淋病奈瑟菌耐药外排泵研究进展

淋病奈瑟菌多重耐药是淋病防治的一项难题,主动外排系统是引起该菌多重耐药的主要机制。至今发现淋病奈瑟菌4个外排泵系统,分别为：MtrCDE、MacAB、NorM和FarAB,在一些菌株还发现MtrF泵蛋白。本文就外排泵系统的组成、功能、基因调控等方面的研究现状进行综述。     

应用表观遗传学方法检测母体循环中游离胎儿DNA

目的:探讨表观遗传学方法检测孕妇血浆中游离胎儿DNA水平的应用价值。方法:随机选择早、中、晚期妊娠孕妇各20例,以非妊娠妇女20例为对照组。提取血浆中的总游离DNA,用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测各组血浆标本中目的基因m-maspin(一种肿瘤抑制基因启动子的甲基化序列)、u-maspin(前者的未甲基化序列)的表达水平,再进行相对定量,对妊娠组和对照组样本均数进行统计学分析。结果:(1)m-maspin在妊娠早、中、晚期孕妇血浆中的浓度分别是非妊娠妇女血浆中浓度的1.0、1.1、1.1倍,差异无统计学意义(P>0.05);(2)u-maspin在正常非妊娠妇女血浆中未能检测到,在60例孕妇血浆中57例可检测到,它在孕妇血浆中的浓度随妊娠进展呈升高趋势,中、晚期妊娠妇女血浆中其浓度相对于早期妊娠分别为1.7倍和3.1倍,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:m-maspin不是妊娠特异性标志物,u-maspin为妊娠特异性标志物。u-maspin基因可作为孕妇血浆中游离胎儿DNA水平变化的表观遗传学标志,相对于以胎儿性别基因作为遗传学标志的检测方法,它有助于扩大非创伤性产前诊断的临床应用范围。     

关节镜TRapidLoc与FasTFix缝合器修复内侧半月板后角损伤40例

背景:目前关节镜下修复治疗内侧半月板后角损伤应用较多的主要有RapidLoc与FasTFix半月板缝合系统.目的:比较RapidLoc与FasTFix半月板缝合器修复内侧半月板后角损伤效果.设计、时间及地点:对比观察,于2007-01/2008-04在南方医科大学附属深圳医院运动医学科完成.对象:选择内侧半月板后角损伤患者40例,年龄19～36岁,男29例,女21例,随机分2组,每组20例.方法:在膝关节镜下分别采用RapidLoc与FastFix半月板缝合器修复损伤的内侧半月板后角,修复后采用个体化康复计划.主要观察指标:①RapidLoc组与FastFix组修复效果,判断标准包括:关节疼痛交锁、肿胀、关节间隙压痛、McMurray试验.②两组临床愈合率.③并发症.结果:各组病例全部得到随访,平均随访最短6个月,最长14个月.根据临床标准3例失败(RapidLoc2例,FastFixl例).临床愈合率RapidLoc为90%:FasTFix为95%:两组差异无显著性意义(P<0.05).两组病例均未出现修复中血管、神经、肌腱损伤,修复后FastFix组1例感染.结论:RapidLoc与FasTFix系统虽然固定方式与初始张力不同,但只要修复过程中仔细、修复后康复个性化,半月板修复后均可获得较高的临床愈合率.     

关节镜下RapidLoc与FasTFix缝合器修复内侧半月板后角损伤40例

背景：目前关节镜下修复治疗内侧半月板后角损伤应用较多的主要有RapidLoc与FasTFx半月板缝合系统。目的：比较RapidLoc与FasTFix半月板缝合器修复内侧半月板后角损伤效果。设计、时间及地点：对比观察，于2007—01／2008—04在南方医科大学附属深圳医院运动医学科完成。对象：选择内侧半月板后角损伤患者40例，年龄19～36岁，男29例，女21例，随机分2组，每组20例。方法：在膝关节镜下分别采用RapidLoc与FastFix半月板缝合器修复损伤的内侧半月板后角，修复后采用个体化康复计划。主要观察指标：①RapidLoc组与FastFix组修复效果，判断标准包括：关节疼痛交锁、肿胀、关节间隙压痛、McMurray试验。②两组临床愈合率。③并发症。结果：各组病例全部得到随访，平均随访最短6个月，最长14个月。根据临床标准3例失败（RapidLoc2例，FastFix1例）。临床愈合率RapidLoc为90％；FasTFix为95％；两组差异无显著性意义（P〈O．05）。两组病例均未出现修复中血管、神经、肌腱损伤，修复后FastFix组1例感染。结论：RapidLoc与FasTFix系统虽然固定方式与初始张力不同，但只要修复过程中仔细、修复后康复个性化，半月板修复后均可获得较高的临床愈合率。     

肺静脉电隔离对环肺静脉线性消融术效果的影响

目的:探讨肺静脉完全隔离与否对环肺静脉线性消融术治疗阵发性心房颤动(Af)效果的影响。方法:63例阵发性Af患者随机分为隔离肺静脉组(30例)和不隔离肺静脉组(33例)。所有患者均在三维电解剖系统指导下完成环左右肺静脉线性消融。在术前和术后均放置10极环状导管(Lasso)以标测各肺静脉电位情况,对隔离肺静脉组,如环肺静脉消融完成后仍残存肺静脉电位则补充进行节段性肺静脉隔离,而对不隔离肺静脉组环肺静脉消融完成后不作进一步处理。结果:环肺静脉消融完成后,不隔离肺静脉组33例患者中30例(90.9%)未达完全肺静脉隔离。隔离肺静脉组30例患者中26例(86.7%)未达完全肺静脉隔离,在行补充性节段消融后,隔离肺静脉组完全肺静脉电隔离率达96.7%(29/30)。平均随访(11±3)个月后,不隔离肺静脉组81.8%(27/33)的患者和隔离肺静脉组83.3%(25/30)的患者停用抗心律失常药物后无Af发作,2组间差异无统计学意义。结论:环肺静脉线性消融术用于治疗阵发性Af时,术中完全的肺静脉电隔离对于提高长期疗效并非必需。     

胶带粘贴技术结合LC-MS法测定人体皮肤角质层中艾迪康唑浓度

采用胶带粘贴技术采集人体浅层皮肤样本,经提取处理后进行LC-MS测定,建立了人体皮肤角质层中艾迪康唑的定量分析方法。LC-MS测定以酮康唑为内标,甲醇-0.01%甲酸水溶液(65∶35)为流动相,经Shim-pack VP ODS C₁₈ 柱分离后,电喷雾离子化,选择性正离子检测。研究表明该方法在0.6~1 800 ng/mL范围内线性关系良好(r=0.999 8),方法回收率、批内及批间精密度均符合生物样本药物浓度测定要求。运用该方法对10例健康志愿者外用艾迪康唑乳膏后皮内药物浓度的动态变化过程进行了初步考察,结果表明该方法灵敏、专属,可用于人体局部外用艾迪康唑乳膏后角质层中药物浓度测定及人体皮肤药代动力学研究。     

应用阿司匹林预防及治疗再植断指血管危象的临床研究

<正> 2000年10月～2001年6月我们进行了应用阿司匹林预防、治疗断指再植术后血管危象的临床研究,取得了较好的疗效,报告如下:1 资料与方法1.1 一般资料实验组50例60指,其中男48例,女2例;年龄:16～42岁,平均31.6岁;指别:拇指11例,示指8例,小指26例,示、中、环指同时离断5例;伤因:单纯切割伤38例42指(其中自残性断指34例),旋转撕脱断伤12例18指。均采用常规术式再植,指骨短缩2 mm～6 mm不等。血管吻合采用端-端、4～6针法。血管吻合比例:动脉:静脉为1:2～2:3。术后常规点滴低分子右旋糖酐500 ml,2次/日,维持7天。对照组随机抽取2000年1月～6月断指再植患者48例60指,平均年龄为33.1岁。单纯切割伤断     

经胸超声心动图在小儿冠状动脉瘘诊疗中的应用

目的探讨经胸超声心动图(TTE)在小儿冠状动脉瘘(CAF)诊疗中的价值。方法回顾性分析27例小儿CAF患者,分析其临床症状、TTE检查结果、其他影像学检查结果、治疗方案及随访情况。结果27例CAF患者中,74.07%(20/27)有心脏杂音,14.81%(4/27)有临床症状。7.41%(2/27)出现左心室射血分数减低。55.56%(15/27)的CAF为单纯型;62.96%(17/27)的CAF起源于右冠状动脉,33.33%(9/27)起源于左冠状动脉,而3.70%(1/27)起源于双侧冠状动脉。CAF的瘘道出口可能出现在右心室(13/27,48.15%),肺动脉(6/27,22.22%),右心房(5/27,18.52%),左心室(2/27,7.41%)或冠状静脉窦(1/27,3.70%)。17例患者接受外科手术治疗,1例患者接受介入封堵治疗。TTE精准诊断19例CAF。对于9例接受保守治疗的患者,于诊断后1、3、5年进行随访,未发现自发性闭合、心力衰竭、感染性心内膜炎或死亡病例。结论 TTE安全、有效,可用于筛查、诊断CAF,及评价治疗效果和并发症。     

S100A8/A9通过Wnt/β-catenin促进口腔鳞癌的侵袭迁移

目的 研究外源性钙结合蛋白A8/A9(S100A8/A9)通过Wnt/β-catenin促进口腔鳞癌(OSCC)细胞CAL-27和SCC-25迁移和侵袭能力。方法 分别或共同添加S100A8、S100A9蛋白培养CAL-27、SCC-25,蛋白印记法(Western blot)检测β-catenin的表达情况;免疫荧光鉴定添加S100A8/A9蛋白培养CAL-27、SCC-25 48 h后β-catenin的表达;加入20μg/ml Wnt/β-catenin通路抑制剂Dickkopf相关蛋白1(DKK-1),Western blot和实时定量荧光PCR(qPCR)检测β-catenin的表达;采用Transwell实验比较正常对照组(Control组)、添加S100A8/A9蛋白组、加入DKK-1组、加入DKK-1并添加S100A8/A9蛋白回复组的细胞侵袭和迁移能力;Western blot实验检测细胞髓细胞瘤病毒癌基因(c-Myc)和细胞周期蛋白D(cyclinD1)的表达。结果 S100A8、A9能激活Wnt/β-catenin通路,与S100A8和S100A9分别培养相比,共...     

重组人骨形态发生蛋白2腺病毒载体的构建与鉴定

背景:目前报道的重组腺病毒构建方法较复杂,构建周期长,导致重组腺病毒构建的成功率较低.GatewayTM技术是基于λ噬菌体的位点特异性高效重组系统,其构建重组病毒载体具有快捷高效的特点.目的:构建含人骨形态发生蛋白2基因的重组腺病毒载体,为应用骨形态发生蛋白2基因治疗的研究奠定基础.设计、时间及地点:单一样本规察,实验于2008-02/06在深圳市第二人民医院中心实验室完成.材料:pOTB7-BMP-2质粒、HEK293为ATTC产品;BLOCK-iTTMAdenovirus Expression System为Invitrogen产品;大肠杆菌DH5 α为Biontex产品.方法:用聚合酶链反应方法扩增骨形态发生蛋白2目的基因,并插入载体pMD19-T Simple Vector中进行测序分析.将骨形态发生蛋白2基因亚克降到穿梭载体pEC3.1(+)中,构建pEC3.1-BMP-2穿梭质粒,再将其中的表达盒通过重组克隆到pAd/BLOCK-iTTM-DEST腺病毒载体中,线性化后转293细胞进行包装获得重组腺病毒rAd-BMP2.主要观察指标:①目的基因骨形态发生蛋白2的聚合酶链反应扩增.②重组质粒TS-BMP2的构建.⑨重组pEC3.1-BMP2的构建.④重组pAd-BMP2的构建.⑤重组腺病毒的制备与鉴定.结果:正确扩增长约1.2 kb的骨形态发生蛋白2 cDNA,并成功地构建其腺病毒载体,经线性化的pAd-BMP2 DNA转染HEK293细胞,包装、扩增后得到入骨形态发生蛋白2重组腺病毒(rAd-BMP2),其滴度约为1×1010PFU/mL,该滴度可满足进一步的骨形态发生蛋白2成骨作用的研究.结论:成功地构建重组人骨形态发生蛋白2腺病毒载体.