±0.01、0.53 ±0.03、0.40 ±0.02,两组差异均有统计学意义（P值均＜0.05）.两组MHC-ⅡmRNA及蛋白表达的差异无统计学意义.结论 小剂量BOP长周期皮下注射能成功诱导仓鼠胰腺癌模型,胰腺癌组织的COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ基因表达上调,可能参与仓鼠胰腺癌的发生和发展.     

长链非编码RNA GAS5在卵巢癌中的表达及对SKOV-3细胞增殖与侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA GAS5在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞株SKOV-3增殖与侵袭能力的影响。方法 qRT-PCR检测39例卵巢癌组织及对应癌旁正常卵巢组织lncRNA-GAS5的表达;通过重组质粒过表达SKOV-3细胞lncRNA-GAS5,采用CCK8法与Transwell侵袭实验分别检测过表达lncRNA-GAS5后SKOV-3细胞增殖与侵袭能力的变化;qRT-PCR及Western blot检测PTEN表达变化。结果 lncRNA-GAS5在卵巢癌组织表达水平低于对应癌旁正常卵巢组织,P0.01。lncRNA-GAS5重组质粒转染SKOV-3细胞后可抑制细胞的增殖与侵袭能力;qRT-PCR与Western blot结果证实,过表达lncRNA-GAS5后,SKOV-3细胞PTEN的表达上调,P0.01。结论 lncRNA-GAS5在卵巢癌组织中表达降低,lncRNA-GAS5可能通过上调PTEN的表达来抑制SKOV-3细胞的增殖与侵袭。     

经支气管淋巴结针吸活检164例结果分析

目的 评价经支气管淋巴结针吸活检(TBNA)在纵隔肺门肿大淋巴结诊断中的作用.方法 选胸部CT检查发现纵隔肺门淋巴结肿大、估计支气管镜检查不能发现气道内新生物的患者,在支气管镜检查过程中完成TBNA操作.TBNA取出的每份标本分送呼吸科实验室和病理科细胞学室检查.结果 (1)人选的164例患者中80例诊断肺癌,69例诊断肺部良性疾病,其他类型恶性肿瘤2例,13例最终无明确诊断.(2)164例患者共穿刺260个部位,463针,其中TBNA穿刺成功445针(96.1%).(3)80例肺癌患者中,TBNA总结果 阳性66例(82.5%),其中25例患者TBNA结果 是惟一病理学证据.80例肺癌患者共穿刺122枚淋巴结,其中TBNA结果 阳性80枚(65.6%).(4)TBNA结果 的阳性率在小细胞肺癌(SCLC)和直径≥3 cm淋巴结中阳性率稍高,但差异无统计学意义.(5)2006年6月1日-2007年12月31日,64例(64/87,73.5%)患者可获得明确组织学标本.其中TBNA穿刺物病理诊断结节病阳性率为53.3%(8/15),诊断肺癌阳性率为78.6%(33/42).(6)100例(61.0%)患者穿刺部位少量出血.结论 TBNA安全性好,对肺癌的诊断和分期判定有很大帮助,对肺部良性疾病的诊断亦有一定帮助.     

整合子-基因盒体系与细菌耐药关系及研究进展

目前,细菌耐药性已经对公共卫生问题构成严重威胁,整合子-基因盒体系是介导细菌获得耐药性与耐药基因播散的重要分子机制。整合子在整合酶作用下识别并俘获游离耐药基因盒,随着转座子或接合性质粒播散,造成细菌间耐药基因的扩散和多重耐药性的产生。本文就整合子-基因盒体系的结构、分类、分布、起源及播散机制等几方面研究近况开展讨论。     

升阳举陷法临床应用举隅

例举三个应用升阳举陷法的治病验案,分别使用升陷汤治疗胸中大气下陷、补中益气汤治疗中气下陷、益气聪明汤治疗上气虚陷,并分析气虚下陷按部位可分为大气下陷证、中气下陷证、上气虚陷证,对升阳举陷法在临床中应用作了简要概括.     

灯盏花素对D-半乳糖引起小鼠记忆障碍及肝、肾异常变化的影响

目的:利用D-半乳糖引起小鼠衰老模型,观察灯盏花素(Breviscapine,Bre)对衰老小鼠记忆障碍、肝肾组织结构异常改变及血脂代谢的影响。方法:雌性昆明小鼠60只随机分为5个组,除空白对照组外,其他各组小鼠每天皮下注射D-半乳糖120mg/kg制备衰老模型,从第41d开始,3个剂量药物组小鼠在sc D-半乳糖的同时,腹腔注射Bre 5,10和20 mg/kg 67d,在给药第66d进行避暗箱实验训练,24h后进行小鼠记忆能力检测,在给药第67d避暗实验结束后小鼠断颈处死,取血清测定血脂变化,分离肝脏和肾脏HE染色观察其组织结构变化。结果:D-半乳糖明显引起小鼠记忆障碍、肝肾组织结构异常和血脂紊乱。与空白对照组相比,模型组小鼠避暗实验潜伏期缩短(P<0.01)、受电击次数多(P<0.01),血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白(LDL-C)升高(P<0.01)、高密度脂蛋白(HDL-C)降低(P<0.05),肝、肾组织结构异常改变。5,10和20mg/kg灯盏花素给药67天可不同程度地降低D-半乳糖引起小鼠避暗实验潜伏期缩短和受电击次数的增多,改善血清血脂水平和肝、肾组织结构异常变化。结论:灯盏花素对D-半乳糖引起小鼠记忆障碍、血脂紊乱及肝肾组织结构异常改变具有明显的改善作用,该作用提示灯盏花素可能有利于延缓衰老和老年性痴呆病的治疗。     

基质金属蛋白酶抑制剂抗肝癌细胞系侵袭作用的实验研究

目的探讨基质金属蛋白酶抑制剂-3（TIMP-3）对人肝癌细胞系（HXPG2）恶性表型的影响。方法利用基因重组技术构建含全长人TIMP-3cDNA的真核表达载体,利用脂质体法转染入HEPG2细胞。检测转染后鳓细胞的金属蛋白酶（MMPs）的活性、体外侵袭能力、制成裸鼠肝癌动物模型后体内成瘤性及自发转移能力等多项生物学行为的变化。结果HEPG2细胞在转染了TIMP-3cDNA后表达TIMP-3蛋白,与朱转染细胞及空载体对照组相比,体外侵袭能力、软琼脂集落形成能力均降低,裸鼠的肝癌肿瘤体积及重量也相应降低,且肿瘤组织中微血管密度降低,细胞外基质基本保持完整。结论特异性上调TIMP-3基因的表达可在一定程度上逆转HEPG2细胞的恶性表型。     

肝癌生长抑素受体mRNA表达的研究

生长抑素（SST）是一种广泛存在于人体内分泌系统中环状的多肽类激素，近来SST及其类似物对肝癌诊断及治疗方面的作用正日益受到关注，其多种生物活性的发挥是通过靶细胞膜上的特异性受体介导的。本实验应用逆转录聚合酶链反应（RTPCR）检测原发性及转移性肝癌癌组织、癌旁组织、非癌肝组织、人肝癌细胞株HepG2及人肝细胞QSG-7701中生长抑素受体（SSTR）五种亚型mRNA的表达情况。     

雷公藤内酯醇诱导胰腺癌细胞凋亡及对5-脂氧合酶和凋亡基因表达的影响

目的 探讨雷公藤内酯醇(TL)在胰腺癌化学预防和治疗中的应用价值.方法 采用人胰腺癌细胞株SW1990作为研究对象,MTT法和吖啶橙(AO)染色分别检测SW1990细胞的增殖和凋亡,采用半定量RT-PCR法检测5-脂氧合酶(5-LOX) mRNA、bcl-2 mRNA和bax mRNA的表达.结果 10 μg/ml的TL对SW1990细胞生长的抑制率达30%以上,0.1 μg/ml TL处理24 h后,SW1990细胞凋亡指数达38.5%,显著高于对照组的14.97%.5-LOX、bcl-2、bax mRNA表达从0.7160 ± 0.0251,0.2446 ± 0.0311和0.0260 ± 0.0065分别变化为0.2400 ± 0.0316,0.0700 ± 0.0158和0.0700 ± 0.0158.结论 TL能抑制胰腺癌细胞增殖和诱导细胞凋亡,其凋亡机制可能与下调5-LOX mRNA和bcl-2 mRNA、上调bax mRNA基因表达有关.     

经皮腔内肾动脉成形术治疗老年冠心病合并肾动脉狭窄30例临床疗效

目的探讨腔内治疗老年冠心病合并肾动脉狭窄(RAS)的临床疗效。方法回顾性分析了2008年6月至2011年5月在该院治疗的60例老年冠心病合并RAS患者的临床资料,60例患者根据治疗方法不同分为观察组和对照组,观察组患者给予腔内治疗,对照组采用常规保守治疗。记录手术情况,术后随访12个月评价肾功能、血压以及再狭窄发生率。结果观察组手术成功率100%。观察组高血压获益率和肾功能获益率为86.7%、90.0%,显著高于对照组(70.0%、63.3%)(P<0.05)。观察组随访12个月无再狭窄发生,对照组有7例(23.3%)出现再狭窄。结论腔内治疗冠心病合并RAS手术成功率高,可以有效改善患者血压和肾功能,术后无再狭窄发生,近期随访效果满意。